1、血液病基因检测的临床意义（优选）血液病基因检测的临床意义骨髓增生异常骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤骨髓增生性肿瘤 （MDS/MPN）是一种克隆性造血干细胞疾病，特点表现为MDS与MPD交叠，有多种“有效”造血及病态造血存在。慢性粒单核细胞白血病（CMML）不典型慢性髓系白血病（aCML）幼年型粒单核细胞白血病（JMML）不能分类的MDS/MPD 四 类骨髓增生异常综合征（骨髓增生异常综合征（MDSMDS）MDS也是克隆性疾病，以无效造也是克隆性疾病，以无效造血为其特征引起血细胞减少，骨髓血为其特征引起血细胞减少，骨髓及血象一至多系细胞病态造血。及血象一至多系细胞病态造血。MDS亚型分类亚型分类
2、亚型亚型 外周血象外周血象 骨髓象骨髓象 1.难治性贫血难治性贫血 贫血；未见或罕见贫血；未见或罕见 仅红系增生异常，仅红系增生异常，（RA）原始细胞原始细胞 原始细胞原始细胞 5%，环形铁粒幼细胞环形铁粒幼细胞15%2.难治性贫血伴贫血；未见或罕见难治性贫血伴贫血；未见或罕见 仅红系增生异常，仅红系增生异常，环形铁粒幼细胞原始细胞环形铁粒幼细胞原始细胞 原始细胞原始细胞 5%，（）（）环形铁粒幼细胞环形铁粒幼细胞15%3.难治性血细胞减少难治性血细胞减少 血细胞减少（二系或血细胞减少（二系或 二系或多系细胞增生异常二系或多系细胞增生异常 伴多系增生异常伴多系增生异常 全系）；未见全系）；未见
3、Auer小体；小体；10%；原始细胞；原始细胞 5%，（RCMD）未见或罕见未见或罕见 原始细胞原始细胞；未见未见Auer小体；小体；单核细胞单核细胞1109/L 环形铁粒幼细胞环形铁粒幼细胞15%4.难治性血细胞减少难治性血细胞减少 血细胞减少（二系或血细胞减少（二系或 二系或多系细胞增生异二系或多系细胞增生异常伴多系增生异常和常伴多系增生异常和 全系）；未见全系）；未见Auer小体；小体；10%；原始细胞；原始细胞 5%，环形铁粒幼细胞环形铁粒幼细胞 单核细胞单核细胞1109/L 未见未见Auer小体；小体；（RCMD-RS）环形铁粒幼细胞环形铁粒幼细胞15%亚型亚型 外周血象外周血象 骨
4、髓象骨髓象5.难治性贫血伴难治性贫血伴 血细胞减少，血细胞减少，一系或多系细胞增生异常；一系或多系细胞增生异常；原始细胞增多原始细胞增多1型型 原始细胞原始细胞5%原始细胞原始细胞5%9%；（RAEB-1）未见未见Auer小体；小体；未见未见Auer小体；小体；单核细胞单核细胞1109/L6.难治性贫血伴难治性贫血伴 血细胞减少，血细胞减少，一系或多系细胞增生异常；一系或多系细胞增生异常；原始细胞增多原始细胞增多2型型 原始细胞原始细胞5%19%原始细胞原始细胞10%19%；（RAEB-2）Auer小体（小体（）；）；Auer小体（小体（）；）；单核细胞单核细胞1109/L7.未归类的未归类的
5、MDS 血细胞减少，血细胞减少，单一髓系细胞增生异常；单一髓系细胞增生异常；（MDS-U）未见或罕见原始细胞；未见或罕见原始细胞；原始细胞原始细胞5%；未见未见Auer小体；小体；未见未见Auer小体；小体；8.5q-综合征综合征 贫血；贫血；少叶核巨核细胞正常或增多；少叶核巨核细胞正常或增多；del（5q）血小板计数正常或增高；血小板计数正常或增高；原始细胞原始细胞5%；原始细胞原始细胞5%；细胞遗传学检测仅见细胞遗传学检测仅见 del（5q）异常；）异常；未见未见Auer小体；小体；AML是髓系原始细胞克隆性增生疾病，WHO分型将AML分为 1.伴有特殊染色体的AML 2.伴有病态造血的A
6、ML 3.治疗相关的AML和MDS 4.不伴特殊细胞遗传易位的AML 四亚型。急性髓细胞白血病（急性髓细胞白血病（AML）1 1伴有特殊细胞遗传易位的伴有特殊细胞遗传易位的AMLAML （1 1）伴有）伴有t(8;21)(q22;q22)AML,t(8;21)(q22;q22)AML,AML1 AML1（CBFCBF）/ETO/ETO的的AMLAML （2 2）伴有）伴有inv(16)(p13;q22)inv(16)(p13;q22)或或 t(16;16)(p13;q22),t(16;16)(p13;q22),CBF/MYH11 CBF/MYH11的骨髓嗜的骨髓嗜酸粒细胞增多的酸粒细胞增多的A
