1、理解理解 教材新知教材新知 把握把握 命题热点命题热点 应用应用 落实体验落实体验 课下综合检测课下综合检测 课堂回扣练习课堂回扣练习 命题点一命题点一 命题点二命题点二 知识点一知识点一 知识点二知识点二 2 22 2 动物动物 细胞细胞 工程工程 专专 题题 2 2 2 22.2. 1 1 22 动物细胞工程动物细胞工程 22.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术 1动物细胞培养的过程:动物组织块动物细胞培养的过程:动物组织块 剪碎剪碎 用胰蛋白酶处理用胰蛋白酶处理 单个细胞单个细胞 加培养液加培养液 细胞悬细胞悬 液液原代培养原代培养传代培养。传代培养。 2动物细胞培养一
2、般选用胚胎或幼龄动物的组织,动物细胞培养一般选用胚胎或幼龄动物的组织, 细胞在培养过程中会出现细胞贴壁细胞在培养过程中会出现细胞贴壁(生长生长)和细胞和细胞 接触抑制现象。接触抑制现象。 3动物细胞培养的条件包括:无菌、无毒的环境,动物细胞培养的条件包括:无菌、无毒的环境, 适宜的营养、温度和适宜的营养、温度和pH及气体环境。及气体环境。 4动物核移植技术的原理是动物细胞核的全能性,动物核移植技术的原理是动物细胞核的全能性, 属于无性生殖。属于无性生殖。 5动物体细胞核移植的受体细胞是已经去核的动物体细胞核移植的受体细胞是已经去核的M 期卵母细胞。期卵母细胞。 动物细胞培养动物细胞培养 1概念
3、概念 从动物机体中取出相关的组织,将它分散成从动物机体中取出相关的组织,将它分散成_, 然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞_和和_。 单个细胞单个细胞 生长生长 增殖增殖 2过程过程 传代培养传代培养 先用先用_等处理贴满瓶壁的细胞,等处理贴满瓶壁的细胞, 再分瓶继续培养再分瓶继续培养 _代左右时,细胞增殖缓慢,甚至停止代左右时,细胞增殖缓慢,甚至停止 部分细胞部分细胞_发生改变,获得不死性,能无发生改变,获得不死性,能无 限增殖限增殖 核型核型 1050 胰蛋白酶胰蛋白酶 3相关概念相关概念 (1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞细胞贴壁:细胞悬液中分散的
4、细胞_上。上。 (2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_ 时,细胞时,细胞_的现象。的现象。 (3)原代培养:指动物组织消化后的原代培养:指动物组织消化后的_。 (4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现_后,需要重后,需要重 新用新用_等处理,然后分瓶继续培养,让细胞等处理,然后分瓶继续培养,让细胞_ 的培养过程。的培养过程。 贴附在瓶壁贴附在瓶壁 表面相互接触表面相互接触 停止分裂增殖停止分裂增殖 初次培养初次培养 接触抑制接触抑制 胰蛋白酶胰蛋白酶 继续增殖继续增殖 4培养条件培养条件 (1)无菌、无毒的环境:对无菌、无毒的
5、环境:对_和所有和所有_进行无菌进行无菌 处理。处理。 (2)营养营养 无机物:无机盐、无机物:无机盐、_等等 有机物:糖、氨基酸、促生长因子有机物:糖、氨基酸、促生长因子 _:补充培养液中没有完全搞清:补充培养液中没有完全搞清 楚的成分楚的成分 (3)温度和温度和pH 温度:温度:_ pH:_ (4)气体环境气体环境 O2:_所必需的所必需的 CO2:维持:维持_ 培养液培养液 培养用具培养用具 微量元素微量元素 动物血清、血浆动物血清、血浆 36.50.5 7.27.4 细胞代谢细胞代谢 培养液的培养液的pH 5应用应用连线连线 1为什么选用胚胎或幼龄动物组织进行细胞培养?为什么选用胚胎或
6、幼龄动物组织进行细胞培养? 提示:提示:幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低,增殖能力很幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低,增殖能力很 强,更易于培养。强,更易于培养。 2进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细 胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 提示:提示:用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋 白质。多数细胞培养的适宜白质。多数细胞培养的适宜pH为为7.27.4,胃蛋白酶在此环境,胃蛋白酶在此环境 中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活性较
