1、 掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术 掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术 掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术实验材料一、菌种：一、菌种：大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌（大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌（BAP、MAC、SS）二、生化管：二、生化管：KIAKIA、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管（、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管（1 1套套/2/2人）人）三、
2、诊断血清：三、诊断血清：沙门菌多价沙门菌多价四、其他：四、其他：玻片、盐水、接种环（针）、革兰染液、玻片、盐水、接种环（针）、革兰染液、3%H2O23%H2O2、氧化酶试剂、氧化酶试剂、液体石蜡液体石蜡实验内容一、菌落观察：一、菌落观察：大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌（BAPBAP、MACMAC、SSSS）菌落形态、颜色、溶血现象、迁徙生长现象观察与描述菌落形态、颜色、溶血现象、迁徙生长现象观察与描述二、形态观察：二、形态观察：所有细菌革兰染色所有细菌革兰染色 显微镜下细菌形态、染色性观察与描述显微镜下细菌形态、染色性观察与描述三、
3、生化实验：三、生化实验：1.触酶试验：触酶试验：2.氧化酶试验：氧化酶试验：3.KIA试验（试验（1支）：支）：4.半固体试验（半固体试验（1支）：支）：5.肠杆菌科微量生化编码管肠杆菌科微量生化编码管（1支）支）6.沙门菌血清学玻片凝集试验沙门菌血清学玻片凝集试验 实验内容（2人/组）粪粪 便便肠道选择培养基肠道选择培养基可疑菌落可疑菌落生化反应生化反应血清学实验血清学实验结果报告结果报告药敏试验药敏试验肠道外标本肠道外标本血平板、弱选择平板血平板、弱选择平板苯丙氨酸（）苯丙氨酸（）VP（）（）苯丙氨酸（）苯丙氨酸（）VP（）（）苯丙氨酸（）苯丙氨酸（）VP（）（）埃希菌属埃希菌属变形杆菌属
4、变形杆菌属克雷伯菌属克雷伯菌属沙门菌属沙门菌属普罗威登斯菌属普罗威登斯菌属肠杆菌属肠杆菌属志贺菌属志贺菌属摩根菌属摩根菌属沙雷菌属沙雷菌属枸橼酸菌属枸橼酸菌属哈夫尼亚菌属哈夫尼亚菌属爱德华菌属爱德华菌属耶尔森菌属耶尔森菌属菌属菌属KIAMIU斜面斜面底层底层气体气体H2S动力动力吲吲哚哚脲酶脲酶埃希菌属埃希菌属AA+/-+-志贺菌属志贺菌属KA-+/-沙门菌属沙门菌属KA+D/+-变形杆菌属变形杆菌属KA+/+-/+克雷伯菌属克雷伯菌属AA+-d+蛋白胨蛋白胨 20g 20g 氯化钠氯化钠 5g 5g琼脂琼脂 20-25g 20-25g蒸馏水蒸馏水 1000ml 1000ml 乳糖乳糖 10g
5、 10g 1%1%中性红水溶液中性红水溶液 5ml 5ml 胆盐胆盐 5g 5g 配方一配方一配方二配方二配方三配方三配方四配方四牛肉膏牛肉膏55牛心浸液牛心浸液1000肉膏液肉膏液850胨胨57.5（胨）5乳乳 糖糖10151010胆盐胆盐10（粗制）10（透析）150（ml）（牛胆汁）8.5（混合）硫代硫酸钠硫代硫酸钠125118.5枸橼酸钠枸橼酸钠1215118.5枸橼酸铁枸橼酸铁0.51枸橼酸铁铵枸橼酸铁铵14磷酸氢二钠磷酸氢二钠54琼琼 脂脂25182013.5煌煌 绿绿0.330.331.00.33中性红中性红22.5377025水水10001000MACC SS 蛋白胨蛋白胨 1
6、0g 10g 葡葡 萄萄 糖糖 1g 1g 氯化钠氯化钠 5 g 5 g 乳乳 糖糖 10g 10g 牛肉膏牛肉膏 3 g 3 g 硫代硫酸钠硫代硫酸钠 0.2g 0.2g 琼琼 脂脂 16g 16g 硫酸亚铁硫酸亚铁 0.2g 0.2g 水水 1000ml 1000ml 0.4%0.4%酚红酚红 6ml 6ml 观察高层与斜面颜色变化情况以及培养基是否变观察高层与斜面颜色变化情况以及培养基是否变黑黑上层固体斜面：乳糖+指示剂下层固体：葡萄糖+指示剂+FeSO4观察指标：葡萄糖、乳糖发酵、H2S 观察穿刺线边缘是否清晰及培养基混浊度观察穿刺线边缘是否清晰及培养基混浊度 有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。培养基混浊。线边缘模糊。培养基混浊。无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。培养基培养基透明度无变化。透明度无变化。有动力有动力 现象现象无动力无动力 现象现象