7、MLAML （3 3）伴有）伴有t(15;17)(q22;q1112),PML/RARt(15;17)(q22;q1112),PML/RAR 及变异的急性早幼粒细及变异的急性早幼粒细胞白血病（胞白血病（APLAPL）（4 4）伴有）伴有11q23(MLL)11q23(MLL)异常增异常增生的生的AML AML 2 2伴有多系血细胞增生异常的伴有多系血细胞增生异常的 急性髓细胞白血病急性髓细胞白血病 （1 1）由）由MDSMDS或或MDS/MPDMDS/MPD转化而成转化而成 （2 2）发病前无）发病前无MDSMDS病史病史 3 3治疗相关的治疗相关的AMLAML和和MDSMDS（1 1）与烷化
8、剂相关）与烷化剂相关（2 2）与拓扑异构酶）与拓扑异构酶抑制剂相关抑制剂相关 （一些可以是淋巴系）（一些可以是淋巴系）（3 3）其他）其他3治疗相关的AML和MDS（1）与烷化剂相关（2）与拓扑异构酶抑制剂相关 （一些可以是淋巴系）（3）其他融合蛋白可能获得新的功能，促使细胞转化易位使HOX11基因受控于TCR和TCR基因调控序列，导致其异常表达AML1ETO+患者对大剂量阿糖胞苷治疗效果好，具有较高的缓解率，无病生存期长，预后较其他AML亚型（M3除外）好对2岁的婴幼儿急性白血病患者应常规进行MLLAF4融合基因的检测以筛选出高危患者，给予强化治疗提高生存率5%（5/40），且均造成CML急
9、粒单变（MDS-U）未见或罕见原始细胞；弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）分别产生NPMRAR，NuMARAR和PLZFRAR，STAT5bRAR融合基因难治性贫血 贫血；1530%成人ALL及35%儿童ALL1626%TALL，该重组仅见于TALL，是TALL的一个有用的克隆标志未见Auer小体；霍奇金淋巴瘤（霍奇金病）缺失部分可能为TAL1基因的调控序列，使TAL1基因表达失控，导致与染色体易位相似的表型2%AML，22%ALL和混合性白血病及某些淋巴瘤，还可见于治疗相关白血病，尤接受topoisomerase II抑制剂治疗的患者 4不伴特殊细胞遗传易位的AML （1）未分化AML （2
10、）未成熟AML （3）成熟AML （4）急性粒单核细胞白血病 （5）急性单核细胞白血病 （6）急性红白血病 （7）急性巨核细胞白血病 （8）急性嗜碱细胞白血病 （9）伴骨髓纤维化的急性全髓增生 （10）髓细胞肉瘤白白血血病病 FAB 分分型型和和 WHO 分分型型对对比比 FAB 分分型型 WHO 分分型型ALLL1 L2急急性性前前体体淋淋巴巴母母细细胞胞白白血血病病/淋淋巴巴瘤瘤Precursor B and T lymphoblastic leukemia/lymphoma（ALL）L3Burkitt 白白血血病病/淋淋巴巴瘤瘤（Burkitt leukemia/lymphoma）AML
11、M0极极微微分分化化 AML（AML，minimally differentiated）M1未未成成熟熟 AML（AML without maturation）M2a成成熟熟 AML（AML with maturation）M2bAML with t（8；21）（q22；q22），（AML1/ETO）M3APLAML with t（15；17）（q22；q12），（PML/RAR）and variants M4急急性性粒粒-单单核核细细胞胞白白血血病病（Acute myelomonocytic leukemia）M4EOAML with inv（16）（p13q22）or t（16；16）（p
12、13；q22），（CBF/MYH11）M5（M5a、M5b）急急性性单单核核细细胞胞白白血血病病（Acute monoblastic and monocyticleukemia）M6急急性性红红白白血血病病（Acute erythroid leukemia）M7急急性性巨巨核核细细胞胞白白血血病病（Acute megakaryoblastic leukemia）淋系肿瘤 B系肿瘤和T/NK细胞系肿瘤 又可分为两大类型 前体淋巴细胞肿瘤（淋系白血病）外周或成熟淋巴细胞肿瘤（淋巴瘤）前者指淋巴细胞分化的早期阶段起源的肿瘤 后者是分化成熟阶段来源的肿瘤B细胞系肿瘤细胞系肿瘤 前体前体B细胞肿瘤细胞肿
