1、血液学检验医学宣教血液学检验医学宣教本章主要内容：本章主要内容：造血检验的基本方法造血检验的基本方法n血象和骨髓像检验 骨髓检查的步骤与方法骨髓检查的步骤与方法 有核细胞增生程度、分级标准及粒红比例有核细胞增生程度、分级标准及粒红比例n细胞化学染色检验 常用的细胞化学染色及临床应用常用的细胞化学染色及临床应用 （POXPOX、NAENAE、NAPNAP、FeFe、PASPAS）n骨髓组织病理学检验骨髓组织病理学检验n血细胞的超微结构检验血细胞的超微结构检验n造血检验的临床应用造血检验的临床应用n其他自学其他自学 2血液学检验医学宣教三、骨髓象检验三、骨髓象检验 普通显微镜检查普通显微镜检查 诊
2、断：主要是血液疾病诊断：主要是血液疾病 内容：内容：常规检验常规检验 特殊检验特殊检验3血液学检验医学宣教三、骨髓象检验 临床应用临床应用 1 适应症适应症 血细胞减少或增多。血细胞减少或增多。各种急慢性白血病。各种急慢性白血病。各种类型的贫血。各种类型的贫血。4血液学检验医学宣教 不明原因的骨痛、骨质破坏、肾功不明原因的骨痛、骨质破坏、肾功 能异常、能异常、黄疸、紫癜；黄疸、紫癜；不明原因的长期发热，肝、脾、不明原因的长期发热，肝、脾、淋巴结肿大；淋巴结肿大；出血；出血；恶性血液病化疗的疗效观察；恶性血液病化疗的疗效观察；5血液学检验医学宣教禁忌症：禁忌症：n血友病、晚期妊娠血友病、晚期妊娠
3、6血液学检验医学宣教 主要作用：辅助诊断 （肯定性、支持性、可疑性、排除性诊断）疗效的观察 （完全缓解、部分缓解、未缓解）7血液学检验医学宣教（二）（二）骨髓穿刺骨髓穿刺 穿刺部位n髂后上棘：第五腰椎向上3cm处。n髂前上棘：顶端后约1-2cm处。n胸骨：胸骨中线，相当第二肋间水平的胸 骨体上端。n小于3岁的小儿选择胫骨内侧8血液学检验医学宣教标本的采集骨髓取材的部位和方法部位：胸骨、棘突、髂骨等处方法：多用穿刺法吸取9血液学检验医学宣教骨髓取材情况的判断骨髓取材情况的判断 取材满意：取材满意：抽吸骨髓时病人有特殊的痛感；抽吸骨髓时病人有特殊的痛感；骨髓液和涂片均有骨髓小粒和脂肪滴；骨髓液和涂
4、片均有骨髓小粒和脂肪滴；显微镜观察涂片显微镜观察涂片 骨髓特有细胞如：巨核细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、巨核细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞、网状细胞、成骨细胞、破骨细胞、网状细胞、网状纤维等。网状纤维等。10血液学检验医学宣教细胞比值细胞比值骨髓中性粒细胞杆状核与分叶核外周血中性粒骨髓中性粒细胞杆状核与分叶核外周血中性粒细胞杆状核与分叶核细胞杆状核与分叶核骨髓有核细胞外周血有核细胞骨髓有核细胞外周血有核细胞11血液学检验医学宣教二、二、骨髓细胞学检查的骨髓细胞学检查的 内容与方法内容与方法一、骨髓涂片检查 低倍镜检查 油镜检查 检查结果的临床意义 血涂片的观察 填写检查报告单12
5、血液学检验医学宣教1 1、低倍镜检查：、低倍镜检查：（1 1）观察骨髓涂片）观察骨髓涂片:取材：骨髓小粒、取材：骨髓小粒、脂肪小滴脂肪小滴 制片：厚薄，头、制片：厚薄，头、体、尾分布体、尾分布 染色：细胞着色情况染色：细胞着色情况13血液学检验医学宣教取材、制片、染色取材、制片、染色14血液学检验医学宣教 2.2.判断判断骨髓增生程度骨髓增生程度骨髓细胞增生分级(五级)增生极度活跃增生极度活跃增生明显活跃增生明显活跃增生活跃增生活跃增生减低增生减低增生明显减低增生明显减低15血液学检验医学宣教骨髓增生程度分级骨髓增生程度分级(高倍镜）高倍镜）极度减低15/HP增生减低520/HP增生活跃205
