第七章-血液流变学检验—临床检验专业知识课件.ppt

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1、学习目标 1.说出血沉的概念、测定原理、方法、注意事项、影响因素及临床应用 2.记住血液粘度测定原理、方法、影响因素及临床意义 3.学会红细胞变形性测定、红细胞聚集性测定本章目录第一节 血液流变学基础知识第二节 标本的采集及处理第三节 血液流变学常见参数测定 目标形成性检测第一节 血液流变学的基础知识一、血液流变学的概念二、血液流变学的基本特性三、血液流变学的临床应用一、血液流变学的概念研究血液及其有形成分流动与形变规律的学科称为血液流变学一、血液流变学的概念血液流变学研究层次宏观流变学血细胞流变学分子血液流变学二、血液流变学的基本特性1.血液在血管中的流动形式 层流由于血管壁的摩擦阻滞作用,

2、使血液在血管内流动时分为极薄的许多环状层,各层的流速不同血液在血管中的层流血液在血管中的层流血液在血管中的流速血液在血管中的流速二、血液流变学的基本特性2.切应力与切变率、轴流单位面积上的切变力称为切变应力,简称切应力。血管内血液速度梯度(亦即各层血液流速的变化率)称为切变率。血液在血管中流动时,血液中的有形成分如红细胞等有向血管轴线集中的趋向,称为轴流。二、血液流变学的基本特性3.血液的粘度衡量物质粘稠程度的物理量称为粘度。血液的粘度来自于血液内各种成分之间的内摩擦力,血液愈粘稠,愈不易流动。在低切变率下,切应力必须达到某一临界值,血液才开始流动,这个切应力的临界值称为屈服应力。血液的屈服应

3、力值主要取决于红细胞比容和血浆纤维蛋白原的含量。二、血液流变学的基本特性4.红细胞变形性红细胞变形性是指红细胞在流动过程中的变形能力。变形的大小和取向的一致性随切变率的增加而增加,从而致使血流阻力降低,全血粘度下降。二、血液流变学的基本特性4.红细胞变形性红细胞变形性是决定血液粘度的重要因素之一,它主要影响高切变率下的血液粘度红细胞的变形行为主要是红细胞膜能围绕细胞质进行“坦克履带式运动”。二、血液流变学的基本特性5.红细胞聚集性 红细胞聚集性受血浆中大分子物质的桥连力、红细胞表面静电排斥力和切应力等诸因素的影响。当血浆中纤维蛋白原或球蛋白增加时,红细胞容易形成聚集体(缗钱状排列)或形成的聚集

4、体更牢固。三、血液流变学的临床应用1.为疾病的早期诊断提供帮助2.为疾病的治疗、预防提供新的途径 3.对药物学研究具有重要意义4.有助于了解疾病发生和发展机制 第二节 标本的采集及处理一、标本的采集及处理二、抗凝剂 一、标本的采集及处理 采血用具:注射器、试管等应清洁干燥 采血时间:清晨,空腹十二小时以上 采血部位:肘前静脉 采血针:内径宜大不宜小 止血带:针头进血管后即松开 抽血速度:不宜过快 标本采集后处置:及时测定;4冷藏第七章第七章 血液流变学检验血液流变学检验一、标本的采集及处理注意事项:避免各种原因引起溶血血液加入抗凝剂管后立即混匀采血前三天停用具有溶栓抗凝作用的药物、降脂药物等妇

5、女采血避开月经期采用固体抗凝剂或高浓度的液体抗凝剂二、抗凝剂 选用对红细胞无影响的抗凝剂:肝素:血液流变学检查时首选 粘度测定与细胞滤过检测则忌用 常规肝素抗凝管制备第三节 血液流变学常见参数测定一、红细胞沉降率的测定二、血液粘度测定三、红细胞变形性测定四、红细胞聚集性测定一、红细胞沉降率测定 红细胞数量 数量越多,受到血浆的阻逆力越大,则血沉越慢;反之结果相反。注意:细胞数如果太少不易形成串钱状,血沉的加快并不与红细胞减少完全成比例。一、红细胞沉降率测定(一)影响红细胞沉降率的因素 1.红细胞因素 红细胞的形态 畸形红细胞或细胞严重大小不等时不易形成串钱状,血沉结果不定。不同类别贫血血沉结果

6、不一定相同。大红细胞下沉速度快于小红细胞。注意:细胞大小变化只有严重病例才影响血沉结果。一、红细胞沉降率测定(一)影响红细胞沉降率的因素 1.红细胞因素 红细胞的聚集状态红细胞在沉降过程中彼此接触与碰撞,易使细胞彼此两平面相结合而呈“串(缗)钱状”,使细胞的总体表面积减少,重量增加。随着坠体总量不断增多,也减少了每个细胞下沉时对邻近细胞下沉。红细胞聚集数量越多,聚集块越大,血沉加红细胞聚集数量越多,聚集块越大,血沉加快越明显。红细胞串钱状形成是妊娠和各种疾病快越明显。红细胞串钱状形成是妊娠和各种疾病时血沉加快的主要原因。时血沉加快的主要原因。一、红细胞沉降率测定(一)影响红细胞沉降率的因素 2