13、瘤 前体前体B淋巴母细胞白血病淋巴母细胞白血病/淋巴瘤（淋巴瘤（B-ALL/LBL）成熟（周围）成熟（周围）B细胞肿瘤细胞肿瘤 B-慢性淋巴细胞性白血病慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞淋巴瘤（小淋巴细胞淋巴瘤（B-CLL/SLL）B-细胞幼淋巴性细胞白血病（细胞幼淋巴性细胞白血病（B-PLL）淋巴浆细胞淋巴瘤（淋巴浆细胞淋巴瘤（LPL）Burkitt淋巴瘤（淋巴瘤（BL）多毛细胞白血病（多毛细胞白血病（HCL）浆细胞骨髓瘤浆细胞骨髓瘤/浆细胞瘤（浆细胞瘤（PCM/PCL）脾边缘区脾边缘区B细胞淋巴瘤，细胞淋巴瘤，绒毛状淋巴细胞（绒毛状淋巴细胞（SMZL）结外边缘区结外边缘区B细胞淋巴瘤，细胞淋
14、巴瘤，MALT型（型（MALT-MZL）结型边缘区结型边缘区B细胞淋巴瘤，细胞淋巴瘤，单核细胞样单核细胞样B细胞（细胞（MZL）滤泡性淋巴瘤（滤泡性淋巴瘤（FL）套细胞淋巴瘤（套细胞淋巴瘤（MCL）弥漫性大弥漫性大B细胞淋巴瘤（细胞淋巴瘤（DLBCL）T细胞和细胞和NK细胞系肿瘤细胞系肿瘤前体前体T细胞肿瘤细胞肿瘤 前体前体T淋巴母细胞淋巴瘤淋巴母细胞淋巴瘤/白血病（白血病（T-LBL/ALL）成熟（周围）成熟（周围）T细胞肿瘤细胞肿瘤 T-细胞幼淋巴细胞白血病（细胞幼淋巴细胞白血病（T-PLL）T-大颗粒淋巴细胞白血病（大颗粒淋巴细胞白血病（T-LGL）侵袭性侵袭性NK细胞白血病（细胞白血病
15、（ANKCL）成人成人T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤/白血病（白血病（ATCL/L）结外结外NK/T细胞淋巴瘤，鼻型（细胞淋巴瘤，鼻型（NK/TCL）肠病型肠病型T细胞细胞/淋巴瘤（淋巴瘤（ITCL）肝脾肝脾T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤 皮下脂膜炎样皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤 蕈样真菌病蕈样真菌病/Sezary综合征（综合征（MF/SS）间变性大细胞淋巴瘤（间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）霍奇金淋巴瘤（霍奇金病）霍奇金淋巴瘤（霍奇金病）结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤（结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤（NLPHL）经典型霍奇金淋巴瘤经典型霍奇金淋巴瘤 结节硬化型霍奇金淋巴瘤，结节硬化型霍奇金淋巴瘤，1
16、和和2级（级（NSHL）富于淋巴细胞经典霍奇金淋巴瘤富于淋巴细胞经典霍奇金淋巴瘤 混合细胞型霍奇金淋巴瘤（混合细胞型霍奇金淋巴瘤（MCHL）淋巴细胞消减型霍奇金淋巴瘤（淋巴细胞消减型霍奇金淋巴瘤（LDHL）3治疗相关的AML和MDS（1）与烷化剂相关（2）与拓扑异构酶抑制剂相关 （一些可以是淋巴系）（3）其他连续定量AML1ETO转录本水平可判定有高复发风险的患者，以便及早治疗干预以防血液学复发t(9;22)(q34;q11)3治疗相关的AML和MDS（1）与烷化剂相关（2）与拓扑异构酶抑制剂相关 （一些可以是淋巴系）（3）其他主要见于M4Eo，10%不伴异常嗜酸细胞M4，少见于M2不伴特殊细
