1、第7章 黄酮类化合物（flavonoids）1、掌握黄酮类化合物的理化性质和检识。2、掌握黄酮类化合物的提取、分离方法。3、掌握黄酮类化合物的结构类型和分类。4、熟悉黄酮类化合物的结构测定。5、了解黄酮类化合物的含义、分布及生理活性。概述定义：泛指两个苯环通过定义：泛指两个苯环通过3 3个碳原子相个碳原子相互连接而成的一系列化合物。互连接而成的一系列化合物。O色原酮123456O12345678123456ABCO78O123456O782-苯基色原酮C6C3C6 含量高含量高 研究成熟研究成熟 分布广泛分布广泛 结构简单结构简单 成药性？成药性？概述概述n抗癌抗癌n抗抗HIVn抗氧化抗氧化概
2、述概述1999 6467种种 The Handbook of Natural Flavonoids Harborn2005 8000种种黄酮醇黄酮醇 数量最多数量最多 1707种种异黄酮异黄酮 结构类型最多结构类型最多 10种种概述概述概述分布广泛：分布广泛：高等植物，特别是被子植物中。高等植物，特别是被子植物中。粮食粮食 蔬菜蔬菜 水果水果荞麦荞麦 大豆大豆 大葱大葱 韭菜韭菜 蒜苗蒜苗柑橘柑橘 柚子柚子存在形式：存在形式：多与糖结合成苷存在，多与糖结合成苷存在，部分以游离态存在。部分以游离态存在。OrhaOglcHOOHOHOHOOOHHOOHOHOHOQ Qu ue er rc ce e
3、t ti in nR Ru ut ti in n芦芦丁丁槲槲皮皮素素生源合成：莽草酸途径和乙酸生源合成：莽草酸途径和乙酸-丙二酸途径。丙二酸途径。OHOHOH乙酸丙二酸途径莽草酸途径CH2COCoACOOHCOCoAOOHOHHOHO查耳酮OOOHHOHO二氢黄酮OOOHHOHO黄酮OOOHHOHO异黄酮OOHOHHOHO二氢查耳酮OOOHHOHO黄酮醇HOHO橙酮OOHCHOOOHHOHO二氢黄酮醇OHOOHHOHOOHOOHHOHO花色素OHOOHHOHO黄烷醇HO黄酮类化合物生物合成示意图生物活性生物活性1.抗肿瘤活性抗肿瘤活性 槲皮素槲皮素 水飞蓟素水飞蓟素 柚皮苷柚皮苷 杨梅黄酮杨梅
4、黄酮 抗自由基抗自由基直接抑制癌细胞生长直接抑制癌细胞生长抗致癌因子抗致癌因子生物活性生物活性2.抗炎镇痛抗炎镇痛 黄岑苷黄岑苷 甘草苷（甘草苷（Liquiritin）消化性溃疡药消化性溃疡药 日本日本 生物活性生物活性3.雌激素样作用雌激素样作用 植物雌激素（植物雌激素（phytoestrogens PE）一类植物来源具雌激素活性的非甾族杂一类植物来源具雌激素活性的非甾族杂环多酚类化合物环多酚类化合物生物活性生物活性4.抗菌抗病毒抗菌抗病毒 白刺总黄酮白刺总黄酮 青霉素类作用青霉素类作用 金丝桃素金丝桃素 抗抗HIV 花青素花青素 抗抗HIV生物活性生物活性5.抗氧化抗衰老抗氧化抗衰老 清除
5、自由基清除自由基生物活性生物活性6.抗肝脏毒活性抗肝脏毒活性 水飞蓟素OOOHOOOHOCH3CH2OHOHHO第一节 结构和分类v黄酮和黄酮醇类v二氢黄酮和二氢黄酮醇类v异黄酮和二氢异黄酮类v查耳酮和二氢查耳酮类v黄烷-3-醇和黄烷3,4-二醇类v花色素类v双黄酮类v其他黄酮类O123456782,3,4,5,6,ACB（一）黄酮和黄酮醇类OOOOHOHOOHOH黄酮木犀草素(抗菌消炎)OOOOHOHOOHOH黄酮醇槲皮素(抗菌消炎)OHOH（二）双黄酮类OOH3COHOOCH3OOHOHOOHOHOHOOHOOHOHOOHOOOHOHOOOOHOHOOH银杏素 3,8-芹菜素型柏黄酮 8,
