1、理解理解 教材新知教材新知 把握把握 命题热点命题热点 应用应用 落实体验落实体验 课下综合检测课下综合检测 课堂回扣练习课堂回扣练习 命题点一命题点一 命题点二命题点二 知识点一知识点一 知识点二知识点二 2 22 2 动物动物 细胞细胞 工程工程 专专 题题 2 2 2 22.2. 2 2 22 动物细胞工程动物细胞工程 22.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体 1动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个 动物细胞结合形成一个细胞的过程。动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇动物细胞融合常用的诱导因
2、素有聚乙二醇 (PEG)、灭活的病毒、电激等。、灭活的病毒、电激等。 3动物细胞融合的主要用途是制备单克隆抗体。动物细胞融合的主要用途是制备单克隆抗体。 4杂交瘤细胞是由经免疫的杂交瘤细胞是由经免疫的 B 淋巴细胞和骨髓瘤淋巴细胞和骨髓瘤 细胞融合而成的,具有既能无限增殖又能产生细胞融合而成的,具有既能无限增殖又能产生 专一抗体的能力。专一抗体的能力。 5单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度 高,并可大量制备。高,并可大量制备。 6单克隆抗体的主要用途有:作为诊断试剂、用单克隆抗体的主要用途有:作为诊断试剂、用 于治疗疾病和运载药物。于治疗疾病和运载
3、药物。 动物细胞融合动物细胞融合 (1)概念:是指概念:是指_动物细胞结合形成动物细胞结合形成_ 的过程,也称的过程,也称_。 (2)原理:原理:_。 (3)结果:形成结果:形成_细胞。细胞。 (4)诱导因素:诱导因素:_ (PEG)、_、电电 激等。激等。 两个或多个两个或多个 一个细胞一个细胞 细胞杂交细胞杂交 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 杂交杂交 聚乙二醇聚乙二醇 灭活的病毒灭活的病毒 (5)应用:应用: 研究研究_、细胞免疫、肿瘤和生物、细胞免疫、肿瘤和生物_等等 的重要手段。的重要手段。 制备制备_。 (6)意义:克服了意义:克服了_的不亲和性。的不亲和性。 细胞遗传细胞遗传 新品
4、种培育新品种培育 单克隆抗体单克隆抗体 远缘杂交远缘杂交 1植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同?植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同? 提示:提示:灭活的病毒是动物细胞融合常用的诱导方法,植物体灭活的病毒是动物细胞融合常用的诱导方法,植物体 细胞杂交不用此方法。细胞杂交不用此方法。 植物细胞融合过程中,首先要除去细胞壁,制备原生质体,植物细胞融合过程中,首先要除去细胞壁,制备原生质体, 而动物细胞无细胞壁,可直接诱导融合。而动物细胞无细胞壁,可直接诱导融合。 2细胞融合的实质是什么?动物细胞融合完成的标志是什细胞融合的实质是什么?动物细胞融合完成的标志是什 么?么? 提示
5、:提示: 细胞融合的实质是核融合。 动物细胞融合完成的标志细胞融合的实质是核融合。 动物细胞融合完成的标志 是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。 1动物细胞融合动物细胞融合 (1)操作步骤:操作步骤: 细胞准备细胞准备 贴壁:直接将两亲本细胞混合培养贴壁:直接将两亲本细胞混合培养 悬浮:制成一定浓度的细胞悬液悬浮:制成一定浓度的细胞悬液 细胞融合:加促融因子于待融合的细胞之中,诱导融合细胞融合:加促融因子于待融合的细胞之中,诱导融合 杂种细胞选择:利用选择性培养基等,使亲本细胞死亡,而杂种细胞选择:利用选择性培养基等,使亲本细胞死亡,而 让杂种细胞存活让杂种
6、细胞存活 杂种细胞克隆:对选出的杂种细胞进行克隆,经过培养,就杂种细胞克隆:对选出的杂种细胞进行克隆,经过培养,就 能获得所需要的细胞能获得所需要的细胞 (2)过程分析:过程分析: 细胞融合的过程包括细胞膜融合、 细胞质融合和细胞核细胞融合的过程包括细胞膜融合、 细胞质融合和细胞核 融合, 其中细胞膜融合是细胞融合的先导, 在细胞膜融合中融合, 其中细胞膜融合是细胞融合的先导, 在细胞膜融合中 体现出细胞膜具有一定的流动性。体现出细胞膜具有一定的流动性。 2植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目比较项目 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞
7、融合 原理原理 细胞膜的流动性、细胞的全细胞膜的流动性、细胞的全 能性能性 细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、 细胞的增殖细胞的增殖 融合前处理融合前处理 先除去细胞壁先除去细胞壁 先使细胞分散开先使细胞分散开 使用的酶使用的酶 纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 诱导手段诱导手段 物理法:离心、电激、振动物理法:离心、电激、振动 化学法:聚乙二醇等试剂诱化学法:聚乙二醇等试剂诱 导导 除物理法和化学法除物理法和化学法 外,也可用灭活的外,也可用灭活的 病毒诱导病毒诱导 比较项目比较项目 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞融合 过程过程 细胞细胞 A、B 去壁去壁
8、 原生质体原生质体 A、B 融合融合 融合的原生质体融合的原生质体 再生出再生出 细胞壁细胞壁 杂种细胞杂种细胞 植物组植物组 织培养织培养 杂种植株杂种植株 细胞细胞 A、B 融合融合 杂交细胞杂交细胞 有丝分裂有丝分裂 多个相同杂交细胞多个相同杂交细胞 比较项目比较项目 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞融合 结果结果 杂种植株杂种植株 杂交细胞杂交细胞 应用应用 培育植物新品种培育植物新品种 主要用于制备单克隆抗体主要用于制备单克隆抗体 意义意义 克服了远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖克服了远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖 隔离,扩展了杂交的亲本组合隔离,扩展了杂交的亲本
9、组合 特别提醒特别提醒 (1)动物细胞核融合发生在杂种细胞的有丝分裂过程中。动物细胞核融合发生在杂种细胞的有丝分裂过程中。 (2)灭活的病毒只适用于动物细胞融合。灭活的病毒只适用于动物细胞融合。 单克隆抗体单克隆抗体 1传统抗体的获得传统抗体的获得 (1)方法方法 向动物体内注射向动物体内注射_,使之产生抗体,使之产生抗体 从动物从动物_中分离抗体中分离抗体 (2)缺点:产量低、缺点:产量低、_低、低、_差。差。 血清血清 抗原抗原 纯度纯度 特异性特异性 2单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备 (1)过程:过程: 妙学妙记妙学妙记 记忆单克隆抗体制备过程的记忆单克隆抗体制备过程的“122”: “
10、一融合,二筛选,二培养一融合,二筛选,二培养”,即一次融合,两次筛选,即一次融合,两次筛选, 两种培养方式。两种培养方式。 (2)杂交瘤细胞的特点:杂交瘤细胞的特点: 既能迅速既能迅速_,又能产生,又能产生_。 3单克隆抗体的优点单克隆抗体的优点 (1)_。 (2)_。 (3)可大量制备。可大量制备。 大量繁殖大量繁殖 专一的抗体专一的抗体 特异性强特异性强 灵敏度高灵敏度高 4单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用 (1)作为作为_,具有准确、高效、简易、快速,具有准确、高效、简易、快速 的优点。的优点。 (2)用于用于_和和_。 诊断试剂诊断试剂 治疗疾病治疗疾病 运载药物运载药物 根据上面单克
11、隆抗体的制备过程思考下列问题:根据上面单克隆抗体的制备过程思考下列问题: (1)为什么要对小鼠注射抗原?为什么要对小鼠注射抗原? 提示:提示:以获得能产生相应抗体的以获得能产生相应抗体的B淋巴细胞淋巴细胞(浆细胞浆细胞)。 诱导融合的诱导融合的B淋巴细胞是经免疫产生的淋巴细胞是经免疫产生的B淋巴细胞,未经免淋巴细胞,未经免 疫的疫的B淋巴细胞不能产生抗体。淋巴细胞不能产生抗体。 (2)制备单克隆抗体时,为什么要选用制备单克隆抗体时,为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤淋巴细胞和骨髓瘤 细胞融合形成杂交瘤细胞?细胞融合形成杂交瘤细胞? 提示:提示:每一个每一个B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体,但不能淋巴
12、细胞能分泌一种特异性抗体,但不能 无限增殖;骨髓瘤细胞可大量快速增殖,却不能产生抗体。将无限增殖;骨髓瘤细胞可大量快速增殖,却不能产生抗体。将 两种细胞融合形成的杂交瘤细胞,既能产生特异性抗体又能快两种细胞融合形成的杂交瘤细胞,既能产生特异性抗体又能快 速增殖。速增殖。 (3)细胞融合后会得到哪些杂交细胞?我们需要的是哪种杂交细胞融合后会得到哪些杂交细胞?我们需要的是哪种杂交 细胞?细胞? 提示:提示:融合后形成的杂交细胞有多种,若仅考虑细胞两两融融合后形成的杂交细胞有多种,若仅考虑细胞两两融 合的情况,融合细胞有三种,即两个合的情况,融合细胞有三种,即两个B淋巴细胞的融合细胞、两淋巴细胞的融