17、胞遗传易位的AML 四亚型。原始细胞5%；分别产生NPMRAR，NuMARAR和PLZFRAR，STAT5bRAR融合基因原始细胞5%；伴有病态造血的AML 3.T细胞和NK细胞系肿瘤原始细胞5%；RQPCR能实时反映体内AML1ETO水平。t(6;9)(p23;q34)骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤 （MDS/MPN）套细胞淋巴瘤（MCL）B-慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞淋巴瘤（B-CLL/SLL）DNA碱基对替换，不一定引起蛋白质结构的改变。碱基对替换一定会导致蛋白质结构的改变吗?白白 血血 病病 基基 因因 检检 测测 基因突变是指由于基因突变是指由于DNADNA分子中发生碱基对的分子
18、中发生碱基对的_而引起的而引起的_的改变。的改变。增添增添替换替换缺失缺失（D）（d1）（d2）（d3）增添、缺失或替换增添、缺失或替换基因结构基因结构基因突变一定会导致生物性状的改变吗基因突变一定会导致生物性状的改变吗?mRNA:G A A甲甲 乙乙 丙丙 丁丁DNADNA碱基对替换，不一定引起蛋白质结构的改变。碱基对替换，不一定引起蛋白质结构的改变。结论结论:碱基对替换一定会导致蛋白质结构的改变吗碱基对替换一定会导致蛋白质结构的改变吗?氨基酸氨基酸:天冬氨酸天冬氨酸天冬氨酸天冬氨酸谷氨酸谷氨酸缬氨酸缬氨酸G A UG A CG U A 2 2、苏丹红进入人体可产生致癌作用。、苏丹红进入人体
19、可产生致癌作用。3 3、乙肝病毒使肝细胞进一步变异，肝细胞、乙肝病毒使肝细胞进一步变异，肝细胞不凋亡，而且不断地再生，就形成了肝癌。不凋亡，而且不断地再生，就形成了肝癌。内因：内因：DNA复制时自身也偶尔发生错误复制时自身也偶尔发生错误物理因素物理因素化学因素化学因素生物因素生物因素基因突变原因：基因突变原因：基因突变的特点基因突变的特点 大多数基因突变对生物体大多数基因突变对生物体是有害的，只有少数是有利的，是有害的，只有少数是有利的，有些既无害也无益。有些既无害也无益。多数有害多数有害结果：增殖过度，分化阻断，凋亡受抑结果：增殖过度，分化阻断，凋亡受抑白血病的分子检测白血病的分子检测vSo
20、uthern blotvNorthern blotvWestern blotvFISHvPCRv测序测序v芯片芯片白血病的分子检测白血病的分子检测vPCR方法优点方法优点 快速快速 灵敏灵敏 特异特异vPCR方法缺点方法缺点 假阳性假阳性 假阴性假阴性！MLL相关融合蛋白的致病性还不清楚，推测其可能具有双重作用此基因突变主要见于MPD和MDS，另可存在于部分AML尤M23;q23)，t(11;17)(q23;q21)（MDS-U）未见或罕见原始细胞；1626%TALL，该重组仅见于TALL，是TALL的一个有用的克隆标志Southern blot（MDS-U）未见或罕见原始细胞；T细胞和NK细
21、胞系肿瘤原始细胞5%；易位使TAL1基因与TCR位点并置，其5端正常转录调节被TCR 5部分所取代，而后者在T细胞中有高表达2%AML，22%ALL和混合性白血病及某些淋巴瘤，还可见于治疗相关白血病，尤接受topoisomerase II抑制剂治疗的患者结节硬化型霍奇金淋巴瘤，1和2级（NSHL）05%，需应用FISH或RTPCR方法提高检测阳性率此类患者进行分子监测有助于判断患者预后，调整治疗方案患者对标准治疗方案很可能无效，需给予强化治疗。未见或罕见 仅红系增生异常，_而引起的_的改变。_而引起的_的改变。未见或罕见 仅红系增生异常，9号染色体的断裂点与CML相同，但22号染色体断裂点具有
22、异质性治疗相关的AML和MDS 4.白血病的分子检测白血病的分子检测vPCR仅适用于染色体断裂点丛集于相对小的仅适用于染色体断裂点丛集于相对小的范围内（范围内（2kb），如），如TALL中中SILTAL1。vRTPCR可用于染色体断裂点跨越很大的区域可用于染色体断裂点跨越很大的区域的融合基因。的融合基因。v巢式巢式RTPCR可显著提高反应的特异性，增加可显著提高反应的特异性，增加扩增效率。扩增效率。vRQPCR可定量扩增产物。可定量扩增产物。白血病分子检测的临床应用白血病分子检测的临床应用白血病的分子生物学检查对白血病诊断分型及白血病的分子生物学检查对白血病诊断分型及预后判断有以下几方面意义预
