1、血液系统血液实验医学知识培血液实验医学知识培训训血液系统背景知识见生理学教材第三章见生理学教材第三章P58-74页页血小板生理血小板生理生理性止血的基本过程生理性止血的基本过程血液凝固血液凝固血型与红细胞凝集血型与红细胞凝集红细胞血型红细胞血型输血原则输血原则血液实验医学知识培训2血液系统目的目的原理原理动物动物药品药品器材器材方法与步骤方法与步骤注意事项注意事项结果与分析结果与分析目的目的原理原理动物动物药品药品血液实验医学知识培训3血液系统 目的目的 了解血液凝固的基本过程及影响血液凝固的理了解血液凝固的基本过程及影响血液凝固的理化因素化因素血液实验医学知识培训4血液系统一、血液凝固（一、
2、血液凝固（blood coagulationblood coagulation）血液由流体状态变为不能流动的胶冻状凝块的过血液由流体状态变为不能流动的胶冻状凝块的过程称为血液凝固，简称血凝。程称为血液凝固，简称血凝。可溶性可溶性 纤维蛋白原纤维蛋白原不可溶性不可溶性纤维蛋白多聚体纤维蛋白多聚体本质：本质：相关知识相关知识 血液实验医学知识培训5血液系统2、凝血酶形成、凝血酶形成二、血液凝固过程二、血液凝固过程1、凝血酶原酶复合物形成、凝血酶原酶复合物形成3、纤维蛋白形成、纤维蛋白形成血液实验医学知识培训6血液系统纤维蛋纤维蛋白形成白形成纤维蛋白原纤维蛋白原 纤维蛋白单体纤维蛋白单体纤维蛋白多聚
3、体纤维蛋白多聚体 a aCa2+Ca2+凝血酶形成凝血酶形成a a 外源性凝血外源性凝血组织损伤释放组织损伤释放Ca2+a a凝血酶原酶复合物形成 a a a a内源性凝血内源性凝血激肽释放酶激肽释放酶前激肽释放酶前激肽释放酶 aPL aCa2+PLCa2+接触异物接触异物接触异物接触异物Ca2+血液实验医学知识培训7血液系统 Ca Ca2+2+通过与通过与FIIFII、FVIIFVII、FIXFIX、FXFX结结合并使其发生变构，暴露出与磷脂结合合并使其发生变构，暴露出与磷脂结合的部位来参与凝血。因此的部位来参与凝血。因此CaCa2+2+在血凝过在血凝过程中具有很重要的作用。程中具有很重要的
4、作用。三、三、CaCa2+2+在血液凝固中的作用在血液凝固中的作用血液实验医学知识培训8血液系统 (1)(1)激活的血小板为凝血因子提供磷脂表面，参与激活的血小板为凝血因子提供磷脂表面，参与内外源性凝血途径因子内外源性凝血途径因子X X和凝血酶原的激活；和凝血酶原的激活；(2)(2)血小板质膜表面结合有许多凝血因子（血小板质膜表面结合有许多凝血因子（FIFI、FVFV、FXIFXI、FXIIIFXIII），并使这些因子的相继激活；），并使这些因子的相继激活；(3)(3)血小板激活后，释放颗粒的内容物（纤维蛋白血小板激活后，释放颗粒的内容物（纤维蛋白原），可增加纤维蛋白的形成，加固凝块。原），可
5、增加纤维蛋白的形成，加固凝块。四、血小板在凝血过程中的作用四、血小板在凝血过程中的作用血液实验医学知识培训9血液系统 肝素在体内和体外都有抗凝作用，主要肝素在体内和体外都有抗凝作用，主要通过增加抗凝血酶的活性而发挥间接抗凝作通过增加抗凝血酶的活性而发挥间接抗凝作用，使血液不凝。用，使血液不凝。五、肝素在凝血过程中的作用五、肝素在凝血过程中的作用血液实验医学知识培训10血液系统六、温度对血液凝固的影响六、温度对血液凝固的影响七、接触面光滑程度对血液凝固的影响七、接触面光滑程度对血液凝固的影响 适宜酶发挥效能的温度（适宜酶发挥效能的温度（37左右）环左右）环境中，血凝速度加快。境中，血凝速度加快。
6、接触面越粗糙血液凝固速度越快接触面越粗糙血液凝固速度越快血液实验医学知识培训11血液系统 动物动物 家兔，家兔，2 23kg3kg，雌雄均可，雌雄均可 药品药品 肝素、草酸钾、肝素、草酸钾、2%2%氯化钙溶液、肺组织浸氯化钙溶液、肺组织浸液、富血小板血浆、少血小板血浆、生理盐水、液、富血小板血浆、少血小板血浆、生理盐水、石蜡油石蜡油 器材器材 小烧杯、带橡皮刷的玻璃棒或竹签、清小烧杯、带橡皮刷的玻璃棒或竹签、清洁小试管洁小试管1010支、水浴装置一套、冰块、棉花、支、水浴装置一套、冰块、棉花、移液器（移液器（1ml1ml、0.2ml0.2ml）血液实验医学知识培训12血液系统 方法与步骤方法与
