1、肿瘤的生物治疗调动宿主的天然防卫机制调动宿主的天然防卫机制 给予机体某些物质给予机体某些物质肿瘤的生物治疗肿瘤的生物治疗达到抗肿瘤效应达到抗肿瘤效应生物治疗的重要性生物治疗的重要性二十一世纪抗癌药物的发展：二十一世纪抗癌药物的发展：从细胞毒性药物的攻击转向非细胞毒性从细胞毒性药物的攻击转向非细胞毒性 药物调节药物调节生物治疗在非细胞毒性药物中将占重要地位生物治疗在非细胞毒性药物中将占重要地位介绍内容介绍内容 生物治疗的概念生物治疗的概念 生物药品的种类生物药品的种类 生物治疗的地位、原则生物治疗的地位、原则 各类生物药品的介绍各类生物药品的介绍生物反应调节剂的概念生物反应调节剂的概念Biolo
2、gical Response Modifiers,BRMS 天然产生的生物物质天然产生的生物物质 能改变宿主与肿瘤平衡状态的方法能改变宿主与肿瘤平衡状态的方法 与手段与手段生物反应调节剂的作用机制生物反应调节剂的作用机制直接抗瘤作用：干扰细胞生长、转化直接抗瘤作用：干扰细胞生长、转化 或转移或转移激活免疫系统的效应细胞及其所分泌激活免疫系统的效应细胞及其所分泌的因子，达到杀伤与抑制肿瘤的作用的因子，达到杀伤与抑制肿瘤的作用BRMs的概念的概念直接或间接直接或间接宿宿 主主肿肿 瘤瘤+生物反应调节剂的定义生物反应调节剂的定义 （Mitchell 1 Mitchell 1）直接增强宿主抗肿瘤的反应
3、直接增强宿主抗肿瘤的反应 经免疫刺激来增加效应细胞的数量与活性经免疫刺激来增加效应细胞的数量与活性 增加可溶性中介物的生产，如淋巴因子，单核因子增加可溶性中介物的生产，如淋巴因子，单核因子 减少抑制性机制，间接增强宿主对肿瘤免疫反应减少抑制性机制，间接增强宿主对肿瘤免疫反应 增强宿主对细胞毒物质造成损伤的耐受能力，增强宿主对细胞毒物质造成损伤的耐受能力，如增加骨髓的白细胞前体来提高患者化疗耐受力如增加骨髓的白细胞前体来提高患者化疗耐受力3%，、期无差异（Yoh atanabe,1984)(Minoru Mukai,1995)用某些物质或手段，纠正靶细胞中的基因或基因产物中性粒细胞淋巴细胞等来清
4、除，放疗治疗后，产生的损伤或死亡肿瘤细胞。OK-432治疗大肠癌04），对期差异明显（SiYoung Kim,1998)与纤维蛋白原混合瘤内注射（Takushi mondon 1992）1966年，Okamoto等从A组溶血性链球菌Su珠（Streptococcus Pyogenes Su strain）在Bernheimer氏基础培养基中培养并经青霉素G与45度热处理后冻干的制剂基因补充 基因封闭白细胞介素（interleukin)通过基因重组技术，将目的基因导入受体细胞而制备 的疫苗，如源非特异性或特异性抗原（如CEA、PSA）导入肿瘤细胞提高其抗原性。目前仅处于发展中的婴儿期改变肿瘤细胞
5、的特点，增强其免疫原性,改变转移方式,或使细胞对免疫杀伤机制或细胞毒药物更敏感对癌性胸腔积液有效率88.用减毒的全细胞、细胞壁、特异性抗原、非致病 性活微生物刺激患者免疫系统OK432的作用（增强免疫应答）乳腺癌1/3为HER2过度表达手术、放疗、化疗使肿瘤减小到最小时最有效，阻止作用最小生物反应调节剂的定义生物反应调节剂的定义 （Mitchell Mitchell 2 2 ）改变肿瘤细胞的特点，增强其免疫原性改变肿瘤细胞的特点，增强其免疫原性,改变转移改变转移方式方式,或使细胞对免疫杀伤机制或细胞毒药物更敏感或使细胞对免疫杀伤机制或细胞毒药物更敏感预防或逆转细胞转化，或促进不成熟肿瘤细预防或