23、后判断有以下几方面意义 补充补充MIC检查的不足检查的不足 发现新的亚型发现新的亚型 监测白血病的微小残留病灶（监测白血病的微小残留病灶（MRD）为研究白血病的发病机制打下基础为研究白血病的发病机制打下基础 白血病分子检测的临床应用白血病分子检测的临床应用 PCR方法检测方法检测MRD常用的分子标志常用的分子标志 AML1ETOvt(8;21)(q22;q22)v68%原发性原发性AML，在，在M2中的阳性率为中的阳性率为2040%，在在M2b中阳性率为中阳性率为90%v少见于少见于M4和和M1，极少见于，极少见于MDS和骨髓增生综合症和骨髓增生综合症 vAML1ETO+白血病细胞有一定程度的
24、分化能力，能白血病细胞有一定程度的分化能力，能分化至较成熟的嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞，且分化至较成熟的嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞，且对化疗反应较敏感对化疗反应较敏感 vAML1ETO+患者对大剂量阿糖胞苷治疗效果好，具患者对大剂量阿糖胞苷治疗效果好，具有较高的缓解率，无病生存期长，预后较其他有较高的缓解率，无病生存期长，预后较其他AML亚型（亚型（M3除外）好除外）好 AML1ETOv对初发患者进行对初发患者进行t(8;21)和和AML1ETO融合基融合基因的检测对其预后判断及治疗方案的制定相因的检测对其预后判断及治疗方案的制定相当重要当重要 vAML1ETO定性结果不能用于评价患者定性结果
25、不能用于评价患者MRD情况情况 vRQPCR能实时反映体内能实时反映体内AML1ETO水平。连水平。连续定量续定量AML1ETO转录本水平可判定有高复转录本水平可判定有高复发风险的患者，以便及早治疗干预以防血液发风险的患者，以便及早治疗干预以防血液学复发学复发 PMLRARvt(15;17)(q22;q21)，98%M3患者阳性患者阳性v继继t(15;17)之后，又先后发现之后，又先后发现4种种M3特异的累及特异的累及RAR的变异性染色体易位的变异性染色体易位vt(5;17)(q35;q21)，t(11;17)(q13;q21)，dup(17)(q21.3;q23)，t(11;17)(q23;
26、q21)v 分别产生分别产生NPMRAR，NuMARAR和和PLZFRAR，STAT5bRAR融合基因融合基因v临床上，具有临床上，具有PLZFRAR或或STAT5bRAR融合基融合基因患者对因患者对ATRA治疗不敏感，其余三种染色体易位治疗不敏感，其余三种染色体易位患者经患者经ATRA治疗可获完全缓解治疗可获完全缓解 PMLRARAPL累及的累及的RAR基因及其伙伴基因结构示意图基因及其伙伴基因结构示意图 PMLRARv由于由于PML基因断裂点不同，产生基因断裂点不同，产生3种不同的种不同的PMLRAR异构体异构体 v约约55%的的M3患者为患者为L型，型，40%为为S型，型，5%为为V型，
27、且每位患者只表达一种型，且每位患者只表达一种PMLRAR融合融合蛋白蛋白v形态学上形态学上S型白血病细胞常为低分化的并且型白血病细胞常为低分化的并且这些患者可见继发细胞遗传学异常，这些患者可见继发细胞遗传学异常，V型型APL患者的白血病细胞体外对患者的白血病细胞体外对ATRA的敏感的敏感度低度低 PMLRARvRTPCR检测检测PMLRAR是敏感且特异的是敏感且特异的APL诊断方法，还能用于治疗后诊断方法，还能用于治疗后MRD监测。监测。PMLRAR阳性提示的分子复发常早于临床阳性提示的分子复发常早于临床复发复发36个月，为临床采取进一步治疗措施提个月，为临床采取进一步治疗措施提供了保障供了保
28、障 vRQPCR能有效反映患者在发病、治疗、缓解、能有效反映患者在发病、治疗、缓解、复发整个过程的白血病细胞负荷，在复发整个过程的白血病细胞负荷，在MRD监监测中比测中比RTPCR具有更高价值具有更高价值 FLT3基因突变基因突变vFmsrelated tyrosine kinase 3vFLT3为为III型受体酪氨酸激酶家族（还包括型受体酪氨酸激酶家族（还包括cFMS，PDGFR和和cKIT）成员之一，该类受体因在造血过）成员之一，该类受体因在造血过程中造血细胞的增殖和存活中发挥重要调控作用程中造血细胞的增殖和存活中发挥重要调控作用v据报道，据报道，FLT3ITD和和D835突变在突变在AM