13、合细胞、两 个骨髓瘤细胞的融合细胞、一个个骨髓瘤细胞的融合细胞、一个B淋巴细胞与一个骨髓瘤细胞的淋巴细胞与一个骨髓瘤细胞的 融合细胞。其中最后一种是我们需要的。融合细胞。其中最后一种是我们需要的。 1血清抗体与单克隆抗体的比较血清抗体与单克隆抗体的比较 名称名称 产生产生 特点特点 血清抗体血清抗体 由由B淋巴细淋巴细 胞分泌胞分泌 一般从血清中分离,产量低、纯度一般从血清中分离,产量低、纯度 低、特异性差低、特异性差 单克隆抗体单克隆抗体 由杂交瘤由杂交瘤 细胞分泌细胞分泌 特异性强、灵敏度高,能大量制备特异性强、灵敏度高,能大量制备 2.制备单克隆抗体过程中的两次筛选制备单克隆抗体过程中的
14、两次筛选 (1)第一次筛选:从多种融合细胞中用选择性培养基筛选第一次筛选:从多种融合细胞中用选择性培养基筛选 出杂交瘤细胞。因为细胞融合是随机的,融合形成的融合细出杂交瘤细胞。因为细胞融合是随机的,融合形成的融合细 胞有多种,还有未融合的细胞,因此必须从中筛选出由胞有多种,还有未融合的细胞,因此必须从中筛选出由B淋淋 巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞。巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞。 (2)第二次筛选:将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞第二次筛选:将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞 培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取
15、免疫过 的的B淋巴细胞时会取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多淋巴细胞时会取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多 种,所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。种,所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。 例例1 下图所示为细胞融合技术的一些过程:下图所示为细胞融合技术的一些过程: (1)从从A细胞和细胞和B细胞到细胞到C细胞的过程中,采用的方法中与诱导细胞的过程中,采用的方法中与诱导 植物原生质体融合不同的是植物原生质体融合不同的是_处理。处理。 结合植物体细胞杂交技术,考查动物细胞融合结合植物体细胞杂交技术,考查动物细胞融合 (2)若若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞,那么这样的细细胞为单倍体烟草植
16、物的体细胞,那么这样的细 胞已经用酶降解脱掉了胞已经用酶降解脱掉了_。这种酶可能是。这种酶可能是_、 _,由此生成的细胞经培养形成的细胞团称为,由此生成的细胞经培养形成的细胞团称为_。 (3)若若A、B分别是基因型为分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花两个烟草品种的花 粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性 纯合基因纯合基因(rr或或hh)的作用,在光照强度大于的作用,在光照强度大于800 lx时都不能生时都不能生 长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种
17、细的杂种细 胞,较为简便的筛选方法是胞,较为简便的筛选方法是_ _。 (4)若将基因型为若将基因型为AaBB的番茄细胞与基因型为的番茄细胞与基因型为AAbb的番茄的番茄 细胞融合,由融合细胞培养成的愈伤组织细胞的基因型是细胞融合,由融合细胞培养成的愈伤组织细胞的基因型是_ _。 (5)若若A、B分别为骨髓瘤细胞和分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,则淋巴细胞,则D细胞的特细胞的特 点是点是_。 由由D细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有_ _的特点。生产上一般不能通过直接培养的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的淋巴细胞的 方法生产单克隆抗体的主要
18、原因是方法生产单克隆抗体的主要原因是_ _。 (6)若将染色体组成为若将染色体组成为2AXX的人细胞与染色体组成为的人细胞与染色体组成为2B XX的鼠细胞融合,培育成的人的鼠细胞融合,培育成的人鼠细胞的染色体组成是鼠细胞的染色体组成是 _。 思路点拨思路点拨 精讲精析精讲精析 (1)动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。 (2)植物细胞有细胞壁,若植物细胞有细胞壁,若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞,那细胞为单倍体烟草植物的体细胞,那 么这样的细胞已经用纤维素酶和果胶酶脱掉了细胞壁;植物体细胞杂交获么这样的细胞已经用纤维素酶和果胶酶脱掉了