7、高,因此胰蛋白酶中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活性较高,因此胰蛋白酶 适宜用于细胞培养时的消化。适宜用于细胞培养时的消化。 3动物细胞培养要经过脱分化的过程吗?为什么?动物细胞培养要经过脱分化的过程吗?为什么? 提示:提示:动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动 物细胞发育潜能变弱,失去了发育成完整个体的能力,所以动物物细胞发育潜能变弱,失去了发育成完整个体的能力,所以动物 细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。 4为什么进行动物细胞培养时,通常要添加血清?为什么进行动物细
8、胞培养时,通常要添加血清? 提示:提示:血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质,血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质, 而且还含有多种未知的促生长因子、促贴附因子及其他活性物而且还含有多种未知的促生长因子、促贴附因子及其他活性物 质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。 1动物细胞培养过程解读动物细胞培养过程解读 (1)原理:细胞增殖。原理:细胞增殖。 (2)将动物细胞分散成单个细胞培养的原因:将动物细胞分散成单个细胞培养的原因: 保证细胞所需要的营养供应。保证细胞所需要的营养供应。 保证细胞内有害代谢产物的及时排出。保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
9、 (3)细胞株和细胞系:细胞株和细胞系: 细胞株:传代培养的细胞能传到细胞株:传代培养的细胞能传到1050代,这样的传代细代,这样的传代细 胞称为细胞株。胞称为细胞株。 细胞系:传代培养的细胞在传到细胞系:传代培养的细胞在传到50代后,有部分细胞的遗代后,有部分细胞的遗 传物质发生了改变,获得不死性,这种具有癌变特点的细胞称为传物质发生了改变,获得不死性,这种具有癌变特点的细胞称为 细胞系。细胞系。 2动物细胞培养与植物组织培养的比较动物细胞培养与植物组织培养的比较 比较项目比较项目 植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养 区区 别别 原理原理 植物细胞的全能性植物细胞的全能性 细
10、胞增殖细胞增殖 培养基培养基 固体或半固体培养基,固体或半固体培养基, 包括矿质元素、蔗糖、包括矿质元素、蔗糖、 维生素、琼脂、植物激维生素、琼脂、植物激 素等素等 液体培养基,包括液体培养基,包括 无机盐、葡萄糖、无机盐、葡萄糖、 维生素、氨基酸、维生素、氨基酸、 动物血清等动物血清等 培养条件培养条件 再分化阶段需光再分化阶段需光 不需光不需光 细胞来源细胞来源 离体植物器官、组织或离体植物器官、组织或 细胞细胞 胚胎或幼龄动物组胚胎或幼龄动物组 织、器官织、器官 比较项目比较项目 植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养 区区 别别 过程过程 脱分化、再分化脱分化、再分化 原代
11、培养、传代培养原代培养、传代培养 结果结果 获得新个体或细胞产品获得新个体或细胞产品 大量产生细胞或细胞大量产生细胞或细胞 产物产物 用途用途 快速繁殖名贵花卉和果树快速繁殖名贵花卉和果树 培养无病毒植株、转基因培养无病毒植株、转基因 植物植物 大规模生产细胞产品如药大规模生产细胞产品如药 物、食品添加剂、香料、色物、食品添加剂、香料、色 素等素等 生产蛋白质制品如生产蛋白质制品如 病毒疫苗、干扰素、病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等单克隆抗体等 检测有毒物质检测有毒物质 研究生理、药理、研究生理、药理、 病理病理 相同点相同点 都需要人工条件下的无菌操作,无菌培养都需要人工条件下的无菌操作,无