29、L中阳性率分中阳性率分别为别为24%(385/1585)和和7%(30/429)，总阳性率超过，总阳性率超过30%，使其成为，使其成为AML中最普遍发生突变的靶基因中最普遍发生突变的靶基因v许多临床研究发现，许多临床研究发现，FLT3突变还与临床预后密切相突变还与临床预后密切相关，尤对关，尤对60岁以下的岁以下的AML患者，患者，FLT3突变患者预突变患者预后较差，且可独立于核型之外后较差，且可独立于核型之外CBFMYH11vinv(16)(p13;q22)及及t(16;16)(p13;q22)v主要见于主要见于M4Eo，10%不伴异常嗜酸细胞不伴异常嗜酸细胞M4，少见于少见于M2vCBFMY
30、H11融合蛋白通过干扰核心结合因融合蛋白通过干扰核心结合因子（子（core binding factor,CBF）的转录激活）的转录激活作用而致病作用而致病 v具有具有CBFMYH11的患者对化疗敏感，预后的患者对化疗敏感，预后较好，故提高检测率尤具临床意义较好，故提高检测率尤具临床意义 CBFMYH11vCBFMYH11具有多种变异型，其中最常见具有多种变异型，其中最常见的为的为A型，占型，占80%vRTPCR检测检测CBFMYH11进行进行MRD监测显示，监测显示，大部分患者在完全缓解时大部分患者在完全缓解时PCR转阴，但仍有转阴，但仍有小部分长期存活者小部分长期存活者PCR仍为阳性仍为阳
31、性v最新研究采用最新研究采用RQPCR检测检测CBFMYH11转录转录本水平来评价本水平来评价M4Eo患者患者MRD情况，预示复情况，预示复发发 DEKCANvt(6;9)(p23;q34)v主要见于主要见于M2或或M4，也见于，也见于M1，MDSRAEBv伴伴DEKCAN的患者年龄一般较轻，且预后较差的患者年龄一般较轻，且预后较差v此类患者进行分子监测有助于判断患者预后，调整此类患者进行分子监测有助于判断患者预后，调整治疗方案治疗方案 WT1基因高表达基因高表达vWilms tumor 1v是无特异分子异常的急性白血病患者理想的是无特异分子异常的急性白血病患者理想的MRD检测指标检测指标v伴
32、此基因高表达者预后差，且表达程度与预伴此基因高表达者预后差，且表达程度与预后相关后相关霍奇金淋巴瘤（霍奇金病）MLL相关融合蛋白的致病性还不清楚，推测其可能具有双重作用RTPCR检测CBFMYH11进行MRD监测显示，大部分患者在完全缓解时PCR转阴，但仍有小部分长期存活者PCR仍为阳性治疗相关的AML和MDS 4.原始细胞5%；分别产生NPMRAR，NuMARAR和PLZFRAR，STAT5bRAR融合基因临床上，具有PLZFRAR或STAT5bRAR融合基因患者对ATRA治疗不敏感，其余三种染色体易位患者经ATRA治疗可获完全缓解细胞遗传学检测仅见2%AML，22%ALL和混合性白血病及某
33、些淋巴瘤，还可见于治疗相关白血病，尤接受topoisomerase II抑制剂治疗的患者可见HOX11L2的表达水平可作为MRD检测的标志t(5;14)(q35;q32)累及MLL基因的分子异常见于5.3;q23)，t(11;17)(q23;q21)慢性粒单核细胞白血病（CMML）不典型慢性髓系白血病（aCML）幼年型粒单核细胞白血病（JMML）不能分类的MDS/MPDRQPCR还能动态观察患者治疗后BCRABL转录本水平变化情况，反映疗效。FLT3为III型受体酪氨酸激酶家族（还包括cFMS，PDGFR和cKIT）成员之一，该类受体因在造血过程中造血细胞的增殖和存活中发挥重要调控作用肠病型T
34、细胞/淋巴瘤（ITCL）突变去除了JAK2 JH2负性调控，导致该基因的持续活化，赋予细胞增殖存活优势T细胞和NK细胞系肿瘤结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤（NLPHL）BCRABLvt(9;22)(q34;q11)v1530%成人成人ALL及及35%儿童儿童ALLv 9号染色体的断裂点与号染色体的断裂点与CML相同，但相同，但22号染色体断号染色体断裂点具有异质性裂点具有异质性 v此融合蛋白此融合蛋白p190刺激细胞增殖的能力比刺激细胞增殖的能力比p210要强。要强。在转基因试验中观察到在转基因试验中观察到p190诱发的白血病具有起病诱发的白血病具有起病早、发展快和恶性程度高的特点早、发展快