6、8-双芹菜素型扁柏黄酮双苯醚型（三）二氢黄酮和二氢黄酮醇类OOOOHOOglc二氢黄酮甘草苷(治疗胃溃疡)OOOOglc-OHOOH二氢黄酮醇黄柏素-7-O-葡萄糖甙(抗癌)OHOH*OH（四）查耳酮和二氢查耳酮OHOOO查耳酮二氢黄酮(无色)OHOOHOHOglc-OOH二氢查耳酮梨根甙H+OH-132456123456（五）异黄酮和二氢异黄酮类OOOOHOOH异黄酮葛根素(解痉止痛)OOOH3COHO二氢异黄酮紫檀素(抗癌)glc*OOOOOHOHOOHglc-OOHOHOHOOHglc-OOOHOOHglc-OO异构化氧化酶 新红花甙(开花初期,无色)红花甙(开花中期,黄色)SO2 醌式
7、红花甙(开花后期,红色)（六）噢弄类OOCHOHOHHO硫磺菊素硫磺菊素（七）花色素类植物色素植物色素OHOHO花色素OH+OHOHO矢车菊苷元OH+OHOH（八）黄烷-3-醇和黄烷-3,4-二醇类OOHOHOOHOH黄烷-3-醇儿茶素(抗癌)OOHOOHHOHOOHOH黄烷-3,4-二醇无色矢车菊素OHOHOH*OH*其它类OHOHOOOOH3CO 苯骈色原酮类苯或呋喃色原酮类OCHO1234567123456橙酮类CH3H3COO凯林(扩血管)HO硫磺菊素OOOHOHOOHOHOHCH2OHHO异芒果素OOCH3红镰霉素（决明子）H3COHOHOOO黄酮醇OHOHO查耳酮OO二氢黄酮醇OH
8、OO异黄酮OO二氢异黄酮O黄烷-3-醇OOH黄烷-3,4-二醇OHOHOOH+花色素OO黄酮OO二氢黄酮OHO二氢查耳酮OHOHOCHOHO橙酮组成黄酮苷的糖：v糖的种类：单糖类：如D-葡萄糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖及D-葡萄糖醛酸等。双糖类：槐糖、龙胆二糖、芸香糖、新橙皮糖等。三糖类：龙胆三糖、槐三糖等。酰化糖类：2-乙酰基葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖等。v连接位置：黄酮、双氢黄酮和异黄酮苷：多在7-OH上连有糖。黄酮醇和双氢黄酮醇苷：多在3-OH上连有糖或在3,7-二个OH连有糖。花色苷：多在3-OH上连有一个糖或形成3,5-二葡萄糖苷。C苷：糖多连在6或8位。v在各类结构中，A、B环常见有羟
9、基、甲基、甲氧基、异戊烯基等。7.2理化性质1.1.物理性质：形态、颜色、旋光性、溶解度物理性质：形态、颜色、旋光性、溶解度2.2.化学性质：酸性、碱性化学性质：酸性、碱性3.3.显色反应：还原显色反应显色反应：还原显色反应与金属盐类络合反应与金属盐类络合反应其它显色反应其它显色反应1.物理性质（1）形态：多为结晶固体，黄酮苷多为无定形粉末。）形态：多为结晶固体，黄酮苷多为无定形粉末。（2）颜色：与交叉共轭体系、助色团数目、取代基）颜色：与交叉共轭体系、助色团数目、取代基位置有关。位置有关。共轭体系共轭体系 黄酮（醇）及其苷黄酮（醇）及其苷：灰黄灰黄-黄黄 查耳酮：黄查耳酮：黄-橙黄橙黄 异黄
