1、2022-10-31药代动力学(1)药代动力学药代动力学(1)药代动力学(1)药代动力学（Pharmacokinetics）：应用动力学原理与数学处理方法，研究药物在体内吸应用动力学原理与数学处理方法，研究药物在体内吸收、分布、代谢、排泄等过程的速度规律。收、分布、代谢、排泄等过程的速度规律。l 研究药物在体内的动态规律（时间过程）。研究药物在体内的动态规律（时间过程）。l研究体内对药物的作用（药代与药效学的区别）研究体内对药物的作用（药代与药效学的区别）药代动力学(1)范围：ADME过程中存在的量时变化规律过程中存在的量时变化规律的描述的描述 l 吸收（Absorption）、l 分布(Di
2、stribution)、l 代 谢 或 生 物 转 化(M e t a b o l i s m o r biotransformation)、l 排泄(Excretion)、l 蛋白结合率(protein binding rates)。药代动力学(1)处置（disposition）包括分布、排泄、代谢 消除消除（elimination）包括代谢消除、排泄消除。概念：概念：药物动力学和药代动力学药代动力学(1)群体药代动力学群体药代动力学(populationpharmacokinetics,PPK)利用稀疏数据研究群体的特征、变异和各种因素对药代动力学影响的药代动力学方法。主要用于个体化给药方
3、案设计 临床药代动力学临床药代动力学(clinicalpharmacokinetics)在人体中进行的药代动力学研究。相关学科：相关学科：药理学临床药理学临床药代动力学。药代动力学(1)药代动力学研究的意义：l 指导前期药物开发研究指导前期药物开发研究ADME（T）l l指导选择合适的给药途径指导选择合适的给药途径p.o.i.v.i.ml l对药效学研究的指导对药效学研究的指导PK/PDl l指导药物的注册指导药物的注册Registrationl l确定药物的给药方案确定药物的给药方案dose&intervall l研究药物剂型的影响研究药物剂型的影响dosageformsl l指导临床合理用
4、药指导临床合理用药rationaluseofdrugsl l研究种属差异研究种属差异Racel l研究不同人群的差异研究不同人群的差异populationl l研究不同影响因素的影响研究不同影响因素的影响physiological&pathogenicfactorsl l研究药物之间相互作用研究药物之间相互作用druginteraction药代动力学(1)生物等效性：生物等效性：bioequivalanece：一种药物的不同：一种药物的不同剂型剂型(或不同产地或不同产地)在相同的试验条件下，给以相在相同的试验条件下，给以相同的剂量，其吸收同的剂量，其吸收速度速度和和程度程度没有明显的差异。没有
5、明显的差异。生物利用度生物利用度（bioavailability）：剂型中药物被吸：剂型中药物被吸收进入血液的收进入血液的速度速度和和程度程度。分。分相对相对生物利用度和生物利用度和绝对绝对生物利用度。对口服药物它描述药物由胃肠生物利用度。对口服药物它描述药物由胃肠道吸收经过肝脏而到达体循环血液中的药量占口道吸收经过肝脏而到达体循环血液中的药量占口服剂量的百分数。服剂量的百分数。生物利用度是反映药物内在质量的重要指标。生物利用度是反映药物内在质量的重要指标。生物等效性是保证含有同一药物不同制剂质生物等效性是保证含有同一药物不同制剂质量一致性的主要依据。量一致性的主要依据。药代动力学(1)生物等
6、效性研究的目的生物等效性研究的目的：评价同一药物的质量一致性，用于注册目的和临床应用。医生在使用2种或以上品牌或不同口服制剂的药物时，如果药物之间存在生物等效性，两种药物可以互相代替，而不导致药效和不良反应的变化。如通用药物代替专利药物，国产药物代替进口药物 评价药物是否具有临床意义上的等效的方法评价药物是否具有临床意义上的等效的方法化学等效：含量、溶出度测定等。生物等效：用药代动力学的研究证实。疗效等效：药效学研究、临床试验证实药代动力学(1)药代动力学药代动力学吸收吸收吸收部位吸收部位l 胃肠道l 口腔l 皮肤l 肺l 粘膜l 注射部位药代动力学(1)首过效应首过效应：胃、小肠、大肠吸收的
7、药物经过门静脉进入肝脏，在肝脏代谢酶的作用下，某些药物在进入大循环时受到较大的损失 吸收原理吸收原理：跨膜转运。被动扩散、主动转运（载体转运）、胞饮作用、P-糖蛋白(Coca-2细胞)药代动力学(1)组织分布组织分布影响组织分布的因素 组织血流量、细胞膜通透性、蛋白结合率、药物与组织的亲合性等 血脑屏障 母体胎盘屏障 肝肠循环 药代动力学(1)代谢药物在体内经历化学结构的变化分:1 相反应（功能基团导入）2 相反应（结合反应）药代动力学(1)代 谢 器 官：肝 脏、胃 肠 道代谢反应的酶：特异性酶和非特异性酶P450酶：肝微粒体中的一种色素，在还原状态下与CO结合在450nm处有明显吸收。分许