6、0/HP明显活跃50100/HP极度活跃100/HP16血液学检验医学宣教（二）、油镜检查：（二）、油镜检查：（1）有核细胞分类计数：计数200-500个有核细胞，计算各系统各阶段 细胞百分率。（巨核细胞单独计数）（2）计数粒红比例（GE）（3）观察细胞形态有无异常（4）观察有无其他特殊细胞及寄生虫。17血液学检验医学宣教二、血象检验：1.低倍镜检查：（1）涂片、染色情况；（2）有无大的异常细胞；（3）寄生虫；18血液学检验医学宣教2.2.油镜检查：油镜检查：（1 1）分类计数）分类计数100100个个WBCWBC （注意形态及有无异常细胞）；（注意形态及有无异常细胞）；（2 2）注意成熟红细
7、胞的形态）注意成熟红细胞的形态 （如有幼稚红细胞应在计数（如有幼稚红细胞应在计数100100个个WBCWBC中记中记 录幼稚红细胞的数目及其阶段）；录幼稚红细胞的数目及其阶段）；（3 3）粗略估计血小板数目或形态）粗略估计血小板数目或形态;（4 4）有无寄生虫。）有无寄生虫。19血液学检验医学宣教血片检查的重要性血片检查的重要性 1.1.不同疾病时，不同疾病时，骨髓象相似骨髓象相似而血象有区别而血象有区别 2.2.不同疾病时，骨髓象有区别而不同疾病时，骨髓象有区别而血象相似血象相似 （传淋和慢淋）（传淋和慢淋）3.3.同一患者骨髓象变化不显著，血象有异常同一患者骨髓象变化不显著，血象有异常 （
8、传单）（传单）4.4.同一患者骨髓象异常，血象无变化（同一患者骨髓象异常，血象无变化（MMMM）5.5.骨髓象难辨认，血象易辨认骨髓象难辨认，血象易辨认20血液学检验医学宣教细胞化学结果细胞化学结果报告细胞化学结果报告细胞化学结果（专门讲述）（专门讲述）21血液学检验医学宣教填写骨髓报告填写骨髓报告或打印骨髓报告或打印骨髓报告保存好骨髓与血液片保存好骨髓与血液片22血液学检验医学宣教诊断意见诊断意见综合骨髓象、血象和细胞化学所见综合骨髓象、血象和细胞化学所见意见：意见：肯定性诊断肯定性诊断-各种白血病、巨幼细胞性贫血、各种白血病、巨幼细胞性贫血、MM、骨髓转移癌、戈谢病、尼曼骨髓转移癌、戈谢病
9、、尼曼-匹克病等匹克病等支持性诊断支持性诊断-缺铁性贫血、再障、溶贫等可建议作相应检查缺铁性贫血、再障、溶贫等可建议作相应检查 23血液学检验医学宣教可疑性诊断可疑性诊断-排除性诊断排除性诊断-形态学描写形态学描写-对比意见对比意见-诊断意见诊断意见24血液学检验医学宣教骨髓象检查的注意事项骨髓象检查的注意事项 正确认识细胞是骨髓象检查的前提，检正确认识细胞是骨髓象检查的前提，检查者必须反复实践，积累经验，需经较长时查者必须反复实践，积累经验，需经较长时间的锻炼才能熟练掌握。不要根据一两个特间的锻炼才能熟练掌握。不要根据一两个特点就做出肯定或否定的判断。宁可看得仔细点就做出肯定或否定的判断。宁