7、步骤 1.观察内源性与外源性凝血的过程观察内源性与外源性凝血的过程 取干净小试管取干净小试管3支，编号后按支，编号后按表表7-2加入各种成分加入各种成分摇匀后静置，在加入摇匀后静置，在加入2%2%CaCl2溶液的同时开始计时，溶液的同时开始计时，每每15倾斜一次，观察是否开始凝血，并分别记录倾斜一次，观察是否开始凝血，并分别记录3支支试管的血凝时间，比较试管的血凝时间，比较3个管的血液凝固时间。个管的血液凝固时间。血液实验医学知识培训13血液系统表表7-2 内源性凝血与外源性凝血的观察内源性凝血与外源性凝血的观察1 1号试管号试管2 2号试管号试管3 3号号试管试管富血小板血浆富血小板血浆(m
8、l)(ml)0.20.2-少血小板血浆少血小板血浆(ml)(ml)-0.20.20.20.2生理盐水生理盐水(ml)(ml)0.20.20.20.2-肺组织浸液肺组织浸液(ml)(ml)-0.20.2CaClCaCl2 2(ml)(ml)0.20.20.20.20.20.2血液凝固时间血液凝固时间(s)(s)*比较血液凝固的时间比较血液凝固的时间(1(1与与2 2比，比，2 2与与3 3比比)，分析产生差别原因，分析产生差别原因血液实验医学知识培训14血液系统 取小试管取小试管7支，编号并按支，编号并按表表7-4准备后，取准备后，取家兔颈动脉血，每管家兔颈动脉血，每管1ml,在加在加3滴滴2%
9、2%CaCl2CaCl2溶溶液时液时立即计时，每立即计时，每15倾斜试管一次，以观察倾斜试管一次，以观察血液是否凝固，至血液呈凝胶状不再流动时记血液是否凝固，至血液呈凝胶状不再流动时记录血凝时间。录血凝时间。2.观察影响血液凝固的理化因素观察影响血液凝固的理化因素血液实验医学知识培训15血液系统实验条件实验条件加抗凝血加抗凝血 加加CaClCaCl2 2凝血时间凝血时间粗糙面粗糙面 试管内加棉花试管内加棉花1ml1ml3 3滴滴 试管内涂石蜡油试管内涂石蜡油1ml1ml3 3滴滴温度温度 试管置试管置3737水浴水浴1ml1ml3 3滴滴 试管置冰浴试管置冰浴1ml1ml3 3滴滴加肝素加肝素
10、0.2ml0.2ml1ml1ml3 3滴滴加草酸钾加草酸钾0.2ml0.2ml1ml1ml3 3滴滴对照管对照管1ml1ml3 3滴滴表表7-4 影响血凝的理化因素影响血凝的理化因素血液实验医学知识培训16血液系统3.3.示教：观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用示教：观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用 取血取血10ml10ml，注入两个小烧杯中，一杯静置，另，注入两个小烧杯中，一杯静置，另一杯用试管刷轻轻搅拌，几分钟后一杯用试管刷轻轻搅拌，几分钟后试管刷试管刷上结成红色血上结成红色血团，用水冲洗，观察纤维蛋白的形状，比较两杯的团，用水冲洗，观察纤维蛋白的形状，比较两杯的血凝情况。血凝情况。血液实验
11、医学知识培训17血液系统1 1每试管口径大小及取血量应基本一致，判断试管每试管口径大小及取血量应基本一致，判断试管 倾斜角度（倾斜角度（4545）、间隔时间（）、间隔时间（15s/15s/次）、标准次）、标准 （血液不见流动）都应一致。（血液不见流动）都应一致。2 2采血有先有后，计时不应统一要求，各组和个人采血有先有后，计时不应统一要求，各组和个人 应分别单独计时。应分别单独计时。3 3棉花不要压试管太紧，要松软。棉花不要压试管太紧，要松软。4 4用石蜡油将试管表面全部润滑后，将石蜡油倒入用石蜡油将试管表面全部润滑后，将石蜡油倒入 水池中。水池中。5 5取血前先准备好冰块，取完血后立即把第取