10、酮：淡黄异黄酮：淡黄 二氢黄酮（醇）：无二氢黄酮（醇）：无 花色素：花色素：pH 8.5（蓝）（蓝）助色团与取代基助色团与取代基 7-,4-引入引入-OH、-OCH3等供电基，颜色加深。等供电基，颜色加深。OOOO+O+OOO黄酮醇OHOHO查耳酮OO二氢黄酮醇OHOO异黄酮花色素的颜色与花色素的颜色与pHpH有关：有关：OHOHOglcOHOglcOHOHOOOglcOglcOHOOHOOglcOglcOHO+-红色(pH8.5)HOH1.物理性质物理性质（3）旋光性：分子内是否含有手性因素）旋光性：分子内是否含有手性因素。游离黄酮：二氢黄酮游离黄酮：二氢黄酮(醇醇)、黄烷、黄烷(醇醇)、二
11、氢异黄酮、二氢异黄酮 黄酮苷：多为左旋（来自糖）黄酮苷：多为左旋（来自糖）OO二氢黄酮醇OHOO二氢异黄酮O黄烷-3-醇OOH黄烷-3,4-二醇OHOH*OO二氢黄酮1.物理性质（4）溶解度）溶解度 黄酮苷元黄酮苷元难溶于水，易溶于甲醇、乙醚、氯仿、稀碱等。难溶于水，易溶于甲醇、乙醚、氯仿、稀碱等。非平面型分子平面型分子（与分子排列、分子间引力有关）非平面型分子平面型分子（与分子排列、分子间引力有关）花色素（离子）异黄酮、二氢黄酮（非平面）黄酮（平面）花色素（离子）异黄酮、二氢黄酮（非平面）黄酮（平面）引入引入-OH，水溶性增加；引入水溶性增加；引入-OCH3、异戊烯基等，脂溶性增加。异戊烯基
12、等，脂溶性增加。OOH+花色素OOHR二氢黄酮RH二氢黄酮醇ROHOO二氢异黄酮黄酮苷黄酮苷难溶于乙醚等，易溶于热水、醇、难溶于乙醚等，易溶于热水、醇、吡啶、稀碱等。吡啶、稀碱等。多糖苷单糖苷多糖苷单糖苷3-羟基糖苷羟基糖苷7-羟基糖苷羟基糖苷 OOOOOOHOOHOHOHCH2OHHOOOOHOHOHCH2OH3773分子扭曲，分子扭曲，7-OH极性极性2.化学性质（1）酸性：与酚-OH数目、位置有关。7,4-二OH黄酮7或4-OH黄酮一般酚-OH5-OH黄酮 5%NaHCO3 5%Na2CO3 0.2%NaOH 4%NaOHOHOOHOOOHOOOHO（2）碱性：吡喃酮氧原子有弱碱性，能与
13、强酸（浓硫酸）成佯盐，但不稳定。黄酮（醇）：黄-橙，有荧光 二氢黄酮（醇）：橙（冷）-紫红（热）查耳酮：橙红-洋红 异黄酮、二氢异黄酮：黄 橙酮：红-洋红 浓盐酸：花色素 橙酮 查耳酮显红色 其余无色！OOHClH2OOOH+Cl3.显色反应（1）还原显色反应）还原显色反应 盐酸盐酸-镁粉镁粉 硼氢化钠硼氢化钠（2）与金属盐类试剂的络合反应）与金属盐类试剂的络合反应 锆盐锆盐-枸橼酸枸橼酸 三氯化铝三氯化铝 氨性氯化锶氨性氯化锶（3）其它反应）其它反应 与碱的反应与碱的反应 与五氯化锑的反应与五氯化锑的反应 Gibbs反应反应（1）还原显色反应）还原显色反应盐酸盐酸-镁粉反应：黄酮类化合物的首
14、选反应。镁粉反应：黄酮类化合物的首选反应。方法：样品方法：样品/甲醇甲醇+Mg+HCl，放置或加热，红放置或加热，红紫红。紫红。分子中特别是在分子中特别是在B环上有羟基或甲氧基取代，颜色加深。环上有羟基或甲氧基取代，颜色加深。机理：形成阳碳离子。机理：形成阳碳离子。注意：异黄酮、查耳酮、橙酮、儿茶素注意：异黄酮、查耳酮、橙酮、儿茶素()，但要对照。，但要对照。排除中药提取液本身的颜色的干扰。排除中药提取液本身的颜色的干扰。硼氢化钠反应：二氢黄酮类的专属性还原剂，硼氢化钠反应：二氢黄酮类的专属性还原剂，红紫色。方法：样品/甲醇+NaBH4+1%HCl PC的显色剂：先喷2%NaBH4/甲醇，1m