10、可看得仔细而少看，不可贪多而马虎而少看，不可贪多而马虎25血液学检验医学宣教 正常骨髓象报告：正常骨髓象报告：1)增生活跃 2)粒红比值正常（GE 24：1）3)粒系增生良好：a.占有核细胞的4060%；b.各阶段细胞比例适当；c.细胞形态无明显异常。26血液学检验医学宣教粒细胞各阶段比例：粒细胞各阶段比例：原粒2%，早幼粒5%，中性中幼粒约8%，嗜酸中幼粒约1%；中性晚幼粒约10%，嗜酸晚幼粒2%杆状核约20%，嗜酸杆状核3%，中性分叶核约12%，嗜酸分叶核5%，嗜碱性中幼粒、晚幼粒细胞罕见，杆状核、分叶核1%27血液学检验医学宣教 4)4)红系增生良好：a.a.占有核细胞的占有核细胞的20
11、-25%20-25%左右左右 b b.各阶段比例适当；各阶段比例适当；原红原红细胞细胞1%1%，早幼红早幼红细胞细胞5%5%，以以中、晚幼中、晚幼红细胞为主，各占红细胞为主，各占10%10%；c c形态无明显异常或红细胞形态大致形态无明显异常或红细胞形态大致 正常。正常。28血液学检验医学宣教 5)淋巴细胞系统占20-25%；（主要是成熟细胞）6）单核细胞系统4%（主要是成熟细胞）7）浆细胞系统5：1，CML，感染 粒/红比值正常：2-4：1，两系成比例增加或减少 粒/红比值减少：200分 2.急粒 积分;急淋 积分;急单 N或 3.AA时 PNH 4.化脓性感染 病毒性感染时56血液学检验医
12、学宣教慢性粒细胞性白血病慢性粒细胞性白血病Chronic myeloid leukemia57血液学检验医学宣教慢粒慢粒 阴性阴性58血液学检验医学宣教（四）、酸性磷酸酶（四）、酸性磷酸酶（acid phoshatase ACP)acid phoshatase ACP)原理：硫化铅和偶带偶联法结果：胞质内出现棕黑色颗粒者为阳性 （硫化铅）胞质内出现亮红色颗粒者为阳性 （偶氮偶联法）59血液学检验医学宣教n临床意义临床意义 鉴别多毛细胞白血病，不被L-酒石酸所抑制60血液学检验医学宣教鉴别T细胞白血病与B细胞白血病 阳性 阴性鉴别Gaucher病与Nienann-Pick病 阳性 阴性61血液学
13、检验医学宣教 （五）、氯醋酸（五）、氯醋酸AS-D萘酯酶染色萘酯酶染色naphythol AS-D chloroacetate esterase,AS-D NCE原理：原理：氯醋酸AS-D萘酚 AS-D NCE AS-D萘酚 H2O 不溶性红色沉淀 +坚牢酱紫 62血液学检验医学宣教结果结果63血液学检验医学宣教临床评价 急性白血病的鉴别：急性白血病的鉴别：1.急性粒白血病 M3 1+2+2+3+2.急性单核细胞白血病 原、幼单核细胞-阴性3.急性淋巴细胞白血病 原、幼淋细胞-阴性 64血液学检验医学宣教（六）-醋酸萘酚酯酶(-NAE)(-naphythyol acetate esterase
14、）-醋酸萘酚 NAE-萘酚+重氮盐 （坚牢蓝B）棕黑或灰黑色（胞桨中）65血液学检验医学宣教临床评价鉴别白血病类型；同时必须做鉴别白血病类型；同时必须做NaFNaF抑制试验抑制试验急性粒细胞白血病急性粒细胞白血病-原粒细胞弱阳性，原粒细胞弱阳性，不被不被NaF抑制抑制；急性单核细胞白血病急性单核细胞白血病-原单核细胞阳性，原单核细胞阳性，被被NaF抑制抑制；66血液学检验医学宣教结果判断阳性：胞桨中出现棕黑、灰黑色颗粒沉淀67血液学检验医学宣教急性单核细胞白血病acute monocytic leukemia 68血液学检验医学宣教非特异性酯酶+NaF69血液学检验医学宣教（七）糖原染色（过碘