19、细胞壁;植物体细胞杂交获 得的杂种细胞,经脱分化形成愈伤组织。得的杂种细胞,经脱分化形成愈伤组织。 (3)A是基因型为是基因型为Hhrr的烟草的花粉,故其基因型为的烟草的花粉,故其基因型为Hr、hr,B是基因是基因 型为型为hhRr的烟草的花粉,故其基因型为的烟草的花粉,故其基因型为hR、hr,因此经细胞融合可能形,因此经细胞融合可能形 成的融合细胞有:成的融合细胞有:HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr、HhRr,共,共6种。种。 分析这分析这6种细胞除可知,除种细胞除可知,除HhRr之外均有一对隐性纯合基因之外均有一对隐性纯合基因(rr或或hh),即,即 在光照强度大于在光照强
20、度大于800 lx时都不能生长,因此获取基因型为时都不能生长,因此获取基因型为HhRr的杂种细的杂种细 胞,较为简便的筛选方法是给予大于胞,较为简便的筛选方法是给予大于800 lx的光照。的光照。 (4)、(6)细胞融合后的染色体或基因分别是两种细胞的染色细胞融合后的染色体或基因分别是两种细胞的染色 体或基因累加。体或基因累加。 (5)A、B分别为骨髓瘤细胞和分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,则淋巴细胞,则D细胞为杂交细胞为杂交 瘤细胞,其特点是既能无限繁殖,又能产生特定的抗体。产生瘤细胞,其特点是既能无限繁殖,又能产生特定的抗体。产生 的抗体为单克隆抗体,同血清抗体相比,它具有特异性强、灵的抗体
21、为单克隆抗体,同血清抗体相比,它具有特异性强、灵 敏度高、可大量制备等特点。生产上一般不能通过直接培养敏度高、可大量制备等特点。生产上一般不能通过直接培养B淋淋 巴细胞来制备单克隆抗体是因为巴细胞来制备单克隆抗体是因为B淋巴细胞已高度分化,不能增淋巴细胞已高度分化,不能增 殖。殖。 答案答案 (1)灭活的病毒灭活的病毒 (2)细胞壁细胞壁 纤维素酶纤维素酶 果胶酶果胶酶 愈伤组织愈伤组织 (3)给予大于给予大于800 lx的光照的光照 (4)AAAaBBbb (5)既能无限增殖,又能产生特定的抗体既能无限增殖,又能产生特定的抗体 特异性强、灵特异性强、灵 敏度高、可大量制备敏度高、可大量制备
22、B淋巴细胞已高度分化,不能增殖淋巴细胞已高度分化,不能增殖 (6)2A2B2X2X 生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源 (1)转基因生物:目的基因来自外源生物,绝大多数基因来自转基因生物:目的基因来自外源生物,绝大多数基因来自 两个亲本。两个亲本。 (2)植物组织培养获得的植物:遗传物质只来自一个亲本。植物组织培养获得的植物:遗传物质只来自一个亲本。 (3)杂种植株:遗传物质来自融合的两个亲本细胞。杂种植株:遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (4)经细胞培养获得的动物细胞:遗传物质只来自一个亲本。经细胞培养获得的动物细胞:遗传物质只来自一个
23、亲本。 (5)动物细胞融合形成的杂交细胞:遗传物质来自融合的两个动物细胞融合形成的杂交细胞:遗传物质来自融合的两个 亲本细胞。亲本细胞。 (6)克隆动物:细胞核中的遗传物质来自供体动物,细胞质中克隆动物:细胞核中的遗传物质来自供体动物,细胞质中 的遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。的遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。 以流程图的形式考查单克隆抗体的制备过程以流程图的形式考查单克隆抗体的制备过程 例例2 (重庆高考重庆高考)下面是单克隆抗体制备流程的简明示意下面是单克隆抗体制备流程的简明示意 图。下列有关叙述,正确的是图。下列有关叙述,正确的是 ( ) A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应是从
24、已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞淋巴细胞 B中中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 思路点拨思路点拨 精讲精析精讲精析 本题考查动物细胞工程中的制备单克隆抗体。本题考查动物细胞工程中的制备单克隆抗体。 是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞细胞(浆细胞浆细胞),A项错项错 误;胰蛋白酶可使组织分散为单个细胞,误;胰蛋白酶可使组织分散为单个细胞,B项错误;项错误;