15、in后熏浓盐酸蒸气。A环与B环有一个以上羟基或甲氧基取代，颜色加深。OONaBH4OOHOH+O（2 2）与金属盐类试剂的络合反应）与金属盐类试剂的络合反应 3-OH、4-C=O，5-OH、4-C=O，邻二酚羟基邻二酚羟基 有色络合物有色络合物 Al3+、Mg2+、Sr2+、Zr4+、Pb2+、Fe3+等等 OOOHHOOHOH锆盐锆盐-枸橼酸反应枸橼酸反应 判断黄酮分子中是否有判断黄酮分子中是否有3-OH或或5-OH。s/MeOH+2%ZrOCl2，黄色，示有黄色，示有3-或或5-OH。再加再加2%枸橼酸枸橼酸/甲醇，甲醇，黄色保存，示有黄色保存，示有3-OH；黄色褪去，示有黄色褪去，示有5
16、-OH。OOOZr=OH2OClOOZr=OH2OClO醋酸镁反应醋酸镁反应s/EtOH+1%MgOAc/MeOH荧光荧光二氢黄酮类：天蓝色二氢黄酮类：天蓝色黄酮黄酮 异黄酮：黄色异黄酮：黄色 橙黄色橙黄色 褐色褐色三氯化铝反应三氯化铝反应 最常用的显色剂最常用的显色剂（试管、（试管、TLC、PC）。）。s/EtOH+1%AlCl3/EtOH，UV下观察。下观察。一般黄酮：鲜黄色荧光一般黄酮：鲜黄色荧光 4-OH或或7,4-二二OH黄酮（醇）：天蓝色荧黄酮（醇）：天蓝色荧光光OOOAl2氨性氯化锶反应：氨性氯化锶反应：邻二酚羟基，邻二酚羟基，绿绿-棕棕-黑色。黑色。s/MeOH+0.01M S
17、rCl2/MeOH+NH3/MeOH OOOHHOOHOHHOOOOHHOHOOSrO+Sr2+2OH-2H2O（3 3）其它颜色反应）其它颜色反应v与碱的反应：与碱的反应：鉴别黄酮类化合物类型。鉴别黄酮类化合物类型。v与五氯化锑的反应：与五氯化锑的反应：区别查耳酮。区别查耳酮。s/无水无水CCl4 +2%SbCl5：查耳酮：红或紫红查耳酮：红或紫红 其它黄酮：黄其它黄酮：黄-橙橙vGibbs反应：反应：判断黄酮判断黄酮5-OH对位有无取代基。对位有无取代基。未取代黄酮：蓝或蓝绿色未取代黄酮：蓝或蓝绿色 黄酮冷和热NaOH液黄-橙（分子中有邻二或邻三酚OH，绿色沉淀）放置或加热深红-紫红(查耳
18、酮)黄酮醇NaOH液黄空气O棕二氢黄酮各类黄酮的颜色各类黄酮的颜色 黄酮 黄酮醇 二氢黄酮 查耳酮 异黄酮 橙酮 外观 黄-灰黄 黄-灰黄 无 黄-橙黄 淡黄 强酸 黄-橙 黄-橙 橙(冷)紫红(热)橙红-洋红 黄 红-洋红 HCl-Mg 红-紫红 红-紫红 红-紫红(对照)(对照)NaBH4 红-紫红 AlCl3 黄 黄 黄 黄 黄 黄 SbCl5 黄-橙 黄-橙 黄-橙 红-紫红 碱液 黄-橙 黄-棕 黄-橙(冷)红-紫红(热)红-紫红 黄 红-紫红 *示有荧光第三节第三节 提取和分离提取和分离1.提取方法：乙醇或甲醇法提取方法：乙醇或甲醇法 热水法热水法 碱水或碱醇法碱水或碱醇法2.精制
19、方法：溶剂萃取法精制方法：溶剂萃取法 pH梯度萃取法梯度萃取法络合法络合法3.分离方法：柱色谱法（聚酰胺、硅胶、分离方法：柱色谱法（聚酰胺、硅胶、葡聚糖凝胶等）葡聚糖凝胶等）4.实例实例 1.提取方法提取方法(1)乙醇或甲醇提取法乙醇或甲醇提取法苷元：高浓度的醇（如苷元：高浓度的醇（如9095）等。）等。苷：苷：60左右浓度的醇。左右浓度的醇。(2)碱（水或醇）提取法碱（水或醇）提取法稀稀NaOHNaOH：浸出能力大浸出能力大，但杂质较多，需先迅速过滤除杂。但杂质较多，需先迅速过滤除杂。石灰水石灰水：浸出能力中，能沉淀除去鞣质、多糖等杂质。：浸出能力中，能沉淀除去鞣质、多糖等杂质。5%5%Na