8、多亚型酶的诱导与抑制药物相互作用（同一P450酶代谢的药物）药代动力学(1)影响药物代谢的因素影响药物代谢的因素 年龄年龄 基础病基础病 性别性别 种族种族 个体个体 联合用药联合用药 食物食物 药代动力学(1)排泄：排泄：排泄器官：肾脏、肠道、皮肤、呼吸、乳汁 胆汁排泄 肾脏排泄：肾小球滤过1.肾小管分泌：主动转运 药代动力学(1)药代动力学模型 用数学的方法模拟药物在体内的吸收、分布和消除（排泄和代谢）的速度过程。确定合适反应药物在体内动态规律的数学模型后，可以确定药物的一些参数，利用这些参数指导新药的研发、临床合理用药等。目前有：房室模型、非房室模型、生理药代动力学模型药代动力学(1)房
9、室模型 房室：开放、浓度均一性、房室之间转运、与解剖生理的关系 单室模型（中央室）多室模型（中央室和至少一个周边室）药物在中央室与周边室之间分布，药物从中央室消除 药代动力学(1)药物在体内的消除药物在体内的消除 一级速率消除 =dc/dt=-kc 零级速率消除 =dc/dt=-k 受酶促限制的速率过程（非线性速度过程）：与米氏方程类似，低浓度时呈现为一级速率方程，高浓度时呈现零级速率过程药代动力学(1)单室模型单室模型 静脉推注静脉推注 静脉滴注静脉滴注 血管外给药血管外给药药代动力学(1)药代动力学(1)二室模型 静脉推注静脉推注 静脉滴注静脉滴注 血管外给药血管外给药 药代动力学(1)药
10、代动力学(1)多室模型多室模型 静脉推注 静脉滴注 血管外给药 药代动力学(1)单剂量给药和多剂量给药单剂量给药和多剂量给药 药代动力学(1)模型的确定：判断标准：图解判断 残差平方判断 用r2进行判断 AIC判断法 F检验 药代动力学(1)药代动力学计算药代动力学计算 原理：吸收、分布、消除是三个同时进行的过程，吸收初期：吸收+分布+消除分布期：分布+消除1.消除期：消除 药代动力学(1)计算方法计算方法：消除相非线形回归，求出消除相参数 分布期中扣除消除的影响，得分布相参数 吸收相中扣除分布、消除过程得影响得吸收相参数 WinNolin,Nonmen,NDST-21,3P97,3P87程序
11、药代动力学(1)药代动力学参数及其意义 1.生物半衰期生物半衰期(biologicalhalflife)t1/2hr t1/2=0.693/k 吸收半衰期 t1/2()消除半衰期 t1/2()半衰期数半衰期数体内残留药量（）体内残留药量（）被消除的药量被消除的药量1505022575312.587.546.2593.7553.1396.8761.5698.4470.7899.2280.3999.6190.2099.80100.1099.90药代动力学(1).Cmax mg/L tmax hr or min 表观分布容积(apperent volume of distribution)Vd L
12、人体体液约为40L，细胞外液约为1020L，血浆约为5L。Vd=D/C Kel 1/hr t1/2=0.693/Kel单室模型 Kel=K二室模型 Kel=药代动力学(1)清除率(clearance)Cl L/hr 单位时间内药物被从中消除体液的体积。有Clr,Clh之分曲线下面积 AUC(Area under curve)mg/L.hr 生物利用度 F(Bioavailability)无单位 绝对生物利用度 相对生物利用度 F=(AUCtest/AUCreference)*100%AUC0=AUC0t+Ct/K 波动系数：长效、控释制剂需进行多剂量给药达稳态后研究血药浓度的波动性FI=2(C
13、max-Cmin)/(Cmax+Cmin)药代动力学(1)PK参数的意义T1/2：反映药物在体内消除的快慢，常用来决定给药间隔Cmax：反映药物在体内达到峰值时的浓度，决定药物是否产生药效或带来不良反应。Tmax：反映药物达到最高浓度时的时间，决定药物产生 药效或不良反应的快慢Vd：反映药物在体内的分布大小Ke（）：消除速率常数，反映药物在体内消除的快慢。CL：清除率，反映药物从体内消除的快慢。AUC：反映药物吸收的大小F：试验药的AUC相对于对照药的 AUC大小，反映药物的吸收相对比（生物等效性）药代动力学(1)生物等效性（生物利用度）和药代动力学的区别 1研究目的不同2对照药的设立3给药途