12、血前先准备好冰块，取完血后立即把第3 3号试号试 管放入水浴锅，管放入水浴锅，4 4号试管放入装有冰块的烧杯中。号试管放入装有冰块的烧杯中。注意事项注意事项 血液实验医学知识培训18血液系统实验二实验二 出血时间和凝血时间的测定出血时间和凝血时间的测定 目的目的 了解出血时间和凝血时间测定的方法。了解出血时间和凝血时间测定的方法。原理原理 出血时间的测定在于了解毛细血管及血小出血时间的测定在于了解毛细血管及血小板功能正常与否板功能正常与否 凝血时间的测定可了解血液中凝血因子的凝血时间的测定可了解血液中凝血因子的功能正常与否。功能正常与否。血液实验医学知识培训19血液系统出血时间出血时间 是指从
13、针刺使毛细血管破损，血液自行流是指从针刺使毛细血管破损，血液自行流出到自行停止的时间。出到自行停止的时间。纸片法正常值：纸片法正常值：13分钟分钟 生理性止血的过程生理性止血的过程 包括血管收缩、血小板血栓形成和纤维蛋包括血管收缩、血小板血栓形成和纤维蛋白凝块的形成和纤维组织增生，长入血凝块达白凝块的形成和纤维组织增生，长入血凝块达到永久止血。到永久止血。血液实验医学知识培训20血液系统血液实验医学知识培训21血液系统凝血时间凝血时间 是指血液流出体外至凝固所需要的时间。是指血液流出体外至凝固所需要的时间。它反应的是血液本身的凝血过程是否正常。它反应的是血液本身的凝血过程是否正常。玻片法正常值
14、：玻片法正常值：28分钟分钟 凝血时间的延长常见于一些凝血因子缺凝血时间的延长常见于一些凝血因子缺乏或异常的疾病。例如：甲、乙、丙型血友乏或异常的疾病。例如：甲、乙、丙型血友病。病。血液实验医学知识培训22血液系统 对象对象 人人 药品药品 75%75%酒精棉球酒精棉球 器材器材 采血针、载玻片、滤纸条、秒表采血针、载玻片、滤纸条、秒表血液实验医学知识培训23血液系统1 1出血时间的测定出血时间的测定(1)(1)以以75%75%酒精棉球消毒耳垂或中指指端腹侧，待酒精酒精棉球消毒耳垂或中指指端腹侧，待酒精 自然挥发后，用消毒采血针刺入上述部位自然挥发后，用消毒采血针刺入上述部位2 23mm 3m
15、m 深，让血液自然流出，切勿挤压，从血流流出算深，让血液自然流出，切勿挤压，从血流流出算 起计算时间。起计算时间。(2)(2)每隔半分钟用滤纸吸干流出的血流一次，直到吸每隔半分钟用滤纸吸干流出的血流一次，直到吸 不到血液为止。不到血液为止。(3)(3)记录开始出血到止血的时间，或以滤纸上的血点记录开始出血到止血的时间，或以滤纸上的血点 数数0.50.5分钟来计算，其结果即为出血时间（分）。分钟来计算，其结果即为出血时间（分）。方法与步骤方法与步骤 血液实验医学知识培训24血液系统2 2凝血时间的测定：凝血时间的测定：(1)(1)以以75%75%的酒精棉球消毒，待酒精自然挥发后用消毒的酒精棉球消
16、毒，待酒精自然挥发后用消毒 采血针刺入上述部位采血针刺入上述部位2 23mm3mm深，让血液自然流深，让血液自然流 出，用棉球轻轻拭去第一滴血液，待血液重新自出，用棉球轻轻拭去第一滴血液，待血液重新自 然流出即开始计时。然流出即开始计时。(2)(2)将第二滴血置于玻片上，每隔半分钟用大头针挑将第二滴血置于玻片上，每隔半分钟用大头针挑 血一次，直到挑起细纤维状的血丝，即表示开始血一次，直到挑起细纤维状的血丝，即表示开始 凝血凝血.从开始流出到挑起细纤维状的血丝所需要的从开始流出到挑起细纤维状的血丝所需要的 时间即为凝血时间。时间即为凝血时间。方法与步骤方法与步骤 血液实验医学知识培训25血液系统