20、OH/EtOHNaOH/EtOH：浸出效果好，但收率降低。浸出效果好，但收率降低。注意：酸碱度不宜过大。注意：酸碱度不宜过大。(3)(3)热水提取法热水提取法 仅限于提取黄酮苷类，杂质较多，故仅限于提取黄酮苷类，杂质较多，故不常使用。不常使用。如槐花米中提取芦丁如槐花米中提取芦丁 2.分离方法分离方法 (1)溶剂萃取法：溶剂萃取法：主要用于分离苷元和苷主要用于分离苷元和苷 Petroleum ether:色素色素 甲氧基黄酮苷元甲氧基黄酮苷元 Diethyl ether:游离黄酮游离黄酮 Ethyl acetate:多羟基黄酮苷元多羟基黄酮苷元 单糖黄酮苷单糖黄酮苷 n-Butyl alcoh
21、ol：两糖以上黄酮苷两糖以上黄酮苷水或醇提物浓缩浓缩物不同极性溶剂萃取分离苷元和苷或非极性苷元和极性苷元乙醚萃取乙酸乙酯萃取萃取液萃取液回收溶剂回收溶剂小极性溶剂分步重结晶分离苷元水转溶滤取结晶物质重结晶乙酸乙酯萃取分离苷（2）聚酰胺吸附）聚酰胺吸附C=ONH(CH2)5(CH2)5C=O聚酰胺聚酰胺 铅盐沉淀铅盐沉淀中性醋酸铅：中性醋酸铅：沉淀邻二酚羟基或羧沉淀邻二酚羟基或羧基黄酮基黄酮碱式醋酸铅：碱式醋酸铅：沉淀一般酚羟基黄酮。沉淀一般酚羟基黄酮。（3）铅盐法）铅盐法（4）硼酸络合）硼酸络合邻二酚羟基黄酮可与硼酸络合，生成邻二酚羟基黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水。物易溶于水。可用于分离。
22、可用于分离。OHOOHOOOHOOOHOOOHO（5）pH梯度萃取法梯度萃取法混合物溶于有机溶剂(如乙醚)用5%NaHCO3萃取酸化7,4-二羟基黄酮碱水层醚层用5%Na2CO3萃取酸化7或4-羟基黄酮碱水层醚层用0.2%NaOH萃取酸化5-羟基黄酮碱水层醚层用4%NaOH萃取醚层(弃)酸化一般酚羟基黄酮碱水层 聚酰胺聚酰胺 硅胶硅胶 氧化铝氧化铝 葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶（6）柱色谱法）柱色谱法C=ONH(CH2)5(CH2)5C=O聚酰胺柱层析氢键吸附氢键吸附形成氢键能力：形成氢键能力：水水有机溶剂有机溶剂碱性溶碱性溶剂剂洗脱能力：洗脱能力：水水醇醇丙酮丙酮NaOH 甲酰甲酰胺胺OOHOOHO
23、HOOHOOCH3OHOHOHOOCH3OHOOHOHOOCH3OHv硅胶柱色谱硅胶柱色谱黄酮苷元：氯仿黄酮苷元：氯仿-甲醇甲醇黄酮苷：氯仿黄酮苷：氯仿-甲醇甲醇-水水v氧化铝柱色谱氧化铝柱色谱不与铝离子络合的黄酮的分离不与铝离子络合的黄酮的分离v葡聚糖凝胶柱色谱葡聚糖凝胶柱色谱黄酮苷：分子筛作用，分子量大的先出柱黄酮苷：分子筛作用，分子量大的先出柱黄酮苷元：吸附作用，酚羟基越多，吸附越强。黄酮苷元：吸附作用，酚羟基越多，吸附越强。v高效液相色谱（高效液相色谱（HPLCHPLC）反相柱。洗脱剂为水反相柱。洗脱剂为水-甲醇甲醇/乙腈（含适量甲酸或乙酸）乙腈（含适量甲酸或乙酸）3.提取分离实例提取
