1、 急性肾衰竭动物模型的建立【实验目的】1.1.学习复制急性肾衰竭动物模型的方法。2.2.观察急性肾衰竭时机体的典型表现及血酐水平的变化。3.3.掌握急性肾衰竭的概念及发病机制。2 【实验原理】急性肾功能衰竭急性肾功能衰竭 指各种原因在短期内引起肾脏泌尿功能指各种原因在短期内引起肾脏泌尿功能急剧障碍，以致机体内环境出现严重紊乱的急剧障碍，以致机体内环境出现严重紊乱的病理过程，临床表现有水中毒、氮质血症、病理过程，临床表现有水中毒、氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒等高钾血症和代谢性酸中毒等急性肾功能不全的分类急性肾功能不全的分类 根据病因学，临床上将急性肾功能不全根据病因学，临床上将急性肾功能不全
2、分为肾前性、肾性、肾后性三种。分为肾前性、肾性、肾后性三种。3 急性肾功能的发病机制急性肾功能的发病机制肾缺血肾缺血肾中毒肾中毒血流动力学异常血流动力学异常肾小管损伤肾小管损伤滤过膜受损滤过膜受损皮质缺氧皮质缺氧髓质充血髓质充血肾小管阻塞肾小管阻塞原尿反漏原尿反漏滤过系数滤过系数外髓部供氧外髓部供氧 GRF 少尿少尿4 【实验动物】健康家兔，雄性，体重1.51.8Kg5 【实验器材和药品】20%乌拉坦溶液、庆大霉素注射液（1ml:4万单位）、150U/ml肝素、0.9%生理盐溶液、苦味酸 BL-420F实验系统、哺乳动物手术器械一套、动脉导管、动脉夹、膀胱导尿管、注射器（2ml、5ml）、皮头
3、针一套、水浴箱、离心机、丝线 6 【实验步骤】家兔称重、分组家兔称重、分组-体重相似为一组，并且实验组和对照组体重相同或相似体重相似为一组，并且实验组和对照组体重相同或相似生理盐水作静脉点滴输液生理盐水作静脉点滴输液-耳缘静脉滴注耳缘静脉滴注家兔固定家兔固定-仰卧位固定仰卧位固定剪去颈部和上腹部毛、麻醉剪去颈部和上腹部毛、麻醉-20%氨基甲酸乙酯注射液氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg，耳缘静，耳缘静脉注射麻醉脉注射麻醉在麻醉状态下，做颈总动脉插管，并连接到试验系统在麻醉状态下，做颈总动脉插管，并连接到试验系统-7 在麻醉状态下，自耻骨联合上方腹部正中线切开皮肤，切口长在麻醉状态下，自耻骨联合上方
4、腹部正中线切开皮肤，切口长46cm 夹闭肾动脉夹闭肾动脉-沿腹白线打开腹腔，将内脏推向左侧，打开后腹膜，暴露沿腹白线打开腹腔，将内脏推向左侧，打开后腹膜，暴露肾蒂，分离肾动脉，实验兔和夹闭肾动脉肾蒂，分离肾动脉，实验兔和夹闭肾动脉30分钟，对照组肾脏不夹闭。分钟，对照组肾脏不夹闭。二组家兔耳缘静脉注入庆大霉素二组家兔耳缘静脉注入庆大霉素4万万U/Kg每隔每隔10分钟，取一次尿液，测定尿量，并做尿肌酐试验。共取三分钟，取一次尿液，测定尿量，并做尿肌酐试验。共取三次。次。8 颈总动脉取血，做血肌酐试验颈总动脉取血，做血肌酐试验最后将家兔一并处死，取出肾脏，观察并比较家兔的肾脏。最后将家兔一并处死，
5、取出肾脏，观察并比较家兔的肾脏。9 血、尿肌酐测定方法（见表1）和内生肌酐清除率的计算从颈总动脉取血置盛有肝素的离心管内，离心后取血浆，按下表进行实验。表1 血浆和尿液肌酐含量测定 试剂（ml）标准管S标准空白管S0测定管R测定空白管R0肌酐标准液025025-血浆或尿液-02500250血浆或尿液0.5-0.5-空白苦味酸-0.5-10 计算：mol/L 88.402mg%)(ml/minml/min mg%10023.001.0S01.0R2 mg%23.00.01S0.01R2 肌酐）尿量（血中肌酐含量尿中肌酐含量内生肌酐清除率：尿中肌酐含量：血中肌酐含量：11 【观察项目】表2 处理前
6、和处理后对照组家兔各指标变化组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐清除率别 （mmHg)（滴/分）（次/分）（%）（%）（%）处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后1兔2兔3兔4兔5兔6兔12 表3 处理前和处理后实验组家兔各指标变化组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐清除率别 （mmHg)（滴/分）（次/分）（%）（%）（%）处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后7兔8兔9兔10兔11兔12兔13 【预期实验结果】二组家兔兔子血压升高，呼吸加深加快，心率加快，尿量减少，血/尿肌酐的浓度增高，内生肌酐清除率升高，各项症状明显易于测定。14 正常肾脏切面图15 急性肾衰竭肾脏切面图16 急性肾衰竭镜下图毒素引起的肾小管坏死通常弥散性累及肾小管，而由缺血（如心衰引起的严重低血压）引起的肾小管坏死则成片状受累。17 【注意事项】1.选择体重相差不超过250g的家兔进行对照 2.注意麻醉药的剂量与注入剂量、观察麻醉情况。3.专人测定血/尿肌酐 4.颈总动脉插管5.肾脏结扎线置于肾动脉处，避免勒破肾脏6.每项生化检验所加入试剂的用量要准确左颈总动左颈总动脉脉迷走神迷走神经经颈内静脉颈内静脉胸骨舌骨胸骨舌骨肌肌胸锁乳突胸锁乳突肌肌18 19