12、菌培养 都是合成培养基都是合成培养基 都需要适宜的温度、都需要适宜的温度、pH等条件等条件 都进行有丝分裂都进行有丝分裂 特别提醒特别提醒 (1)植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过 程,但植物组织培养过程中细胞既分裂又分化,而动物细胞培养程,但植物组织培养过程中细胞既分裂又分化,而动物细胞培养 过程中细胞只分裂不分化。过程中细胞只分裂不分化。 (2)植物组织培养可获得新个体,体现了细胞的全能性,而动植物组织培养可获得新个体,体现了细胞的全能性,而动 物细胞培养只能得到细胞,没有体现细胞的全能性。物细胞培养只能得到细胞,没有体现细胞的
13、全能性。 (3)植物组织培养中需要加入植物激素等促生长因子,而动物植物组织培养中需要加入植物激素等促生长因子,而动物 细胞培养基中需要加入血清、血浆。细胞培养基中需要加入血清、血浆。 动物体细胞核移植技术和克隆动物动物体细胞核移植技术和克隆动物 1动物核移植概念动物核移植概念 (1)供体:动物一个细胞的供体:动物一个细胞的_。 (2)受体:去掉细胞核的受体:去掉细胞核的_。 (3)结果:形成重组胚胎,发育成结果:形成重组胚胎,发育成_。 2类型类型 胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植 _ 细胞核细胞核 卵母细胞卵母细胞 动物个体动物个体 体细胞核移植体细胞核移植 3体细胞核移植的过程体细胞核移植的过
14、程 4体细胞核移植的应用前景体细胞核移植的应用前景 (1)畜牧生产方面:加速家畜畜牧生产方面:加速家畜_进程,促进进程,促进_ _。 (2)保护濒危物种方面:增加动物的保护濒危物种方面:增加动物的_。 (3)医药卫生领域:转基因动物作为医药卫生领域:转基因动物作为_,生产医,生产医 用蛋白。用蛋白。 (4)治疗人类疾病:转基因克隆动物细胞、组织和器官作为治疗人类疾病:转基因克隆动物细胞、组织和器官作为 _的供体等。的供体等。 遗传改良遗传改良 优良畜优良畜 群繁育群繁育 存活数量存活数量 生物反应器生物反应器 异种移植异种移植 5体细胞核移植技术存在的问题体细胞核移植技术存在的问题 (1)体细
15、胞核移植技术的体细胞核移植技术的_非常低。非常低。 (2)克隆动物存在健康问题,表现出克隆动物存在健康问题,表现出_缺陷、遗传缺陷缺陷、遗传缺陷 等。等。 (3)克隆动物食品的克隆动物食品的_问题存在争议。问题存在争议。 成功率成功率 生理生理 安全性安全性 1动物核移植技动物核移植技术的理论基础术的理论基础(原理原理)是什么?克隆动物属于是什么?克隆动物属于 有性生殖还是无性繁殖?有性生殖还是无性繁殖? 提示:提示:动物细胞核的全能性。无性繁殖。动物细胞核的全能性。无性繁殖。 2为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难?为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难? 提示:提示:由于动物胚胎细胞
16、分化程度低,恢复其全能性相对由于动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对 容易;而动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难。因容易;而动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难。因 此动物体细胞核移植的难此动物体细胞核移植的难度就明显高于胚胎细胞核移植。度就明显高于胚胎细胞核移植。 3用于核移植的供体细胞一般都选用传代用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,代以内的细胞, 这是为什么?这是为什么? 提示:提示:培养的动物细胞一般当传代至培养的动物细胞一般当传代至1050代左右时,部分代左右时,部分 细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而细胞核型可能会发生变化,其
17、细胞遗传物质可能会发生突变,而 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 4在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必 须先去掉受体卵母细胞的细胞核?须先去掉受体卵母细胞的细胞核? 提示:提示:为使核移植的胚胎或动物的细胞核内的遗传物质全为使核移植的胚胎或动物的细胞核内的遗传物质全 部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。 5通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体 动物进行了动物进行了100%复制吗?