24、分离实例 （1 1）槐花米中芦丁的提取分离）槐花米中芦丁的提取分离（2 2）黄芩中黄芩苷的提取分离）黄芩中黄芩苷的提取分离（3 3）葛根中葛根总黄酮的提取分离）葛根中葛根总黄酮的提取分离（1）槐花米中芦丁的提取分离 槐花米槐花米:治疗毛细血管脆性引起的出血治疗毛细血管脆性引起的出血 高血压辅助治疗高血压辅助治疗芦丁：有效成分芦丁：有效成分 含量高含量高OOHOHOOHOHO-rha(1-6)-glc槐花米粉末加6倍量水和硼砂适量,煮沸搅拌下加入石灰乳至pH8-9,微沸20-30min趁热抽滤,药渣加4倍量水,同法再提2次合并提取液在60-70下,用浓盐酸调pH至5,搅匀,静置,抽滤,水水洗至中
25、性60干燥芦丁粗品热水或乙醇重结晶芦丁（2）黄芩中黄芩苷的提取分离 黄岑：清热解毒常用中药黄岑：清热解毒常用中药【来源来源】唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的根。OOHHOOCOOHHOOHOHOOOOHHOOHOOOOOHOO黄芩苷黄芩酶黄芩素(黄)绿黄 芩 粗 粉分 别 加 1 0,8 倍 量 水 煎 煮 2 次,每 次 1 h过 滤药 渣滤 液加 H C l调 p H 1-2,8 0 保 温 3 0 m in静 置,离 心 沉 淀上 清 液滤 渣沉 淀滤 液沉 淀黄 芩 苷加 适 量 水 搅 匀,加 4 0%N aO H 调 p H 7加 入 等
26、 量 乙 醇,过 滤加 H C l调 p H 1-2,充 分 搅 拌加 热 至 8 0 保 温 3 0 m in过 滤水 洗 5 0%乙 醇 洗 涤9 5%乙 醇 洗 或 重 结 晶滤 液（3）葛根中总黄酮的提取分离）葛根中总黄酮的提取分离 增加脑及冠状血管血流量增加脑及冠状血管血流量 解痉作用解痉作用降血糖作用降血糖作用雌激素样作用雌激素样作用 【来源来源】豆科多年生落叶藤本植物豆科多年生落叶藤本植物野葛野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi或甘葛藤或甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的根。的根。O大豆素 R1=R2=R3=HOR2OR1OR3大豆苷
27、 R1=R3=H R2=glc葛根素 R2=R3=H R1=glc葛根粗粉甲醇提取甲醇提取物加中性醋酸铅溶液沉淀沉淀葛根总黄酮滤液滤液aj加入碱式醋酸铅溶液悬浮于EtOH通H2S,滤去PbS,浓缩滤液氧化铝柱层析依次用水饱和的正丁醇,正丁醇-吡啶,正丁醇乙酸洗脱(大豆素,大豆苷,葛根素等)（无邻二酚羟基）第四节 黄酮类化合物的检识1.理化检识：性状理化检识：性状显色反应显色反应2.色谱检识：纸色谱色谱检识：纸色谱薄层色谱薄层色谱1.理化检识v 物理检识：根据黄酮类化合物的形态、颜色等。物理检识：根据黄酮类化合物的形态、颜色等。v 化学检识：利用显色反应。化学检识：利用显色反应。（1 1）母核：
28、）母核：HClHCl-Mg-Mg、NaBHNaBH4 4、碱性试剂、碱性试剂、SbClSbCl5 5等。等。（2 2）取代基：锆盐）取代基：锆盐-枸橼酸、氨性氯化锶等。枸橼酸、氨性氯化锶等。2.色谱检识v纸色谱法（纸色谱法（PCPC）：分离黄酮及黄酮苷，常用双向层析。分离黄酮及黄酮苷，常用双向层析。第一向：醇性展开剂，如第一向：醇性展开剂，如BAWBAW、TBATBA、水饱和正丁醇等。水饱和正丁醇等。正相，极性小的化合物正相，极性小的化合物RfRf值大。适合游离黄酮。值大。适合游离黄酮。第二向：水性展开剂，如水、第二向：水性展开剂，如水、2 25 5乙酸等。乙酸等。反相，极性大的化合物反相，极