17、1.1.出血时间的测定出血时间的测定2.2.凝血时间的测定凝血时间的测定 结果结果 受试者姓名受试者姓名出血时间出血时间解释解释受试者姓名受试者姓名凝血时间凝血时间解释解释血液实验医学知识培训26血液系统 注意事项注意事项 1 1各种用具严格消毒。各种用具严格消毒。2 2针刺手指或耳垂不宜过浅，深度针刺手指或耳垂不宜过浅，深度2 23mm3mm使血可自使血可自 然流出为宜。如针刺部位深度不够，流血量太少然流出为宜。如针刺部位深度不够，流血量太少 不能用力挤压局部，应重新针刺。不能用力挤压局部，应重新针刺。3 3用滤纸吸血时，注意不要用滤纸触及皮肤伤口，用滤纸吸血时，注意不要用滤纸触及皮肤伤口，
18、以免影响结果的准确性。以免影响结果的准确性。4 4测定凝血时，应严格每隔半分钟用大头针挑血一测定凝血时，应严格每隔半分钟用大头针挑血一 次，不可太频繁，同时每次挑动血液要按一定方次，不可太频繁，同时每次挑动血液要按一定方 向和顺序进行，以免破坏纤维蛋白的网状结构而向和顺序进行，以免破坏纤维蛋白的网状结构而 造成不凝的假象。造成不凝的假象。血液实验医学知识培训27血液系统实验三实验三 ABO血型的鉴定血型的鉴定目的目的 学习学习ABO血型鉴定的实验方法，加深对血型鉴定的实验方法，加深对ABO血血型划分的理解。型划分的理解。原理原理 用已知的血清凝集素用已知的血清凝集素(抗抗A凝集素、抗凝集素、抗
19、B凝集素凝集素)来确定未知的红细胞膜上的凝集原（来确定未知的红细胞膜上的凝集原（A凝集原和凝集原和B凝凝集原）的种类，从而鉴定集原）的种类，从而鉴定ABO血型。血型。血液实验医学知识培训28血液系统 根据红细胞膜上是否有根据红细胞膜上是否有A A或或B B抗原可分为四抗原可分为四种血型：种血型：A A型、型、B B型、型、ABAB型和型和O O型。型。ABO血型血型血型（血型（blood groupblood group）：）：通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型。通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型。血液实验医学知识培训29血液系统血型血型红细胞膜上的抗原红细胞膜上的抗原血清中的抗体血清中的抗体
20、A A型血型血A A抗原抗原抗抗B BB B型血型血B B抗原抗原抗抗A AABAB型血型血ABAB抗原抗原O O型血型血抗抗A A和抗和抗B B各种血型的抗原和抗体分布情况各种血型的抗原和抗体分布情况血液实验医学知识培训30血液系统血液实验医学知识培训31血液系统血型的鉴定原理血型的鉴定原理含含B抗原抗原的红细胞的红细胞+抗抗B抗体抗体红细胞红细胞凝集反应凝集反应抗抗B血液实验医学知识培训32血液系统Rh血型的临床意义输血溶血输血溶血新生儿溶血新生儿溶血血液实验医学知识培训33血液系统血液系统凝集凝集不凝集不凝集交叉配血试验交叉配血试验交叉配血的主侧交叉配血的主侧:供血者红细胞供血者红细胞+
21、受血者血清受血者血清交叉配血的次侧交叉配血的次侧:供血者血清供血者血清+受血者红细胞受血者红细胞 配血不合配血不合,不能输血不能输血配血相合配血相合,可以输血可以输血紧急情况少量缓慢输血紧急情况少量缓慢输血,密切密切观察观察,如有输血反应如有输血反应,立即停立即停止止不凝集血液实验医学知识培训35血液系统 对象对象 人人 药品药品 抗抗A A抗体和抗抗体和抗B B抗体，生理盐水抗体，生理盐水 器材器材 采血针、凹玻片、采血针、凹玻片、75%75%酒精棉球酒精棉球 显微镜显微镜血液实验医学知识培训36血液系统1 1取双凹片一块，用蜡笔在两端分别写上取双凹片一块，用蜡笔在两端分别写上A A、B B