6、逆转细胞转化，或促进不成熟肿瘤细 胞的成熟胞的成熟生物反应调节剂的定义生物反应调节剂的定义 （MihichMihich）一种物质或方法（一种物质或方法（ApproachesApproaches）能调整宿主）能调整宿主对肿瘤的反应，使二者之间的相互作用向着对肿瘤的反应，使二者之间的相互作用向着有利于治疗方向发展，均可称之为有利于治疗方向发展，均可称之为BRMsBRMs生物治疗的种类生物治疗的种类非特异主动免疫治疗：刺激网状内皮系统活性，并同时非特异主动免疫治疗：刺激网状内皮系统活性，并同时 能够非特异地增强免疫功能能够非特异地增强免疫功能特异性主动免疫治疗：用自体肿瘤或异体同一组织学类特异性主动
7、免疫治疗：用自体肿瘤或异体同一组织学类 型的肿瘤提取物作为瘤苗免疫癌症患者构成肿瘤的特型的肿瘤提取物作为瘤苗免疫癌症患者构成肿瘤的特异异 性免疫治疗性免疫治疗特异性被动免疫：用人癌细胞免疫异体或动物，用所产特异性被动免疫：用人癌细胞免疫异体或动物，用所产 生的免疫效应细胞治疗癌症患者生的免疫效应细胞治疗癌症患者过继性免疫治疗：是通过给荷瘤机体输注抗肿瘤免疫效过继性免疫治疗：是通过给荷瘤机体输注抗肿瘤免疫效 应细胞的方法治疗肿瘤应细胞的方法治疗肿瘤1 1、细胞因子、细胞因子 白细胞介素（白细胞介素（interleukin)interleukin)干扰素（干扰素（IFNIFN）肿瘤坏死因子（肿瘤坏
8、死因子（TNFTNF）集落刺激因子（集落刺激因子（CSFCSF）2 2、体细胞和辅助性造血干细胞、体细胞和辅助性造血干细胞 LAKLAK细胞细胞 TILTIL细胞细胞 TAKTAK细胞细胞 骨髓干骨髓干 细胞细胞 外周血和脐带血干细胞外周血和脐带血干细胞3 3、抗体、抗体 抗肿瘤单克隆抗体抗肿瘤单克隆抗体 抗细胞表面表记抗体抗细胞表面表记抗体 生物反应调节剂种类（生物反应调节剂种类（1 1）根据根据BRMsBRMs的定义的定义4 4、菌类及其有效成分、菌类及其有效成分 卡介苗（卡介苗（BCGBCG）短小棒状杆菌（短小棒状杆菌（CPCP）链球菌（链球菌（OK432OK432）假单孢菌假单孢菌5
9、5、多糖类、多糖类 香菇多糖香菇多糖 云芝多糖云芝多糖 黄氏多糖黄氏多糖 刺五加多糖刺五加多糖 扶正女贞子扶正女贞子LLE LLE 枸杞多糖枸杞多糖 人参花总皂苷人参花总皂苷 冬虫夏草冬虫夏草6 6、胸腺素、胸腺素 生物反应调节剂种类（生物反应调节剂种类（2 2）根据根据BRMsBRMs的定义的定义7 7、合成的免疫调节剂合成的免疫调节剂 聚肌胞苷酸（聚肌胞苷酸（Poly I:C)Poly I:C)聚腺尿苷酸聚腺尿苷酸(Poly A:U)(Poly A:U)左旋咪唑（左旋咪唑（levamisol,LMS)Cimetidinelevamisol,LMS)Cimetidine8 8、抗血管生成类抗
10、血管生成类9 9、酶制剂及酶抑制剂酶制剂及酶抑制剂1010、细胞分化诱导剂、细胞分化诱导剂1111、肿瘤疫苗、肿瘤疫苗1212、基因治疗基因治疗 基因替代基因替代 基因修饰基因修饰 基因添加基因添加 基因补充基因补充 基因封闭基因封闭生物反应调节剂种类（生物反应调节剂种类（3 3）根据根据BRMsBRMs的定义的定义生物治疗在综合治疗中的作用生物治疗在综合治疗中的作用 肿瘤细胞在肿瘤细胞在109以下以下,机体有可能与肿瘤机体有可能与肿瘤相抗衡相抗衡 长处长处:无通常手术无通常手术,化疗化疗,放疗的副作用放疗的副作用,帮助已衰弱的机体恢复与肿瘤作斗争帮助已衰弱的机体恢复与肿瘤作斗争人参花总皂苷
11、冬虫夏草抗肿瘤单克隆抗体 抗细胞表面表记抗体生物反应调节剂种类（1）溶血性链球菌制剂（OK432）用减毒的全细胞、细胞壁、特异性抗原、非致病 性活微生物刺激患者免疫系统细胞因子如：G-CSF、MG-CSF、IFN2、TNF等。7、合成的免疫调节剂25例晚期黑色素瘤，肾癌OK432的作用（增强免疫应答）干扰素（IFN）4%（JINPOK KIM，1992）14天后广泛肿瘤组织衰退OK432+化疗，对恶性胸腹水的疗效最好，优于单纯化疗或单纯OK432（Y Hio，1999）减少抑制性机制，间接增强宿主对肿瘤免疫反应(Minoru Mukai,1995)是一个分子家族，包括来源于巨嗜细胞的TNF和来