18、为什么?复制吗?为什么? 提示:提示:不是。绝大部分不是。绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外来自于供体细胞核,但其核外 还有少量的还有少量的DNA,即线粒体中的,即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞;是来自于受体卵母细胞; 其次生物的性状还受环境的影响。其次生物的性状还受环境的影响。 1核移植分析核移植分析 (1)原理:动物细胞核的全能性,而不是动物细胞的全能性。原理:动物细胞核的全能性,而不是动物细胞的全能性。 因动物体细胞的全能性受到限制,不能经培养直接发育成完整个因动物体细胞的全能性受到限制,不能经培养直接发育成完整个 体。所以用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞体
19、。所以用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞 的细胞核具有全能性。的细胞核具有全能性。 (2)供体和受体的选择:供体和受体的选择: 供体:一般选用传代供体:一般选用传代10代以内的细胞,因为代以内的细胞,因为10代以内的细胞代以内的细胞 一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。 受体:减受体:减中期的卵母细胞。一方面细胞大,易于操中期的卵母细胞。一方面细胞大,易于操 作;卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养。另一方面作;卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养。另一方面 此时具备受精能力,细胞质中含有能刺激
20、融合后重组细胞进此时具备受精能力,细胞质中含有能刺激融合后重组细胞进 行分裂分化并形成重组胚胎的物质。行分裂分化并形成重组胚胎的物质。 特别提醒特别提醒 核移植技术的供体细胞不能选择生殖细胞核移植技术的供体细胞不能选择生殖细胞 的细胞核,因为生殖细胞与正常体细胞相比,遗传物质是减的细胞核,因为生殖细胞与正常体细胞相比,遗传物质是减 半的。半的。 2克隆动物的遗传特点克隆动物的遗传特点 (1)克隆动物的性状与细胞核供体生物的性状基本相同,但克隆动物的性状与细胞核供体生物的性状基本相同,但 不完全相同,因为:不完全相同,因为: 克隆动物的细胞质遗传物质来自于受体卵母细胞的细胞克隆动物的细胞质遗传物
21、质来自于受体卵母细胞的细胞 质。质。 生物的性状不仅与遗传物质有关,还受环境的影响。生物的性状不仅与遗传物质有关,还受环境的影响。 (2)核移植过程中细胞核只来自于一个个体,因此核遗传物核移植过程中细胞核只来自于一个个体,因此核遗传物 质与供体的相同,属于无性繁殖,不会改变生物体的基因型。质与供体的相同,属于无性繁殖,不会改变生物体的基因型。 例例1 (浙江高考浙江高考)实验小鼠皮肤细胞培养实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养非克隆培养)的基的基 本过程如下图所示。下列叙述错误的是本过程如下图所示。下列叙述错误的是 ( ) 实验实验 小鼠小鼠 甲甲 皮肤皮肤 组织组织 乙乙 皮肤皮肤 细胞细胞 丙
22、丙 培养培养 细胞细胞1 丁丁 培养培养 细胞细胞2 以流程图为载体,考查动物细胞培养的过程以流程图为载体,考查动物细胞培养的过程 A甲过程需要对实验小鼠进行消毒甲过程需要对实验小鼠进行消毒 B乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化 C丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型 D丁过程得到的细胞具有异质性丁过程得到的细胞具有异质性 思路点拨思路点拨 精讲精析精讲精析 动物细胞培养需要无毒、无菌的环境,甲过程动物细胞培养需要无毒、无菌的环境,甲过程 指从实验小鼠身上取下皮肤组织,该过程需要对小鼠进行消毒指从实验小鼠身上取下皮肤组织,该过程需要
23、对小鼠进行消毒 处理;乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成细处理;乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成细 胞悬液,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理;丙过程表示原胞悬液,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理;丙过程表示原 代培养,此时的细胞仍能保持正常的二倍体核型;丁过程表示代培养,此时的细胞仍能保持正常的二倍体核型;丁过程表示 通过选择或纯化从细胞系中获得具有特殊性质的细胞株的过通过选择或纯化从细胞系中获得具有特殊性质的细胞株的过 程,此过程得到的细胞具有异质性。程,此过程得到的细胞具有异质性。 答案答案 C (1)胰蛋白酶或胶原蛋白酶的作用:整个培养过程中两次使用胰蛋白酶或胶