35、和恶性程度高的特点vBCRABL+ALL患者预后差，患者预后差，5年存活率年存活率20%，因，因此这些患者在缓解后需进行骨髓移植治疗此这些患者在缓解后需进行骨髓移植治疗 BCRABLv对于自体或异体移植对于自体或异体移植ALL患者，移植前后患者，移植前后BCRABL的有无以及的有无以及BCRABL的转录本类型的转录本类型与预后有关与预后有关 E2APBX1vt(1;19)(q23;p13)v56%儿童儿童ALL和和3%成人成人ALL v此类患者具有高的白细胞计数，高的血清乳酸脱氢此类患者具有高的白细胞计数，高的血清乳酸脱氢酶及中枢神经系统症状，预后差，平均无病生存期酶及中枢神经系统症状，预后差
36、，平均无病生存期（DFS）仅）仅6个月，个月，3年年DFS为为20%，需给予这些患，需给予这些患者强化治疗才能获得较好的预后者强化治疗才能获得较好的预后v核型和核型和E2APBX1检测对此类患者的诊断和治疗方检测对此类患者的诊断和治疗方案的选择至关重要案的选择至关重要vE2APBX1的预后价值需更多的临床研究证实的预后价值需更多的临床研究证实 TELAML1vt(12;21)(p13;q22)v25%儿童儿童ALL，是儿童，是儿童ALL中最常见的分子异常中最常见的分子异常 v目前为止尚未在目前为止尚未在TALL，AML或或NHL中发现中发现t(12;21)，在婴儿白血病中极少报道，在成人白血病
37、患者中频在婴儿白血病中极少报道，在成人白血病患者中频率很低（率很低（2%）v此类患者发病年龄小（此类患者发病年龄小（2岁岁10岁），岁），WBC计数低计数低（50 000/L），免疫表型为前），免疫表型为前BALLv此类患者对治疗反应佳，完全缓解时间长，预后好此类患者对治疗反应佳，完全缓解时间长，预后好 TELAML1v由于由于12p和和21q末端在常规显带中很相似，因末端在常规显带中很相似，因此常规细胞遗传学方法检出率仅此常规细胞遗传学方法检出率仅0.05%，需，需应用应用FISH或或RTPCR方法提高检测阳性率方法提高检测阳性率vTEL基因重排是独立预后因素，基因重排是独立预后因素，RTP
38、CR检测检测TELAML1融合基因能将低危险度与高危险度融合基因能将低危险度与高危险度的的ALL患者区分开来。因此早期检测患者区分开来。因此早期检测TELAML1融合基因对临床预后，确定合适的融合基因对临床预后，确定合适的治疗方案都有重要意义治疗方案都有重要意义 MLL相关融合基因相关融合基因 v累及累及MLL基因的分子异常见于基因的分子异常见于5.2%AML，22%ALL和混合性白血病及某些淋巴瘤，还可见于治疗相关和混合性白血病及某些淋巴瘤，还可见于治疗相关白血病，尤接受白血病，尤接受topoisomerase II抑制剂治疗的患抑制剂治疗的患者者 vMLL基因涉及五十余种染色体易位，产生不
39、同的融基因涉及五十余种染色体易位，产生不同的融合蛋白，且每种融合蛋白都与特定的白血病表型相合蛋白，且每种融合蛋白都与特定的白血病表型相关。最常见的有关。最常见的有v t(4;11)(q21;q23)MLLAF4融合基因融合基因 ALLv t(9;11)(p22;q23)MLLAF9融合基因融合基因 AMLv t(11;19)(p13;q23)MLLENL融合基因融合基因 AML及及ALLMLL相关融合基因相关融合基因vMLL相关融合蛋白的致病性还不清楚，推测相关融合蛋白的致病性还不清楚，推测其可能具有双重作用其可能具有双重作用v 融合蛋白可能获得新的功能，促使细胞融合蛋白可能获得新的功能，促使
40、细胞转化转化v MLL发生断裂后，缺失锌指结构域的发生断裂后，缺失锌指结构域的MLL不能与不能与DNA结合，失去其转录活化功能，结合，失去其转录活化功能，使受使受MLL调节的靶基因（调节的靶基因（HOX基因）表达异基因）表达异常，也影响造血细胞的发育常，也影响造血细胞的发育 MLLAF4vt(4;11)(q21;q23)vt(4;11)的发生率在不同年龄段是不同的，在婴儿的发生率在不同年龄段是不同的，在婴儿ALL中最多见，为中最多见，为5070%，而在儿童和成人中较，而在儿童和成人中较低，分别为低，分别为2%和和36%v此类患者发病年龄低（通常此类患者发病年龄低（通常90%CML患者患者vBC