25、为杂交细为杂交细 胞,只有浆细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交细胞,才同时具有胞,只有浆细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交细胞,才同时具有 (效应效应)B淋巴细胞淋巴细胞(可产生抗体可产生抗体)和骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞(可无限增殖可无限增殖)的特的特 性,性,C项错误;项错误;是经筛选后获得的能够分泌特异性抗体的杂交是经筛选后获得的能够分泌特异性抗体的杂交 瘤细胞,瘤细胞,D项正确。项正确。 答案答案 D 课堂回扣练习课堂回扣练习 1与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合的原理及其特有的诱与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合的原理及其特有的诱 导因子分别是导因子分别是 ( ) A细胞膜的流动性、离心细胞膜的
26、流动性、离心 B细胞膜的流动性、灭活的病毒细胞膜的流动性、灭活的病毒 C细胞的全能性、电刺激细胞的全能性、电刺激 D细胞的全能性、灭活的病毒细胞的全能性、灭活的病毒 解析:解析:植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、细胞的全能植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、细胞的全能 性,动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性;动物细胞融合的性,动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性;动物细胞融合的 常用诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等,其中灭活的常用诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等,其中灭活的 病毒是其特有的诱导因子,而聚乙二醇、电激均可用于诱导植病毒是其特有的诱导因子,而聚乙二醇、电激均可用于诱
27、导植 物体细胞杂交。物体细胞杂交。 答案:答案:B 2下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是 ( ) A制备过程中不需要动物细胞培养技术制备过程中不需要动物细胞培养技术 B杂交瘤细胞具有杂交瘤细胞具有B淋巴细胞与癌细胞的所有特点淋巴细胞与癌细胞的所有特点 C经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆 抗体的生产抗体的生产 D单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂 解析:解析:单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与已免疫的单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与已免疫的
28、B淋淋 巴细胞融合,得到杂交瘤细胞,经过选择培养基的筛选并巴细胞融合,得到杂交瘤细胞,经过选择培养基的筛选并 经单一抗体检测后获得所需杂交瘤细胞,培养能产生特定经单一抗体检测后获得所需杂交瘤细胞,培养能产生特定 抗体的杂交瘤细胞即可得到单克隆抗体;杂交瘤细胞能无抗体的杂交瘤细胞即可得到单克隆抗体;杂交瘤细胞能无 限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。 答案:答案:D 3要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无淋巴细胞进行无 性繁殖,形成细胞群。其原因是性繁殖,形成细胞群。其原因是 ( ) A在体外培养条件下在体外培养
29、条件下B淋巴细胞可以无限增殖淋巴细胞可以无限增殖 B在动物体内,每个在动物体内,每个B淋巴细胞可产生多种抗体淋巴细胞可产生多种抗体 C每一个每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应淋巴细胞都参与特异性免疫反应 D每一个每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体但不能大量增殖淋巴细胞只分泌一种特异性抗体但不能大量增殖 解析:解析:B淋巴细胞寿命短,它能够参与特异性免疫,但不淋巴细胞寿命短,它能够参与特异性免疫,但不 一定都参与;一定都参与;B淋巴细胞的免疫具特异性,即每一个淋巴细胞的免疫具特异性,即每一个B淋淋 巴细胞只能产生一种与特定抗原结合的抗体,巴细胞只能产生一种与特定抗原结合的抗体,B淋巴细胞淋巴