24、原蛋白酶的作用:整个培养过程中两次使用 胰蛋白酶或胶原蛋白酶,第一次使用的目的是使组织细胞分散胰蛋白酶或胶原蛋白酶,第一次使用的目的是使组织细胞分散 开,第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来,便于分装后开,第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来,便于分装后 继续培养。继续培养。 (2)细胞株与细胞系的判断:从内在原因看是遗传物质是否发细胞株与细胞系的判断:从内在原因看是遗传物质是否发 生改变,从外在表现看是生改变,从外在表现看是是否具有无限增殖能力。细胞系细胞遗是否具有无限增殖能力。细胞系细胞遗 传物质发生了改变,具有无限增殖能力。传物质发生了改变,具有无限增殖能力。 1在动物细胞培养过
25、程中,出现遗传物质改变的细胞是在动物细胞培养过程中,出现遗传物质改变的细胞是 ( ) A细胞系细胞系 B细胞株细胞株 C原代细胞原代细胞 D传代细胞传代细胞 解析:解析:细胞培养时细胞在传至细胞培养时细胞在传至1050代左右后,增殖会逐渐代左右后,增殖会逐渐 缓慢,这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化,这时的细缓慢,这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化,这时的细 胞为细胞系。胞为细胞系。 答案:答案:A 以流程图为载体,综合考查动物细胞核移植以流程图为载体,综合考查动物细胞核移植 技术与克隆技术与克隆 例例2 下面是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的下面是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿
26、病的 过程图解。请据图回答下列问题:过程图解。请据图回答下列问题: (1)图中图中所示的结构名称是所示的结构名称是_。 (2)图中图中所示的生物技术名称分别是所示的生物技术名称分别是_、_。 (3)过程过程通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积 大、易操作、营养物质丰富外,还因为它大、易操作、营养物质丰富外,还因为它_ _。 (4)过程过程通常用通常用作为受体细胞的原因是作为受体细胞的原因是_ _。 (5)图示方法与一般的异体核移植相比最大的优点是图示方法与一般的异体核移植相比最大的优点是 _,该种基因治疗所属类型为,该种基因治疗所属类
27、型为_。 思路点拨思路点拨 (6)若用图中若用图中所示技术得到能产生人生长激素的高产所示技术得到能产生人生长激素的高产 奶牛,则该奶牛从生殖方式上看属于奶牛,则该奶牛从生殖方式上看属于_(填填“有性生有性生 殖殖”或或“无性生殖无性生殖”)。 精讲精析精讲精析 (1)是从供体是从供体(患者患者)体细胞分离出的细胞核。体细胞分离出的细胞核。 (2)表示核移植技术,表示核移植技术,表示转基因技术。表示转基因技术。(3)核移植的受体细胞核移植的受体细胞 一般是卵母细胞,原因是它体积大、易操作,含有供胚胎发育的一般是卵母细胞,原因是它体积大、易操作,含有供胚胎发育的 营养物质,它还含有促进细胞核全营养
28、物质,它还含有促进细胞核全能性表达的物质。能性表达的物质。(4)早期胚胎早期胚胎 中的细胞分化程度低,全能性高,可诱导分化成各种组织器官。中的细胞分化程度低,全能性高,可诱导分化成各种组织器官。 (5)图示培育出的细胞图示培育出的细胞(胰岛胰岛B细胞细胞)核遗传物质来自患者本人,所核遗传物质来自患者本人,所 以移植后不发生免疫排斥反应;图中所示基因治疗是体外转基以移植后不发生免疫排斥反应;图中所示基因治疗是体外转基 因,故所属类型为体外基因治疗。因,故所属类型为体外基因治疗。(6)体细胞核移植没有经过两性体细胞核移植没有经过两性 生殖细胞的结合,所以从生殖方式上看属于无性生殖。生殖细胞的结合,
29、所以从生殖方式上看属于无性生殖。 答案答案 (1)细胞核细胞核 (2)核移植技术核移植技术 转基因技术转基因技术(或基因工程、或基因工程、DNA 重组技术、基重组技术、基 因拼接技术因拼接技术) (3)含有促进细胞核全能性表达的物质含有促进细胞核全能性表达的物质 (4)这些细胞分化程度极低,具有全能性,可以定向地诱导分化这些细胞分化程度极低,具有全能性,可以定向地诱导分化 为各类细胞为各类细胞 (5)没有免疫排斥反应没有免疫排斥反应 体外基因治疗体外基因治疗 (6)无性生殖无性生殖 判断有性生殖与无性生殖的方法判断有性生殖与无性生殖的方法 (1)从概念上判断: 有性生殖是经两性生殖细胞结合而成