15、酸（七）糖原染色（过碘酸-雪夫反应）雪夫反应）(periodic acid Schiff,PAS)【原理】过碘酸 细胞内的糖原氧化 双醛基+无色品红（雪夫碱）紫红色沉淀70血液学检验医学宣教结果判断 阳性：胞质中红色颗粒或弥漫状物质阳性：胞质中红色颗粒或弥漫状物质71血液学检验医学宣教淋巴细胞判断淋巴细胞判断0 无色 1+一圈PAS颗粒2+两圈PAS颗粒3+三圈 PAS颗粒4+红色大团块72血液学检验医学宣教（八）、铁染色（八）、铁染色原理：4Fe3+3K4Fe(CN)6 含铁物质 亚铁氰化钾 Fe4Fe(CN)63+12K+亚铁氰化铁74血液学检验医学宣教结果判断细胞外铁细胞外铁：存在于骨髓
16、小粒的巨噬细胞中的蓝色颗粒细胞内铁：细胞内铁：存在于有核红和成熟红细胞内的铁；75血液学检验医学宣教 细胞外铁细胞外铁76血液学检验医学宣教第三节、骨髓活检第三节、骨髓活检观察结构和空间定位77血液学检验医学宣教骨髓活检的适应症骨髓活检的适应症n骨髓穿刺失败n全血细胞减少n白血病疗效观察78血液学检验医学宣教临床评价临床评价 血液病诊断金标准：骨髓活检与穿刺涂片联合检测79血液学检验医学宣教血细胞超微结构检验血细胞超微结构检验定义：在电子显微镜下结合各种超微结构技术，如酶细胞化学、放射自显影和X光衍射等，所观察到的血细胞微细结构。80血液学检验医学宣教第六节第六节 血细胞染色体技术血细胞染色体
17、技术在血液病领域广泛应用（1960年Ph小体）81血液学检验医学宣教 染色体命名法染色体命名法：臂臂以着丝粒将每一染色以着丝粒将每一染色体体分为长臂（分为长臂（q）和短臂）和短臂(p)。区区两相邻界标之间的区两相邻界标之间的区域，从着丝粒往远侧依序域，从着丝粒往远侧依序编号。编号。带带从着丝粒往远侧依序从着丝粒往远侧依序编号，作为界标的带属于编号，作为界标的带属于此界以远的区。此界以远的区。着丝粒着丝粒长臂长臂短短臂臂姐妹染色单体姐妹染色单体82血液学检验医学宣教 1.在白血病中 50-80%的髓细胞白血病人染色体 异常 2.白血病人预后判断、指导治疗 AML中 t（15;17）inv(16)
18、,t8;21）预后良好 3.鉴别白血病微量残留病灶 FISH技术83血液学检验医学宣教 能影响到的染色体能影响到的染色体 1 1 2 2 3 3 4 5 4 5 6 6 7 7 8 8 9 9 10 10 11 11 12 13 14 12 13 14 15 15 16 16 17 17 18 18 19 20 19 20 21 21 22 X Y 22 X Y 表现形式表现形式 t t del der dup ins inv 易位易位 缺失 衍生 重复 插入 倒转84血液学检验医学宣教第五章、造血检验的临床应用第五章、造血检验的临床应用第一节 血液病中诊断中的应用 一般造血检验-光学显微镜
19、特殊造血检验-细胞生物技术 造血干细胞的培养85血液学检验医学宣教血液病诊断中的应用干细胞疾病其他血液疾病血液病治疗检测中的应用造血干细胞移植的监测常规化疗的监测86血液学检验医学宣教本章小结本章小结 掌握n1.正常骨髓细胞的形态学特征和正常骨髓象特征。n2.常用的细胞化学染色及临床应用 （POX、NAE、NAP、Fe、PAS）n3.骨髓检查的步骤与方法n4.有核细胞增生程度、分极标准及粒红比例87血液学检验医学宣教 复习题复习题n骨髓细胞形态学检查的适应症是什么?n骨髓细胞学检查的主要内容是什么？n骨髓增生程度的分级、标准及临床意义？n正常人的骨髓特点是什么？n常用的细胞化学染色有哪些？它们的临床意义是什么？88血液学检验医学宣教