30、细胞 为高度分化细胞,不能大量增殖。为高度分化细胞,不能大量增殖。 答案:答案:D 4关于单克隆抗体制备与植物体细胞杂交的说法正确的是关于单克隆抗体制备与植物体细胞杂交的说法正确的是 ( ) A单克隆抗体制备与植物体细胞杂交的基本原理相同单克隆抗体制备与植物体细胞杂交的基本原理相同 B单克隆抗体制备与植物体细胞杂交诱导细胞融合方法相同单克隆抗体制备与植物体细胞杂交诱导细胞融合方法相同 C单克隆抗体制备与植物体细胞杂交在细胞融合前处理过程单克隆抗体制备与植物体细胞杂交在细胞融合前处理过程 相同相同 D单克隆抗体制备与植物体细胞杂交都需要筛选单克隆抗体制备与植物体细胞杂交都需要筛选 解析:解析:植
31、物体细胞杂交的原理为细胞膜的流动性、植物细胞的全能植物体细胞杂交的原理为细胞膜的流动性、植物细胞的全能 性,而单克隆抗体利用的是细胞膜的流动性和细胞增殖;植物体细性,而单克隆抗体利用的是细胞膜的流动性和细胞增殖;植物体细 胞杂交需要先去掉细胞壁后再诱导融合,动物细胞无细胞壁,可直胞杂交需要先去掉细胞壁后再诱导融合,动物细胞无细胞壁,可直 接诱导;单克隆抗体制备与植物体细接诱导;单克隆抗体制备与植物体细胞杂交相比,细胞融合前处理胞杂交相比,细胞融合前处理 方法不同,前者常用胰蛋白酶处理材料,后者常用纤维素酶或果胶方法不同,前者常用胰蛋白酶处理材料,后者常用纤维素酶或果胶 酶处理。酶处理。 答案:
32、答案:D 5(海南高考海南高考)单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒型型(HSV- )可引起水泡性口唇炎。可引起水泡性口唇炎。 利用杂交瘤技术制备出抗利用杂交瘤技术制备出抗HSV- 的单克隆抗体可快速检测的单克隆抗体可快速检测 HSV- 。 回答下列问题:回答下列问题: (1)在制备抗在制备抗HSV- 的单克隆抗体的过程中,先给小鼠注射一的单克隆抗体的过程中,先给小鼠注射一 种纯化的种纯化的HSV- 蛋白,一段时间后,若小鼠血清中抗蛋白,一段时间后,若小鼠血清中抗 _的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了_反反 应,再从小鼠的应,再从小鼠的_中获取中获取B 淋巴细胞。将该
33、淋巴细胞。将该B 淋巴细胞淋巴细胞 与小鼠的与小鼠的_细胞融合,再经过筛选、检测,最终可获细胞融合,再经过筛选、检测,最终可获 得所需的杂交瘤细胞,该细胞具有的特点是得所需的杂交瘤细胞,该细胞具有的特点是_。 (2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射 到小鼠的到小鼠的_中使其增殖,再从中使其增殖,再从_中提取、纯化获得。中提取、纯化获得。 (3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV- 蛋蛋 白,其原因是该抗体具有白,其原因是该抗体具有_和和_等特性。等特性。 解析
34、:解析:(1)给小鼠注射给小鼠注射HSV- 蛋白后,小鼠体内发生体液免疫,蛋白后,小鼠体内发生体液免疫, 小鼠血清中产生抗小鼠血清中产生抗HSV- 蛋白的抗体。蛋白的抗体。B淋巴细胞可从小鼠的淋巴细胞可从小鼠的 淋巴器官中淋巴器官中(如脾、骨髓、扁桃体、胸腺等如脾、骨髓、扁桃体、胸腺等)获取。杂交瘤细胞由获取。杂交瘤细胞由 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而来,具有两个亲本细胞的特性:淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而来,具有两个亲本细胞的特性: 既能无限增殖,又能产生特异性抗体。既能无限增殖,又能产生特异性抗体。 (2)若想获得大量单克隆抗体,通常有两种方法:一是将杂交瘤细若想获得大量单克隆抗体,通常有两
35、种方法:一是将杂交瘤细 胞在动物细胞培养液中培养,然后从动物细胞培养液中筛选分离胞在动物细胞培养液中培养,然后从动物细胞培养液中筛选分离 出单克隆抗体;二是将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其增出单克隆抗体;二是将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其增 殖,然后从小鼠的腹水中提取纯化获得。殖,然后从小鼠的腹水中提取纯化获得。 (3)单克隆抗体具有特异性强、纯度高的特点。单克隆抗体具有特异性强、纯度高的特点。 答案:答案:(1)HSV- 蛋白蛋白 体液免疫体液免疫 脾脏脾脏 骨髓瘤骨髓瘤 无限无限 增殖且产生专一抗体增殖且产生专一抗体 (2)腹腔腹腔 腹水腹水 (3)纯度高纯度高 特异性强特异性强 课下综合检测见课时跟踪检测课下综合检测见课时跟踪检测(八八)