30、的合从概念上判断: 有性生殖是经两性生殖细胞结合而成的合 子发育成个体的生殖方式。无性生殖是指不经过两性生殖细胞的子发育成个体的生殖方式。无性生殖是指不经过两性生殖细胞的 结合由亲本直接产生子代的生殖方式。结合由亲本直接产生子代的生殖方式。 (2)从培养细胞的种类上判断: 组织培养中培养的是生殖细胞从培养细胞的种类上判断: 组织培养中培养的是生殖细胞 时,属于有性生殖;组织培养中培养的是体细胞、组织或器官时,时,属于有性生殖;组织培养中培养的是体细胞、组织或器官时, 属于无性生殖。植物体细胞杂交和动物细胞核移植都属于无性生属于无性生殖。植物体细胞杂交和动物细胞核移植都属于无性生 殖。殖。 2右
31、图为哺乳动物右图为哺乳动物(羊羊)的生殖过程,下列叙的生殖过程,下列叙 述述不不 正确的是正确的是 ( ) A个体个体 2 为克隆动物,为克隆动物,c 为高度分化的为高度分化的 体细胞体细胞 B个体个体 2 的遗传性状与提供的遗传性状与提供 c 细胞的羊细胞的羊 不完全相同不完全相同 C产生动物个体产生动物个体 1 与动物个体与动物个体 2 的生殖方式是不同的的生殖方式是不同的 De 细胞为完成减数分裂的卵细胞细胞为完成减数分裂的卵细胞 解析:解析:在核移植过程中,去核卵细胞一般选用处于减数第二次分在核移植过程中,去核卵细胞一般选用处于减数第二次分 裂中期的次级卵母细胞,而不是完成减数分裂的卵
32、细胞。裂中期的次级卵母细胞,而不是完成减数分裂的卵细胞。 答案:答案:D 课堂回扣练习课堂回扣练习 1动物细胞培养过程的顺序是动物细胞培养过程的顺序是 ( ) 原代培养原代培养 传代培养传代培养 胰蛋白酶处理组织, 形成单个细胰蛋白酶处理组织, 形成单个细 胞,制成细胞悬液胞,制成细胞悬液 A B C D 解析:解析: 动物细胞培养是用动物胚胎或幼龄动物器官通过胰蛋白酶动物细胞培养是用动物胚胎或幼龄动物器官通过胰蛋白酶 处理制成细胞悬液,再通过原代培养和传代培养得到细胞株。处理制成细胞悬液,再通过原代培养和传代培养得到细胞株。 答案:答案:D 2下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述下列对哺乳动
33、物体细胞核移植技术的描述不不 正确的是正确的是( ) A该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植 B通常采用减数第二次分裂期卵母细胞作为受体细胞通常采用减数第二次分裂期卵母细胞作为受体细胞 C可通过显微操作法除去卵母细胞核可通过显微操作法除去卵母细胞核 D克隆动物是对提供体细胞的动物进行了完全复制克隆动物是对提供体细胞的动物进行了完全复制 解析:解析:克隆动物绝大部分遗传物质来自供体细胞核,但细胞克隆动物绝大部分遗传物质来自供体细胞核,但细胞 质内的遗传物质来自受体卵母细胞,其次生物的性状还受质内的遗传物质来自受体卵母细胞,其次生物的性状还受环环 境的影响,因此,克
34、隆动物并不是对提供体细胞的动物进行境的影响,因此,克隆动物并不是对提供体细胞的动物进行 完全复制。完全复制。 答案:答案:D 3下列不属于动物细胞工程应用的是下列不属于动物细胞工程应用的是 ( ) A大规模生产干扰素,用于抵抗病毒引起的感染大规模生产干扰素,用于抵抗病毒引起的感染 B为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞 C大规模生产食品添加剂、香料等大规模生产食品添加剂、香料等 D利用核移植技术,加快优良种畜的繁殖利用核移植技术,加快优良种畜的繁殖 解析:解析:大规模生产食品添加剂、香料等属于植物细胞工程大规模生产食品添加剂、香料等属于植物细胞工程 的应用。
35、的应用。 答案:答案:C 4乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后,这个卵细胞经过乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后,这个卵细胞经过 多次分裂发育成重组胚胎,再植入丙马的子宫内发育,结果多次分裂发育成重组胚胎,再植入丙马的子宫内发育,结果 产下一匹小马。下列叙述正确的是产下一匹小马。下列叙述正确的是 ( ) A直接在体外对甲马的直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎体细胞进行诱导也能培养出胚胎 B小马的性状与甲马完全相同小马的性状与甲马完全相同 C此项技术可用于保护濒危物种此项技术可用于保护濒危物种 D该过程可以很好地证明动物细胞的全能性该过程可以很好地证明动物细胞的全能性 解析:解析
36、:克隆过程中细胞质遗传物质来自一方,而细胞核中遗传物质克隆过程中细胞质遗传物质来自一方,而细胞核中遗传物质 来自另一方,所以小马的性状与甲马不完全一致。该过程只能说明来自另一方,所以小马的性状与甲马不完全一致。该过程只能说明 动物细胞核具有全能性,而不能证明动物细胞的全能性。动物细胞核具有全能性,而不能证明动物细胞的全能性。 答案:答案:C 5某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物 对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞 为肝肿瘤细胞、乙细胞为正常肝细胞。