12、自淋巴细胞的TNF通过T细胞，B细胞，NK细胞，巨嗜细胞表面的受体而起作用香菇多糖 云芝多糖 黄氏多糖 刺五加多糖联合基因治疗是目前基因治疗的热中性粒细胞淋巴细胞等来清除，放疗治疗后，产生的损伤或死亡肿瘤细胞。生物治疗在综合治疗中的作用生物治疗在综合治疗中的作用 目前仅处于发展中的婴儿期目前仅处于发展中的婴儿期 目前有越来越多的成功病例目前有越来越多的成功病例 目前主要作辅助治疗目前主要作辅助治疗 将逐渐成为肿瘤治疗的第四手段将逐渐成为肿瘤治疗的第四手段BRM 给给何人用何人用 肿瘤特别小的肿瘤特别小的“健康患者健康患者”治疗时没发病治疗时没发病,具肿瘤高发率的患者具肿瘤高发率的患者 手术、放
13、疗、化疗使肿瘤减小到最小时手术、放疗、化疗使肿瘤减小到最小时最有效，阻止作用最小最有效，阻止作用最小BRM 何时用何时用 手术后手术后12周周 放疗放疗,化疗前化疗前 放疗放疗,化疗中化疗中 放疗放疗,化疗后化疗后BRM的用量的用量 免疫活性多为钟状曲线免疫活性多为钟状曲线 应适量，多于、少于，活性均降低应适量，多于、少于，活性均降低细胞因子细胞因子(Cytokines)是由细胞产生的可溶蛋白（多肽），它是由细胞产生的可溶蛋白（多肽），它们可以影响自身细胞（们可以影响自身细胞（Autocine)或周围或周围细胞细胞(Paracrine)的生长和代谢，是通过的生长和代谢，是通过于细胞表面的相应受
14、体而实现的。于细胞表面的相应受体而实现的。细胞因子细胞因子(Cytokines)白细胞介素（白细胞介素（interleukin)interleukin)干扰素（干扰素（IFNIFN）肿瘤坏死因子（肿瘤坏死因子（TNFTNF）集落刺激因子（集落刺激因子（CSFCSF）白介素白介素(Interleukin)特指由白细胞产生的可以调节其他白细特指由白细胞产生的可以调节其他白细胞反应的任何可溶性蛋白或糖蛋白物质胞反应的任何可溶性蛋白或糖蛋白物质 目前以白介素命名的细胞因子已有目前以白介素命名的细胞因子已有15种种 IL2临床应用的较多临床应用的较多IL2 一种一种133氨基酸的糖蛋白氨基酸的糖蛋白 分
15、子量分子量15KD 通过通过T细胞，细胞，B细胞，细胞，NK细胞，巨嗜细细胞，巨嗜细胞表面的受体而起作用胞表面的受体而起作用IL2 Stephen Rosenberg(NCI)198512 HD IL2/LAK 25例晚期黑色素瘤，肾癌例晚期黑色素瘤，肾癌 OR 44%IL2应用时需注意的问体应用时需注意的问体 患者的免水平患者的免水平 IL2的剂量的剂量 应用方法应用方法 综合应用综合应用 混合效应混合效应 不良反应不良反应干扰素干扰素（IFNIFN）直接抗病毒直接抗病毒 增强组织相溶性抗原（增强组织相溶性抗原（MHC），肿瘤相），肿瘤相关抗原（关抗原（TAA）的表达）的表达 增强增强NK细
16、胞毒细胞毒 增强抗体依赖性细胞的细胞毒（增强抗体依赖性细胞的细胞毒（ADCC）抗细胞增殖抗细胞增殖 抗血管生成抗血管生成干扰素干扰素（IFNIFN）IFN IFN IFN IFN 剂量和有效病种剂量和有效病种毛细胞白血病毛细胞白血病 3MU/d 7090慢粒白血病慢粒白血病 5MU/d 4585低度低度NHL 350MU/d 2785多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤 512MU/d 318恶性黑色素瘤恶性黑色素瘤 520MU/d 719肾癌肾癌 520MU/d 823Kaposis肉瘤肉瘤 350MU/d 367内分泌性胰腺肿瘤内分泌性胰腺肿瘤 35MU/d 3377类癌类癌 1224MU 2040H