14、径。生物等效性仅适应于口服给 药的药物4剂量的不同5 报告的结果不同 药代动力学(1)生物等效性研究与药代动力学研究的共同点选择受试者、采集标本、建立方法、选择受试者、采集标本、建立方法、标本测定、药代动力学计算。标本测定、药代动力学计算。药代动力学(1)生物样品及其测定 生物样品(标本)的种类 血液：血清(不加抗凝剂)。1ml全血可出大约0.5ml血清；血浆(加抗凝剂如肝素、草酸钠等)，1ml全血可出大约0.6ml血清。血浆可以立即离心，血清需要室温放置（药物稳定性？）尿液：按照时间间隔取样。一般按照人体的生理特点以2个小时或以上的时间段取样，留样前样品需要均匀化处理，计体积后留样 唾液：口
15、腔内刺激后收集 粪便：均匀化，称重后留样 胆汁或腹水：仅适合手术的病人 其它：如呼气、汗水、前列腺液、痰液、脓水，乳汁、毛发、指甲等药代动力学(1)生物标本的特点 药物浓度低：ug/ml(GC,HPLC,EC),ng/ml(LC-MS),pg/ml(放免)。干扰产物多：蛋白结合药物，游离药物，代谢产物（活性），内源性物质，联合用药。随时间变化：受量的限制：药代动力学(1)生物样品及其测定 标本的代表性 血液：可以反映药物即刻的变化与药物的疗效、不良反应紧密相关。尿液：反映药物经过肾脏排泄的量 粪便：反映药物经过肠道排泄的量 其它：组织分布的浓度和量药代动力学(1)生物样品及其测定 标本的保存(
16、经过保存目的的处理后)低温保存 20C保存 40C保存 70C保存 保存时的添加剂：酶抑制剂、抗氧剂等药代动力学(1)药物浓度的测定 游离部分（与药物疗效直接相关）药物与血浆蛋白的结合部分（结合型与游离型药物呈动态平衡，注意与结合性代谢产物的区别）目前分析方法测定的是药物总体浓度，为游离和结合部分之和 蛋白结合率药代动力学(1)生物样品及其测定 标本的处理方法：依据所选择的测定方法进行。去微粒后直接进样或稀释进样：离心处理，5000 r/min的离心去不溶微粒；10000 r/min的离心结合滤膜去除部分生物大分子。去除蛋白：沉淀处理。常用的方法有(1)与水互溶的有机溶剂沉淀如甲醇、乙腈等，用
17、量为血浆用量的1.5倍以上。灵敏度降低;(2)有机酸如三氯乙酸、高氯酸等沉淀。特点是用量少(0.5倍)、沉淀完全，缺点为药物在酸性环境中可能被破坏。(3)超滤或透析法。萃取处理。结合物水解：酸水解、酶水解药代动力学(1)生物样品及其测定 萃取处理：样品浓缩，灵敏度提高，回收率低、数据的精密度有时不如沉淀法 液液萃取：萃取溶剂正己烷、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇等。毒性，与水溶解，标本的酸化或碱化(药物在分子状态易被萃取)液固萃取(固相萃取)SPE(solid phase extraction)，商品化的萃取短柱和自动萃取仪药代动力学(1)生物样品及其测定 萃取处理：回提处理 吹干处理 衍生
18、化药代动力学(1)生物样品及其测定药代动力学(1)方法的建立 待测标本的特点：药物浓度低，浓度为g/ml,ng/ml,pg/ml 干扰组分多，游离和结合的药物、内源性物质、代谢产物。标本的量少 不易获得 标本的分解药代动力学(1)方法的建立 仪器的选择(分离和定量能力)色谱法：气相色谱法GC、液相色谱法HPLC 毛细管电泳：CE(CE-UV,CE-FL,CE-MS)光谱法：少用 生测法：免疫法：放射免疫、酶免疫等，专一性强、灵敏度高，干扰少，局限于试剂盒药代动力学(1)方法的建立 对测定灵敏度的要求 一般要求可以测定峰值浓度的1/101/20。低浓度时的定量误差在20以内药代动力学(1)方法的
19、考核(validation)（一）特异性(specificity)须证明所测定物质是受试药品的原形药物或特定活性代谢物。生物样品所含内源性物质或代谢物不得干扰对样品所测物质的分析。根据药物结构特性，首选色谱法，如HPLC、GC、GC-MS或LC-MS等方法，并确定保证分析方法特异性的最佳条件。色谱法应提供空白生物样品、标准品、空白生物样品加入标准品及用药后生物样品的色谱图，以反映分析方法的特异性。6份空白样品的测定药代动力学(1)方法的考核(validation)（二）标准曲线与线性范围(regression line and range)所测定物质的浓度与响应的相关性，用回归分析方法（如用加