22、字字 样，在两侧凹内分别滴一滴抗样，在两侧凹内分别滴一滴抗A A抗体和抗抗体和抗B B抗体。抗体。2 2用镊子夹取用镊子夹取75%75%酒精棉球，消毒指端或耳垂及采酒精棉球，消毒指端或耳垂及采 血针，用采血针采一滴血，用玻片一角刮取少血针，用采血针采一滴血，用玻片一角刮取少 许血液在抗许血液在抗A A抗体中摇匀，在再用玻片另一角刮抗体中摇匀，在再用玻片另一角刮 取少许在抗取少许在抗B B抗体中摇匀。抗体中摇匀。3 3将玻片轻轻转动数次，使血液血清充分混合，将玻片轻轻转动数次，使血液血清充分混合，放置放置101015min15min后肉眼观察有无凝集现象，若肉后肉眼观察有无凝集现象，若肉 眼不能
23、判断是否凝集，应放在显微镜下观察，眼不能判断是否凝集，应放在显微镜下观察，鉴定结果。鉴定结果。方法与步骤方法与步骤 血液实验医学知识培训37血液系统血液实验医学知识培训38血液实验结果分析39血液系统表表7-2 内源性凝血与外源性凝血的观察内源性凝血与外源性凝血的观察1 1号试管号试管2 2号试管号试管3 3号号试管试管富血小板血浆富血小板血浆(ml)(ml)0.20.2-少血小板血浆少血小板血浆(ml)(ml)-0.20.20.20.2生理盐水生理盐水(ml)(ml)0.20.20.20.2-肺组织浸液肺组织浸液(ml)(ml)-0.20.2CaClCaCl2 2(ml)(ml)0.20.2
24、0.20.20.20.2血液凝固时间血液凝固时间(s)(s)*比较血液凝固的时间比较血液凝固的时间(1(1与与2 2比，比，2 2与与3 3比比)，分析产生差别原因，分析产生差别原因血液实验医学知识培训40血液系统1号试管与2号试管凝血时间对比现象：现象：（）号试管快于号试管快于（）号试管号试管原因：原因：结论：血小板（结论：血小板（）血液凝固）血液凝固 血液实验医学知识培训41血液系统2号试管与3号试管凝血时间对比现象：现象：（）号试管快于号试管快于（）号试管号试管原因：原因：结论：外源性凝血结论：外源性凝血（）内源性凝血内源性凝血 血液实验医学知识培训42血液系统实验条件实验条件加抗凝血加
25、抗凝血 加加CaClCaCl2 2凝血时间凝血时间粗糙面粗糙面 试管内加棉花试管内加棉花1ml1ml3 3滴滴 试管内涂石蜡油试管内涂石蜡油1ml1ml3 3滴滴温度温度 试管置试管置3737水浴水浴1ml1ml3 3滴滴 试管置冰浴试管置冰浴1ml1ml3 3滴滴加肝素加肝素0.2ml0.2ml1ml1ml3 3滴滴加草酸钾加草酸钾0.2ml0.2ml1ml1ml3 3滴滴对照管对照管1ml1ml3 3滴滴表表7-4 影响血凝的理化因素影响血凝的理化因素血液实验医学知识培训43血液系统1号试管与2号试管凝血时间对比现象：现象：（）号试管快于号试管快于（）号试管号试管原因：原因：结论：接触面越
26、（结论：接触面越（）血液凝固越（）血液凝固越（）血液实验医学知识培训44血液系统3号试管与4号试管凝血时间对比现象：现象：（）号试管快于号试管快于（）号试管号试管原因：原因：结论：结论：酶的酶的（）温度，能（）温度，能（）血液凝固）血液凝固 血液实验医学知识培训45血液系统5号试管凝血时间现象：现象：原因：原因：结论：肝素具有（结论：肝素具有（）作用）作用血液实验医学知识培训46血液系统6号试管凝血时间现象：现象：原因：原因：结论：草酸钾具有（结论：草酸钾具有（）作用）作用示教示教 静止烧杯静止烧杯：搅拌的烧杯搅拌的烧杯：分析分析血液实验医学知识培训47血液系统1.1.出血时间的测定出血时间的测定2.2.凝血时间的测定凝血时间的测定 结果结果 受试者姓名受试者姓名出血时间出血时间解释解释XX正常值正常值 及意义及意义受试者姓名受试者姓名凝血时间凝血时间解释解释XX正常值及意义正常值及意义血液实验医学知识培训48血液系统ABOABO血型鉴定血型鉴定 结果结果 受试者姓名受试者姓名血型血型解释解释 XX A抗抗A抗体中发生凝集反应，说明受抗体中发生凝集反应，说明受试者红细胞表面含有试者红细胞表面含有A抗原；抗原；抗抗B抗体中未发生凝集反应，说明抗体中未发生凝集反应，说明受试者红细胞表面没有受试者红细胞表面没有B抗原；抗原；故受试者为故受试者为A型血型血血液实验医学知识培训49