17、D IL2/LAKRITUXAN清除B淋巴细胞的多重机制不能切除的肝癌，介入化疗+IL2+OK432，同时肌肉注射。术后5年生存率，OK432+化疗36.一种133氨基酸的糖蛋白肿瘤转移抑制基因nm23,将此基因转染肿瘤细胞可延链球菌（OK432）假单孢菌恶性黑色素瘤 520MU/d 719(Minoru Mukai,1995)本例说明基因治疗需很好的载体一般是正常人体具备的基因。抗肿瘤单克隆抗体 抗细胞表面表记抗体OK-432的临床应用抗肿瘤单克隆抗体 抗细胞表面表记抗体与纤维蛋白原混合瘤内注射（Takushi mondon 1992）LAK细胞 TIL细胞 TAK细胞 骨髓干腺癌、期分别为
18、71.美宾西法尼亚大学基因治疗死亡一例输注38万亿个腺瘤毒颗粒，企图在肝脏得到乌氨酸甲酰胺转移酶的基因表达，以纠正遗传酶缺陷瘤，但仅有1%转基因达到靶细胞，未见基因表达。给予机体某些物质集落刺激因子（CSF）肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子（TNFTNF）是一个分子家族，包括来源于巨嗜细胞是一个分子家族，包括来源于巨嗜细胞的的TNF和来自淋巴细胞的和来自淋巴细胞的TNF 对肿瘤细胞有杀伤，对正常细胞无碍对肿瘤细胞有杀伤，对正常细胞无碍 对不同肿瘤差异很大对不同肿瘤差异很大集落刺激因子集落刺激因子（CSF）Colony Stimulating Factor(CSF)是一组是一组体内，体外促进祖细胞增殖，
19、分化为各体内，体外促进祖细胞增殖，分化为各种成熟细胞的低分子量糖蛋白种成熟细胞的低分子量糖蛋白集落刺激因子集落刺激因子（CSF）IL3(multiCSF)GMCSF GCSF MCSF EPO TPOTPO的分子结构的分子结构TPO的作用部位的作用部位体细胞体细胞 目的增加免疫的识别，对肿瘤细胞的攻目的增加免疫的识别，对肿瘤细胞的攻击击 种类种类LAK，IVS，TIL 机制不很清楚机制不很清楚抗体介导的免疫抗体介导的免疫单抗治疗的局限性单抗治疗的局限性 对肿瘤非绝对特异性对肿瘤非绝对特异性 肿瘤内部抗原的异质性肿瘤内部抗原的异质性 人抗小鼠抗体反应（人抗小鼠抗体反应（HAMA）到达靶位的量有限
20、到达靶位的量有限 循环中游离抗原的阻断循环中游离抗原的阻断 无细胞杀伤效能无细胞杀伤效能提高单抗疗效的方法提高单抗疗效的方法 基因工程抗体基因工程抗体 双功能抗体双功能抗体 抗独特型抗体抗独特型抗体 放射性标记抗体放射性标记抗体 免疫毒素免疫毒素02）（Tanaka等，1994）FDA 1998年9月批准通过5%（Kyoto实验组，1992）1966年，Okamoto等从A组溶血性链球菌Su珠（Streptococcus Pyogenes Su strain）在Bernheimer氏基础培养基中培养并经青霉素G与45度热处理后冻干的制剂美宾西法尼亚大学基因治疗死亡一例输注38万亿个腺瘤毒颗粒，
21、企图在肝脏得到乌氨酸甲酰胺转移酶的基因表达，以纠正遗传酶缺陷瘤，但仅有1%转基因达到靶细胞，未见基因表达。用某些物质或手段，纠正靶细胞中的基因或基因产物肾癌 520MU/d 823改变肿瘤细胞的特点，增强其免疫原性,改变转移方式,或使细胞对免疫杀伤机制或细胞毒药物更敏感美Kaplan Cancer Center 用神经苷脂黑色素瘤疫苗，中性粒细胞淋巴细胞等来清除，放疗治疗后，产生的损伤或死亡肿瘤细胞。目前以白介素命名的细胞因子已有15种生物治疗在综合治疗中的作用从小剂量开始，逐渐加量，可减少发热一般是正常人体具备的基因。OK-432联合放疗治疗食管癌（1）自杀基因：将某些细菌及病毒特有的药物敏