37、请回答下列有关动物细为肝肿瘤细胞、乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细 胞培养的问题:胞培养的问题: (1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养 液及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比液及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比 乙细胞数量乙细胞数量_。 (2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其 原因是原因是_。 细胞培养应在含细胞培养应在含 5%CO2的恒温培养箱中进行,的恒温培养箱中进行,CO2的作用是的作用是 _。 (3)
38、在两种细胞生长过程中, 当乙细胞铺满瓶壁时, 其生长在两种细胞生长过程中, 当乙细胞铺满瓶壁时, 其生长_。 药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞传代药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞传代 的次数更的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用 _处理。处理。 (4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染, 可向培养液中加入适量的为了防止细胞培养过程中细菌的污染, 可向培养液中加入适量的 _。 (5)已知癌基因已知癌基因 X 过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种 抗肿
39、瘤药物抗肿瘤药物 Y 对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为 A、B 两组,两组, A 组细胞培养液中加入组细胞培养液中加入_,B 组细胞培养液中加入无菌生理组细胞培养液中加入无菌生理 盐水,经培养后,从盐水,经培养后,从 A、B 两组收集等量细胞,通过分别检测两组收集等量细胞,通过分别检测 X 基基 因在因在 A、B 两组细胞中的两组细胞中的_或或_合成水平的差异,确合成水平的差异,确 定定 Y 的药效。的药效。 解析:解析:(1)甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。肿瘤细胞甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。肿瘤细胞 为无限增殖的细胞,细胞周期短。在相
40、同条件下,培养相同的时为无限增殖的细胞,细胞周期短。在相同条件下,培养相同的时 间,甲细胞的数量多于乙细胞。间,甲细胞的数量多于乙细胞。(2)动物细胞培养液中必须加入动动物细胞培养液中必须加入动 物血清,血清中含有清蛋白、生长因子、促进细胞贴壁的因子、物血清,血清中含有清蛋白、生长因子、促进细胞贴壁的因子、 激素等合成培养基中缺乏的物质。大多数细胞培养液所需激素等合成培养基中缺乏的物质。大多数细胞培养液所需 pH 为为 7.27.4,而多数培养液靠碳酸氢钠,而多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与与 CO2体系进行缓体系进行缓 冲, 所以冲, 所以 CO2的作用是维持培养液的作用是维持培养液
41、pH。 (3)甲为肿瘤细胞能无限增甲为肿瘤细胞能无限增 殖,传代的次数要比乙细胞多,乙细胞殖,传代的次数要比乙细胞多,乙细胞(正常肝细胞正常肝细胞)在培养瓶中贴在培养瓶中贴 壁生长,当铺满瓶壁时,生长停止。为得到更多的肝细胞,需要壁生长,当铺满瓶壁时,生长停止。为得到更多的肝细胞,需要 定期地用胰蛋白酶使细胞脱离瓶壁,进行传代培养。定期地用胰蛋白酶使细胞脱离瓶壁,进行传代培养。 (4)培养液中加入抗生素可抑制和杀灭微生物,但对动物细胞没培养液中加入抗生素可抑制和杀灭微生物,但对动物细胞没 有影响。有影响。(5)设计一组加入抗癌药物的实验组,一组不加药物的设计一组加入抗癌药物的实验组,一组不加药物的 对照组,通过检测药物影响对照组,通过检测药物影响 X 基因的表达过程,即转录形成基因的表达过程,即转录形成 mRNA、翻译形成蛋白质的量来检验药效。、翻译形成蛋白质的量来检验药效。 答案:答案: (1)多多 (2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持维持 培养液培养液 pH (3)停止停止 多多 胰蛋白酶胰蛋白酶 (4)抗生素抗生素 (5)Y mRNA 蛋白质蛋白质 课下综合检测见课时跟踪检测课下综合检测见课时跟踪检测(七七)