7、.血浆因素单个的红细胞是一个微小的胶体团,与水分子起水合反应形成水化膜,包裹细胞减少了直接碰撞,细胞表面的Zeta电位使细胞膜带负电荷而相互排斥,故血沉很慢。一、红细胞沉降率测定(一)影响红细胞沉降率的因素2.血浆因素当血浆中各种蛋白成分比例发生变化时,特别是不对称的大分子蛋白质(如纤维蛋白原)能够减低细胞表面 Zeta电位,改变原电场的平衡,破坏细胞表面的双电层水化膜或者因大分子物质的“桥联”作用使细胞间的排斥力减弱,使细胞容易叠合成串钱状而导致血沉加快。一、红细胞沉降率测定(一)影响红细胞沉降率的因素2.血浆因素血浆中能使血沉加快的物质:纤维蛋白原、巨球蛋白、凝血酶原、胆固醇、核酸、尿酸、

8、免疫复合物、第型肺炎球菌的多糖体、高分子右旋糖酐、羧基纤维素长链高分子等血浆中能使血沉减慢的物质:糖蛋白、卵磷酯等。一、红细胞沉降率测定(一)影响红细胞沉降率的因素(一)影响红细胞沉降率的因素 3 3技术因素技术因素 血沉管血沉管 内径内径:内径大血沉快内径大血沉快 垂直度垂直度:垂直则下沉慢垂直则下沉慢 清洁度清洁度:内壁不洁则下沉慢内壁不洁则下沉慢 温度温度 室温增高,血沉加快室温增高,血沉加快 抗凝剂抗凝剂 抗凝剂浓度高则血抗凝剂浓度高则血沉慢沉慢一、红细胞沉降率测定(二)红细胞沉降率测定(魏氏法)【原理】将抗凝全血吸于特制的血沉管中室温直立于血沉架上1 小时,读取红细胞下沉后暴露出的血

9、浆段高度。一、红细胞沉降率测定(二)红细胞沉降率测定(魏氏法)【试剂】0.105 mol/L柠檬酸钠抗凝剂:取含二分子结晶水柠檬酸钠(分子量294.12)3.09g溶于蒸馏水,加水至100 m1 一、红细胞沉降率测定【器材】魏氏血沉管、血沉架一、红细胞沉降率测定(二)红细胞沉降率测定(魏氏法)【操作】试管(13mm100mm)+抗凝剂0.4ml+静脉血2ml;旋转混匀;用血沉管吸取血液,直至“0”刻度处;垂直竖立在血沉架上静置1小时(18一25)读取血浆凹液面底面至红细胞柱顶面的距离 报告方式报告方式:x x mm/h一、红细胞沉降率测定(二)红细胞沉降率测定(魏氏法)【注意事项】试剂配制和用

10、量必须准确所用器材符合要求且清洁干燥血液与抗凝剂比例准确,混匀,无凝血、无溶血标本采集时避免脂肪血血沉管垂直,管架平稳室温控制准确在1小时末观察结果一、红细胞沉降率测定(二)红细胞沉降率测定(魏氏法)【临床意义】正常参考值 男性15 mm/h;女性20mm/h1.生理性血沉加快 12岁以下儿童 妇女月经期、妊娠3个月至产后1个月 老年人 饭后、剧烈运动、热水浴后一、红细胞沉降率测定(二)红细胞沉降率测定(魏氏法)【临床意义】2.病理性血沉加快(1)各种炎症(2)组织损伤及坏死(3)恶性肿瘤(4)高球蛋白血症一、红细胞沉降率测定(三)血沉方程K值概念 用方程式的形式表达血沉和血细胞比容的关系公式

11、 ESRK-(l-Het+InHct)式中:K为血沉方程K值,In指自然对数(以2.718为底的对数),Hct为血细胞比容,1-Hct为血浆比容。设:R-(l-Het+InHct),则K=ESR/R从红细胞比容查R值一、红细胞沉降率测定(三)血沉方程K值【参考区间】53士20【临床意义】K值大表示血沉快,K值小则血沉慢因血沉方程K值排除了血细胞比容对血沉的影响,故:一、红细胞沉降率测定(三)血沉方程K值无论ESR是否增快,K值增高都反映红细胞聚集性增加如K值正常而ESR加快,是Hct降低引起的ESR加快ESR正常,K值也正常可以肯定ESR值是正常的ESR加快伴K值增大,可肯定ESR是加快的如E

12、SR正常,而K值增大,则可肯定ESR加快二、血液粘度测定(一)全血粘度测定 设备 旋转式粘度计 【原理】当平板以一定的速度旋转时,由于血液的粘滞性,与圆锥相连的弹簧则产生一个复原扭矩,血液粘度的大小与复原扭矩呈正相关,复原扭矩通过一个测力传感器检测并经计算机处理后,将表观粘度值显示在仪器的屏幕上。二、血液粘度测定二、血液粘度测定(一)全血粘度测定【基本结构】样品传感器速度控制与调节系统力矩测量系统调控温度系统二、血液粘度测定(一)全血粘度测定【标本采集】标本采集后室温下静置20分钟进行测定,最长不得超过4小时 二、血液粘度测定(一)全血粘度测定【影响因素】1.内在因素 血细胞比容 红细胞变形性