20、权最小二乘法）所得的回归方程来评价。标准曲线高低浓度范围为线性范围，在线性范围内浓度测定结果应可达到试验要求的精密度和准确度。必须用至少5个浓度建立标准曲线，应使用与待测样品相同生物介质，线性范围要能覆盖全部待测浓度，不得用线性范围外推的方法求算未知样品的浓度。标准曲线不包括零点。R0.99，6-7点 线性的高低浓度比为50500药代动力学(1)方法的考核(validation)（三）精密度与准确度(precision and accuracy)要求选择三个浓度的质控样品同时进行方法的精密度和准确度考察，低浓度选择在最低量限（LOQ）附近，高浓度在标准曲线的上限附近，中间选一个浓度，每一浓度至
21、少测定5个样品。精密度用质控样品的日内和日间相对标准差（RSD）表示，一般RSD应小于15在LOQ附近RSD应小于20。准确度是指用特定方法测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度，可用相对回收率表示，一般应85115范围内，在LOQ附近应在80120范围内。(绝对回收率50%)药代动力学(1)方法的考核(validation)（四）最低定量限(low quantification limit)最低定量限是标准曲线上的最低浓度点，又称灵敏度，表示测定样品中符合准确度和精密度要求的最低药物浓度。LOQ应能满足测定35个半衰期时样品中的药物浓度，或Cmax110120时的药物浓度。（五）样品稳定性(
22、stability)对含药生物样品在室温、冰冻和冻融条件下以及不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品的存放条件和时间。（六）提取回收率(recovery)考察高、中、低三个浓度的提取回收率，其限度一般应高于50。药代动力学(1)方法的考核(validation)（七）质控样品(quality control samples)质控样品系将已知量的待测药物加入到生物介质中配制的样品，用于质量控制。一般配制高、中、低三个浓度的质控样品。（八）质量控制(quality control)应在生物样品分析方法确证完成之后开始测试未知样品。每个未知样品一般测定一次，必要时可进行复测。每批生物样品测定时应
23、建立新的标准曲线，并随行测定高、中、低三个浓度的质控样品。质控样品测定结果的偏差一般应小于20。药代动力学(1)加权回归(weighted regression)药代动力学(1)测定仪器介绍 气相色谱法 适应范围：可以气化的药物或经过处理(如衍生化)后能够气化的药物 特点：分辨率高，检测灵敏度高，仪器稳定，成本较低。检测器：氢火焰(FID)；氮磷检测器(NPD)，适合含N,P化合物的药物；电子扑获检测器(ECD)，适合强电负性的药物如卤素、酰胺、氰基等；质谱(MS)检测器。药代动力学(1)测定仪器介绍 高效液相色谱法 本身具有紫外、荧光、电化学吸收的药物，可以用于热不稳定的药物 特点：分辨率、
24、灵敏度较高，多数情况下样品不需衍生化处理。检测器：紫外，荧光，电化学，质谱检测器药代动力学(1)仪器构造高效液相色谱进样口检测器色谱图色谱柱溶剂泵混合器 (HPLC)药代动力学(1)药代动力学(1)LC-MS,LC-MS/MS知识介绍药代动力学研究的主要工具 LC:liquid chromatography MS:mass spectrometry MS:单级质谱 MS/MS:串联质谱 Interface 接口 ESI:electrospray ionization APCI:atmospheric pressure chemical ionization药代动力学(1)LC-MS 的接口装置
25、药代动力学(1)LC-MS的结构药代动力学(1)串联质谱(LC-MS/MS)特点第一级质谱测定准分子离子；第二级质谱测定某一碎片离子，特异性非常高。方法开发简单灵敏度高:LC-MS/MS 0.11.0ng/ml;HPLC 10100ng/ml分析时间短，测定一个样品3min HPLC 10min多个药物同时测定药代动力学(1)ABS（Applied BioSystem，应用生物系统公司）公司：型号：API 3000串联质谱北京用户：API3000 清华大学、北京大学、军科院、协和医院、北大医院、药理所（已经定购）API4000 阜外医院、防疫站药代动力学(1)API 3000的接口装置药代动力学(1)Q0Q00SkimmerTube lensDual heater BlockRemovable Ion Tube10-310-21.2 torr药代动力学(1)EluentIonsSweep Gas药代动力学(1)药代动力学(1)格列本脲和内标格列齐特M+H+的产物离子全扫描质谱图(A)格列本脲;(B)格列齐特药代动力学(1)B2022-10-31药代动力学(1)