22、感基因转导入肿瘤细胞，而达到治疗肿瘤的目的，可以和放疗、免疫基因治疗联合应用，是较 为有效和临床应用很有前景的基因方法。从小剂量开始，逐渐加量，可减少发热特异性主动免疫治疗：用自体肿瘤或异体同一组织学类 型的肿瘤提取物作为瘤苗免疫癌症患者构成肿瘤的特异 性免疫治疗RituxanRituxanHerceptinHerceptin目前的制剂目前的制剂RITUXAN FDA 1997年批准通过年批准通过 作用靶点表面标记作用靶点表面标记CD20的的B细胞细胞 作用机制诱导作用机制诱导ADCC，补体依赖性细胞，补体依赖性细胞毒性，凋亡毒性，凋亡 48%的复发的复发/化疗抗拒的化疗抗拒的NHL有效有效R
23、ITUXAN清除清除B淋巴细胞的多重机制淋巴细胞的多重机制MALIGNANTB CELLKILLERCELLCOMPLEMENTRITUXANRITUXANRITUXAN的有效率的有效率OR48%PR42%CR6%0%5%10%15%20%25%30%35%40%45%50%ORPRCR系列1Herceptin（荷塞停）荷塞停）美国基因技术公司生产的美国基因技术公司生产的rhuMAbp185HER2 FDA 1998年年9月批准通过月批准通过 作用靶点具有作用靶点具有HER2基因过度表达的肿瘤细胞基因过度表达的肿瘤细胞 乳腺癌乳腺癌1/3为为HER2过度表达过度表达菌类及其有效成分菌类及其有效
24、成分 将肿瘤疫苗给患者进行免疫接种，以激发机体将肿瘤疫苗给患者进行免疫接种，以激发机体对肿瘤的特异性免疫反应，排斥肿瘤，是属于主对肿瘤的特异性免疫反应，排斥肿瘤，是属于主动免疫。研制和开发新型有效的肿瘤疫苗是近几动免疫。研制和开发新型有效的肿瘤疫苗是近几年肿瘤免疫治疗的热点。年肿瘤免疫治疗的热点。肿瘤疫苗肿瘤疫苗作作 用用 通过基因重组技术，将目的基因导入受体细胞而制备通过基因重组技术，将目的基因导入受体细胞而制备 的疫苗，如源非特异性或特异性抗原（如的疫苗，如源非特异性或特异性抗原（如CEACEA、PSAPSA）导入肿瘤细胞提高其抗原性。）导入肿瘤细胞提高其抗原性。肿瘤细胞疫苗肿瘤细胞疫苗
25、用减毒的全细胞、细胞壁、特异性抗原、非致病用减毒的全细胞、细胞壁、特异性抗原、非致病 性活微生物刺激患者免疫系统性活微生物刺激患者免疫系统肿瘤基因工程疫苗肿瘤基因工程疫苗类类 型型种种 类类 卡介苗（卡介苗（BCG）短小棒状杆菌（短小棒状杆菌（CP）溶血性链球菌制剂（溶血性链球菌制剂（OK432）链霉菌制剂（链霉菌制剂（bestatin）其它其它临床应用临床应用美美Kaplan Cancer Center Kaplan Cancer Center 用神经苷脂黑色素瘤用神经苷脂黑色素瘤疫苗，疫苗，治疗治疗1515例例HLA-A2+HLA-A2+黑色素瘤患者，黑色素瘤患者，12-2612-26月无
26、复发，月无复发，HLA-A2HLA-A2者者3-53-5个月内复发个月内复发许多许多I I、II II 期实验，使部分患者得到期实验，使部分患者得到CRCR、PRPR，且，且无毒性反应，生存长达数年无毒性反应，生存长达数年现已进入现已进入IIIIII期临床实验期临床实验OK432来来 源源 1966年，年，Okamoto等从等从A组溶血性链球菌组溶血性链球菌Su珠（珠（Streptococcus Pyogenes Su strain）在在Bernheimer氏基础培养基中培养并经氏基础培养基中培养并经青霉素青霉素G与与45度热处理后冻干的制剂度热处理后冻干的制剂 OK432的作用的作用（细胞毒
27、性）（细胞毒性）细胞毒性淋巴细胞（细胞毒性淋巴细胞（CTL）自然杀伤细胞（自然杀伤细胞（NK）自体肿瘤杀伤细胞（自体肿瘤杀伤细胞（ATK）单核细胞和巨噬细胞单核细胞和巨噬细胞 嗜中性细胞嗜中性细胞 淋巴因子激活的杀伤细胞（淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）抗体依赖细胞毒性（抗体依赖细胞毒性（K Cell）OK432的作用的作用（诱生细胞因子）（诱生细胞因子）IFN、IL1、2 CSF TNF、自然杀伤细胞活化因子（自然杀伤细胞活化因子（NKCP）单核细胞细胞毒性因子（单核细胞细胞毒性因子（MCF）噬中性细胞活化因子（噬中性细胞活化因子（NAF）粒细胞细胞毒性因子（粒细胞细胞毒性因子（GCF）OK