29、性大的化合物RfRf值大。适合黄酮苷。值大。适合黄酮苷。显色剂：显色剂：UVUV、UV/AlClUV/AlCl3 3、UV/NHUV/NH3 3等。等。v薄层色谱法（薄层色谱法（TLCTLC）硅胶：极性小的弱酸性黄酮类化合物。硅胶：极性小的弱酸性黄酮类化合物。展开剂多用有机溶剂系统，如甲苯展开剂多用有机溶剂系统，如甲苯:甲酸甲酸乙酯乙酯:甲酸甲酸(9:3:1)(9:3:1)。聚酰胺聚酰胺：游离黄酮苷元及其苷。游离黄酮苷元及其苷。展开剂极性要强，大多含醇、酸或水，展开剂极性要强，大多含醇、酸或水，如丙酮如丙酮:水水(1:1(1:1)。纤维素纤维素：分配色谱分配色谱，分离黄酮和苷。分离黄酮和苷。用
30、醇性或水性展开剂。用醇性或水性展开剂。显色剂：紫外光；显色剂：紫外光；2%2%三氯化铝甲醇液等。三氯化铝甲醇液等。第五节第五节 结构测定结构测定v常规检查：外观常规检查：外观 盐酸盐酸-镁粉反应镁粉反应 薄层检查薄层检查 熔点检查熔点检查 与标准品对照与标准品对照v波谱分析：波谱分析：UV IR NMR MSUVUV常用术语：常用术语：生色团生色团：分子中产生所示谱带的主要功能团。：分子中产生所示谱带的主要功能团。助色团助色团：与生色团相连使生色团波长红移且强度增大。：与生色团相连使生色团波长红移且强度增大。红（紫）移红（紫）移：基团或溶剂的影响，波长增大（减小）。：基团或溶剂的影响，波长增大
31、（减小）。增色效应增色效应：溶剂或助色团影响，吸收强度增大的效应。：溶剂或助色团影响，吸收强度增大的效应。减色效应减色效应：取代或溶剂的影响，吸收强度减小的效应。：取代或溶剂的影响，吸收强度减小的效应。溶剂效应溶剂效应：不同溶剂中谱带产生的位移。：不同溶剂中谱带产生的位移。末端吸收末端吸收：在仪器极限处测出的吸收。：在仪器极限处测出的吸收。肩峰肩峰：吸收曲线在下降或上升处有停顿或增加或降低。：吸收曲线在下降或上升处有停顿或增加或降低。UVn诊断试剂：诊断试剂：甲醇钠甲醇钠 乙酸钠乙酸钠 乙酸钠乙酸钠-硼酸硼酸 三氯化铝三氯化铝-盐酸盐酸重点重点n结构分类结构分类 黄酮（黄酮（FlavonesF
32、lavones）黄酮醇（黄酮醇（FlavonolsFlavonols）二氢黄酮（二氢黄酮（FlavanoesFlavanoes）二氢黄酮醇（二氢黄酮醇（FlavanonolsFlavanonols）查耳酮（查耳酮（ChalconesChalcones）异黄酮（异黄酮（IsoflavonesIsoflavones）黄烷类（黄烷类（FlavansFlavans）重点重点n水溶性比较水溶性比较 羟基羟基 分子结构分子结构 苷苷n酸性比较酸性比较 7,4-OH7 or 4-OH一般分羟基一般分羟基5-OH 重点重点显色反应显色反应nMg-HCl反应：黄酮反应：黄酮nNaBH4反应：二氢黄酮反应：二氢黄酮nZrOCl2-Citric Acid反应：反应：3-OH，5-OHnSrCl2/OH：邻二酚羟基：邻二酚羟基 重点重点n聚酰胺吸附洗脱规律聚酰胺吸附洗脱规律 氢键吸附作用氢键吸附作用 羟基羟基 分子结构分子结构 苷苷 分子内氢键分子内氢键 n提取分离提取分离PHPH梯度萃取梯度萃取 不同羟基黄酮酸性不同不同羟基黄酮酸性不同 重点重点nUVUV色谱色谱 红移红移 紫移紫移 增色增色 减色减色 诊断试剂诊断试剂考研掌握！考研掌握！