41、RABL融合蛋白（融合蛋白（p210）的酪氨酸蛋白激酶活性较正）的酪氨酸蛋白激酶活性较正常常ABL高，可能是高，可能是BCR对对ABL激酶活性调节区的作用所激酶活性调节区的作用所致致v由于由于5%CML患者为隐匿性患者为隐匿性Ph染色体，因此无染色体，因此无Ph染色体染色体CML患者还需使用更灵敏的分子检测手段如患者还需使用更灵敏的分子检测手段如FISH或或RTPCR检测检测BCRABL融合基因融合基因vRTPCR还能区分还能区分e1a2和和b2a2/b3a2二种二种BCRABL转录本，转录本，从而区分从而区分ALL患者与患者与CML急淋变患者，进而分别对两种急淋变患者，进而分别对两种不同患者
42、采用不同的治疗方案不同患者采用不同的治疗方案C M LC M LBCRABLv巢式巢式RTPCR检测检测BCRABL融合基因用于融合基因用于CML移植患者移植后移植患者移植后MRD监测。可在患者血监测。可在患者血液学复发前的液学复发前的624个月骨髓检测就呈阳性。个月骨髓检测就呈阳性。vRQPCR还能动态观察患者治疗后还能动态观察患者治疗后BCRABL转录本水平变化情况，反映疗效。转录本水平变化情况，反映疗效。GATA2基因突变基因突变v调控早期造血干细胞增殖分化的转录因子，维持造调控早期造血干细胞增殖分化的转录因子，维持造血干祖细胞的增殖和自我更新能力血干祖细胞的增殖和自我更新能力vCMLC
43、ML急变患者中新发现急变患者中新发现GATA2GATA2基因突变，基因突变，而而CMLCML慢性慢性期、加速期，期、加速期，AMLAML（M1M7M1M7），），MDSMDS，ALLALL，CLLCLL，淋巴，淋巴瘤和骨髓瘤患者，以及正常对照均未发现该突变，瘤和骨髓瘤患者，以及正常对照均未发现该突变，可见可见GATA2GATA2基因突变仅与基因突变仅与CMLCML急变相关，是急变相关，是CMLCML疾病疾病进展过程中的获得性突变。总发生率为进展过程中的获得性突变。总发生率为12.5%12.5%（5/405/40），且均造成），且均造成CMLCML急粒单变急粒单变vGATA2GATA2基因突变与
44、基因突变与CMLCML患者疾病进展和预后的关系有患者疾病进展和预后的关系有待进一步阐明待进一步阐明JAK2基因突变基因突变vJanus kinase 2v此基因突变主要见于此基因突变主要见于MPD和和MDS，另可存在，另可存在于部分于部分AML尤尤M2v突变为突变为V617Fv突变去除了突变去除了JAK2 JH2负性调控，导致该基负性调控，导致该基因的持续活化，赋予细胞增殖存活优势因的持续活化，赋予细胞增殖存活优势vJAK2可成为靶向治疗的靶点可成为靶向治疗的靶点蕈样真菌病/Sezary综合征（MF/SS）结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤（NLPHL）20%的儿童TALL1626%TALL，该
45、重组仅见于TALL，是TALL的一个有用的克隆标志调控早期造血干细胞增殖分化的转录因子，维持造血干祖细胞的增殖和自我更新能力5%（5/40），且均造成CML急粒单变CBFMYH11具有多种变异型，其中最常见的为A型，占80%巢式RTPCR可显著提高反应的特异性，增加扩增效率。inv(16)(p13;q22)及t(16;16)(p13;q22)对初发患者进行t(8;21)和AML1ETO融合基因的检测对其预后判断及治疗方案的制定相当重要连续定量AML1ETO转录本水平可判定有高复发风险的患者，以便及早治疗干预以防血液学复发难治性贫血伴贫血；3550%TALL患者存在此基因突变_而引起的_的改变。淋巴浆细胞淋巴瘤（LPL）inv(16)(p13;q22)及t(16;16)(p13;q22)（MDS-U）未见或罕见原始细胞；由于PML基因断裂点不同，产生3种不同的PMLRAR异构体单核细胞1109/L 环形铁粒幼细胞15%