28、432的作用的作用（增强免疫应答）（增强免疫应答）PBL及及T细胞数增加细胞数增加 对丝裂原的淋巴细胞转化增强对丝裂原的淋巴细胞转化增强 抑制性抑制性T细胞（细胞（Ts）减少）减少 抑制性巨细胞减少抑制性巨细胞减少 产生抗体产生抗体 激活补体激活补体OK432的作用的作用（其（其 它）它）防止癌转移防止癌转移 免疫调节免疫调节 放、化疗的骨髓保护放、化疗的骨髓保护 与化疗的协同作用与化疗的协同作用 直接杀伤癌细胞直接杀伤癌细胞OK-432OK-432的临床应用的临床应用单一用药有抗癌作用单一用药有抗癌作用与放、化疗及手术合用与放、化疗及手术合用与其它与其它BRMsBRMs联合使用，具有协同作用
29、联合使用，具有协同作用 对癌性胸腔积液有效率88.5%，化疗组（对照）有效率53.9%（上海 廖美琳等，1994）对卵巢癌腹水有效率85%（辽宁 马晶等）OK432+化疗，对恶性胸腹水的疗效最好，优于单纯化疗或单纯OK432（Y Hio，1999）OK432+IL2，治疗胃癌腹水，有效率81%（Yamaguehi,1995)OK-432OK-432治疗癌性渗出液治疗癌性渗出液 期术前瘤体内注射，5年生存率47.7%，对照组27.5%（P=0.02）（Tanaka等，1994）期术后OK432+化疗组5年生存率45.3%，明显高于手术+化疗组29.8%及单手术组24.4%（JINPOK KIM，
30、1992）胃癌术后5年生存率，口服OK432 62.9%，皮内注射OK432 79.5%，对照组59.5%（Kyoto实验组，1992）胃癌根治术后，5年生存率FAM+OK432 62%，单FAM 52%（P=0.04），对期差异明显（SiYoung Kim,1998)OK-432OK-432治疗胃癌治疗胃癌 放疗前及放疗后2周，肿瘤及周边部位注射OK432 1mg(10KE)常规放疗 CR70.0%（49/70），有效率100%全组5年生存率33.1%,CR组44.9%，5CM 59.9%，510cm 37.9%(Minoru Mukai,1995)OK-432OK-432联合放疗治疗食管癌
31、（联合放疗治疗食管癌（1 1）放射治疗对肿瘤细胞扮演放射治疗对肿瘤细胞扮演“攻击者攻击者”；OK-432OK-432做为做为“清洁工清洁工”，诱导许多效应细胞；中性粒细胞淋巴，诱导许多效应细胞；中性粒细胞淋巴细胞等来清除，放疗治疗后，产生的损伤或死亡肿瘤细胞。细胞等来清除，放疗治疗后，产生的损伤或死亡肿瘤细胞。OK-432OK-432同时是放疗保护剂，能减轻放疗引起的副反应同时是放疗保护剂，能减轻放疗引起的副反应OK-432OK-432的局部应用联合放射治疗在提高的局部应用联合放射治疗在提高肿瘤放疗的完全反应（肿瘤放疗的完全反应（CRCR）率上起着引导激发作用）率上起着引导激发作用OK-432
32、OK-432联合放疗治疗食管癌（联合放疗治疗食管癌（2 2）(Minoru Mukai,1995)(Minoru Mukai,1995)术后，3年生存率，OK432+化疗76.2%，化疗37.5%（P0.05）；腺癌、期分别为71.4%和53.3%，、期无差异（Yoh atanabe,1984)术后5年生存率，OK432+化疗36.3%，单化疗 16.9%（P0.01），鳞癌有显著性差异，腺癌无显著性差异（Yoh Watanabe,1987)OK-432OK-432治疗肺癌治疗肺癌 不能切除的肝癌，介入化疗+IL2+OK432，同时肌肉注射。反应率58.3%，2年生存率52%。有反应者2年生存