13、和大小 红细胞聚集 血浆粘度二、血液粘度测定(一)全血粘度测定【影响因素】2.外在因素 温度 渗透压 pH值 输液二、血液粘度测定(二)血浆粘度测定【基本结构】已知尺寸的毛细管加热装置控温装置测量电极显示装置二、血液粘度测定(二)血浆粘度测定【原 理】毛细管粘度计测定流体粘度的基本原理是泊肃叶Poiseuille)定律,就是一定体积的液体,在恒定的压力驱动下,流过一定管径的毛细管所需的时间与粘度成正比。二、血液粘度测定(二)血浆粘度测定【影响因素】蛋白质、脂类、电解质、温度【标本制备】采血同全血粘度测定,分离血浆时应以1600g(3000r/min)离心10分钟以上,尽量去除细胞成分并应避免溶

14、血二、血液粘度测定(二)血浆粘度测定【操作】按仪器使用说明书和厂家提供的操作手册进行操作(三)血液粘度测定的临床意义1.全血粘度、血浆粘度的参考区间血液粘度测定参考区间血液粘度测定参考区间(三)血液粘度测定的临床意义2.血液粘度测定的临床意义 影响血液粘度的生理因素 多个因素改变引起的全血粘度增高 血浆蛋白异常所致的血液粘度增高 Hct增高所致血液粘度增高 红细胞异常所致的血液粘度增高三、红细胞变形性测定 直接测定法 间接测定法 激光衍射法【仪器结构】1.可变切变率的两个透明的同轴圆筒 2.光路系统 3.摄像系统 4.控温装置三、红细胞变形性测定【原 理】根据光电转换原理,自动激光衍射仪将红细

15、胞与衍射图像的吸光度直接联系起来,以衍射环中心为坐标原点,比较水平与垂直轴上等距离A、B两点的光强度,并把A、B点的光强差与光强和的比值称为红细胞变形指数(deformation index,DI)DI=(IA一IB)/(IAIB)激光衍射原理及红细胞衍射图三、红细胞变形性测定【临床意义】1.参考区间 各实验室应制定自己的参考区间 2.红细胞变形性降低四、红细胞聚集性测定(一)红细胞聚集性粘度测定法 【原理】血液在静置或缓慢流动时,红细胞处于聚集状态,这种低切变率下的红细胞聚集使血液粘度升高,其升高程度与红细胞聚集性呈正相关。四、红细胞聚集性测定【操作】用以下两种方法计算红细胞聚集指数1.利用

16、低切变率血液的相对粘度作为红细胞的聚集指数 AIB/P2.采用低切变率下的一表观粘度与高切变率下的一表观粘度之比作为红细胞的聚集指数 AI=L/H四、红细胞聚集性测定(二)血沉法测定红细胞聚集性【原理】当红细胞发生聚集时,随着红细胞聚集体的形成及其相对密度的增加,红细胞沉降速度明显加快。在血液流变现象中,血沉可作为红细胞聚集和分散的客观指标。四、红细胞聚集性测定(二)血沉法测定红细胞聚集性【临床意义】红细胞聚集性增高见于:血栓形成性疾病时、冠心病、高血压、脑卒中、肺源性心脏病、糖尿病、恶性肿瘤、周围血管病、烧伤、休克等。小 结 血液在血管中的流动形式为层流,愈靠近血管中心流速愈快,愈靠近管壁流

17、速愈慢。红细胞的变形性主要影响高切变率下的血液粘度,其降低可使全血粘度特别是高切变率下的表观粘度增高。血液流变学检测主要参数有:全血粘度、血浆粘度、血细胞比容、红细胞变形性、与红细胞聚集性相关的参数,即红细胞沉降率、血沉方程K值、红细胞电泳、低切变率下血液相对粘度等。目标形成性检测第七章第七章 血液流变学检验血液流变学检验请您解释血液流变学研究血液及其有形成分的流动与形变规律的学科称为血液流变学。红细胞沉降率红细胞沉降率简称血沉,它是红细胞在一定条件下沉降的速度,用mm/h表示结果。它是反映红细胞聚集性的一项常用的筛选指标。第七章第七章 血液流变学检验血液流变学检验请您练习影响血沉的因素有哪些?1.血浆因素:血浆中胆固醇、纤维蛋白原或球蛋白增多,可使血沉加快。而清蛋白、糖蛋白、卵磷脂等可使血沉减慢。2.红细胞因素:红细胞增多症、球形红细胞则血沉减慢,严重贫血,血沉愈快。红细胞聚集成缗钱状态是各种病理所致血沉加快的主要原因。3.技术因素:血沉管垂直时血沉慢,血沉管倾斜时则血沉加快;血沉管内有蛋白质等粘附可使血沉减慢;室温高血沉快,反之慢;抗凝剂高血沉变慢。

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