33、率80%（Masaaki Oka,1994)不能切除肝癌，TIE治疗 2年生存率86%，3ySR 23%（岸 健太郎，1995）肝转移癌，用OK432+纤维蛋白原（含 的纤维蛋白胶）动脉免疫栓塞（TIE）治疗，19例中14例（74%）生存216月，5例417月死亡。6例TIE后手术，肿瘤有裂解坏死和凝集坏死OK-432OK-432治疗肝癌治疗肝癌 （1 1）胃及大肠癌肝转移，介入化疗+OK432+IL2。胃癌MST318天；大肠癌MST 556天（宫喜一，1998）小肝癌瘤体内注射，可用于不能手术的患者（GT Huang,1990)OK432+rGCSF+IL2联合免疫，血清AFP水平降低 (
34、Takashi Himoto,1996)OK-432OK-432治疗肝癌治疗肝癌（2 2）OK-432OK-432治疗大肠癌治疗大肠癌与纤维蛋白原混合瘤内注射（与纤维蛋白原混合瘤内注射（Takushi mondon 1992Takushi mondon 1992）注射后当天，明显的炎症细胞浸润注射后当天，明显的炎症细胞浸润 注射后注射后4-74-7天后，形成内芽肿天后，形成内芽肿 1414天后广泛肿瘤组织衰退天后广泛肿瘤组织衰退5 5-脱氧脱氧-5-5-氟尿嘧啶联合氟尿嘧啶联合OK-432OK-432和纤维蛋白原混合物和纤维蛋白原混合物局部免疫，能选择性增加大肠癌病人癌组织中局部免疫，能选择性
35、增加大肠癌病人癌组织中5-5-氟尿氟尿嘧啶浓度（嘧啶浓度（Mosahiro Amano,2000Mosahiro Amano,2000）OK-432OK-432的毒副作用的毒副作用发热发热 注射后注射后1-61-6小时出现发热，一般持续小时出现发热，一般持续2-32-3天天 用解热药有效用解热药有效 反复注射后，有耐热现象，发热减轻反复注射后，有耐热现象，发热减轻 从小剂量开始，逐渐加量，可减少发热从小剂量开始，逐渐加量，可减少发热 皮内注射可能发热最轻，效果最好皮内注射可能发热最轻，效果最好 局部反应局部反应 皮内、肌肉初次注射，局部发红和肿胀，偶见皮内、肌肉初次注射，局部发红和肿胀，偶见
36、水泡，水泡，罕见溃疡；罕见溃疡；局部疼痛时可用局麻药，或服镇痛药；局部疼痛时可用局麻药，或服镇痛药；改变注射部位，可减轻局部反应改变注射部位，可减轻局部反应 抗血管生成类抗血管生成类 肿瘤新生毛细血管生成是肿瘤转移过程中的一个关键肿瘤新生毛细血管生成是肿瘤转移过程中的一个关键步骤，如步骤，如VEGFVEGF（血管生成因子）促进内皮细胞生长，（血管生成因子）促进内皮细胞生长，抑制抑制VEGFVEGF可减少转移，如可减少转移，如IFNIFN、野生型、野生型P P5353。血小板因子。血小板因子4 4（PF4PF4）是一种强有力的血管生成抑制剂。）是一种强有力的血管生成抑制剂。肿瘤转移抑制基因肿瘤转
37、移抑制基因nm23,nm23,将此基因转染肿瘤细胞可延将此基因转染肿瘤细胞可延缓肿瘤转移。缓肿瘤转移。细胞分化诱导剂细胞分化诱导剂 19601960年年PiercePierce发现小鼠睾丸畸胎肿瘤细胞可发地分化成良性发现小鼠睾丸畸胎肿瘤细胞可发地分化成良性 或正常细胞。或正常细胞。19711971年年FriendFriend报告小鼠红白血病细胞能被二甲亚砜（报告小鼠红白血病细胞能被二甲亚砜（DMSODMSO）诱导分化，此后提出了诱诱导分化，此后提出了诱 导分化治疗的概念。导分化治疗的概念。诱导分化剂：如诱导分化剂：如13-13-顺式维甲酸（顺式维甲酸（13-CRA13-CRA）、）、9-9-顺
38、式维甲酸顺式维甲酸 （9-CRA9-CRA）和三氧化二砷（）和三氧化二砷（ASAS2 2O O3 3）；细胞因子如：）；细胞因子如：G-CSFG-CSF、MG-CSFMG-CSF、IFN2IFN2、TNFTNF等。等。什么是基因治疗什么是基因治疗 基因治疗是指将编码某种具有生物活性的物质基因治疗是指将编码某种具有生物活性的物质（一般是蛋白质或肽）的基因；通过载体或直（一般是蛋白质或肽）的基因；通过载体或直接地转移到人体器官或组织的细胞内，使其在接地转移到人体器官或组织的细胞内，使其在局部表达该活性物质，从而达到相应的治疗或局部表达该活性物质，从而达到相应的治疗或预防目的的疗法。预防目的的疗法。
39、将核苷酸转移到靶细胞中，扰乱或纠正某些病将核苷酸转移到靶细胞中，扰乱或纠正某些病理生理过程理生理过程用某些物质或手段，纠正靶细胞中的基因或基用某些物质或手段，纠正靶细胞中的基因或基因产物因产物概概 念念FDAFDA批准临床实验批准临床实验103103项，最多的是项，最多的是P53P53治疗头颈部治疗头颈部肿瘤和肿瘤和NSCLCNSCLC，结果有，结果有CR CR、PRPR和生存期延长。和生存期延长。基因转导基因转导体外和体内基因转导必要条件：体外和体内基因转导必要条件：核苷酸或基因的运载系统（载体、微基因盒）在核苷酸或基因的运载系统（载体、微基因盒）在靶细胞内能否正确表达靶细胞内能否正确表达用
40、于治疗的基因来源于何处用于治疗的基因来源于何处 一般是正常人体具备的基因。（正常人一般是正常人体具备的基因。（正常人体组织细胞都有抑癌基因，如体组织细胞都有抑癌基因，如p53,p21,p16基因等。这些基因的产物有抑癌作基因等。这些基因的产物有抑癌作用。）用。）美宾西法尼亚大学基因治疗死亡一例输注美宾西法尼亚大学基因治疗死亡一例输注3838万亿个腺瘤毒万亿个腺瘤毒颗粒，企图在肝脏得到乌氨酸甲酰胺转移酶的基因表达，颗粒，企图在肝脏得到乌氨酸甲酰胺转移酶的基因表达，以纠正遗传酶缺陷瘤，但仅有以纠正遗传酶缺陷瘤，但仅有1%1%转基因达到靶细胞，未见转基因达到靶细胞，未见基因表达。多余的病毒在全身激发
41、了内在免疫性，以及全基因表达。多余的病毒在全身激发了内在免疫性，以及全身炎症致死。身炎症致死。本例说明基因治疗需很好的载体本例说明基因治疗需很好的载体BRMBRM基因治疗的事故基因治疗的事故 将将IL-2IL-2或或IFN-IFN-基因转染腹腔基因转染腹腔MM，其表达的基因产物能，其表达的基因产物能 提高提高MM的细胞毒活性，并诱导的细胞毒活性，并诱导MM分泌分泌TNF1TNF1、IL-1IL-1等抗肿等抗肿 瘤免疫介质，调动机体的非特异性免疫功能而发挥抗肿瘤瘤免疫介质，调动机体的非特异性免疫功能而发挥抗肿瘤 效应；效应；对联合对联合IL-2IL-2和和IFN-IFN-基因转染的基因转染的MM
42、，不仅能产生更高水，不仅能产生更高水 平的细胞因子，而且激活了脾脏的平的细胞因子，而且激活了脾脏的CTLCTL细胞细胞,使机体的非特使机体的非特 异性和特异性免疫功能同时诱导，产生协同作用。异性和特异性免疫功能同时诱导，产生协同作用。联合基因治疗是目前基因治疗的热联合基因治疗是目前基因治疗的热 （一）（一）自杀基因和细胞因子基因联合治疗；肿瘤抑癌基因自杀基因和细胞因子基因联合治疗；肿瘤抑癌基因 P53P53与免疫因子基因与免疫因子基因GM-CSFGM-CSF的联合治疗等。均比单的联合治疗等。均比单一基因治疗为优。一基因治疗为优。自杀基因：将某些细菌及病毒特有的药物敏感基因自杀基因：将某些细菌及病毒特有的药物敏感基因转导入肿瘤细胞，而达到治疗肿瘤的目的，可以和转导入肿瘤细胞，而达到治疗肿瘤的目的，可以和放疗、免疫基因治疗联合应用，是较放疗、免疫基因治疗联合应用，是较 为有效和临床为有效和临床应用很有前景的基因方法。应用很有前景的基因方法。联合基因治疗是目前基因治疗的热点联合基因治疗是目前基因治疗的热点 （二）（二）
