1、血栓与止血检验血栓与止血检验一、血栓与止血的筛选检验一、血栓与止血的筛选检验一期止血缺陷的筛选检验：一期止血缺陷的筛选检验：指血管壁和血小板异常所引起的止血功能缺陷。指血管壁和血小板异常所引起的止血功能缺陷。相关筛选检验：相关筛选检验：1 出血时间（出血时间（BT）2 血小板计数（血小板计数（PLT）3 血块收缩时间（血块收缩时间（CRT）4 毛细血管脆性试验（毛细血管脆性试验（CFT）又称束臂试验）又称束臂试验1.出血时间测定（出血时间测定（BT）l原理：原理：l参考值：参考值：l临床意义：临床意义：l延长延长 见于血小板数量减少或功能异常（临床常见病见于血小板数量减少或功能异常（临床常见病
2、有原发性或继发性血小板减少性紫癜、血小板无力症、有原发性或继发性血小板减少性紫癜、血小板无力症、巨血小板综合症）、凝血因子缺乏（临床常见病有巨血小板综合症）、凝血因子缺乏（临床常见病有vWD、DIC）、血管异常（临床常见病遗传性毛细血）、血管异常（临床常见病遗传性毛细血管扩张症）及药物影响（如乙酰水杨酸、潘生丁等）管扩张症）及药物影响（如乙酰水杨酸、潘生丁等）l缩短缩短 见于血栓前状态或血栓性疾病。见于血栓前状态或血栓性疾病。2.血小板计数（血小板计数（PLT）l略略3.血块收缩试验（血块收缩试验（CRT）l原理：原理：l参考值：参考值：48%64%l临床意义：临床意义：l收缩不良或不收缩收缩
3、不良或不收缩 见血小板减少和血见血小板减少和血小板无力症、严重凝血因子缺乏及凝血小板无力症、严重凝血因子缺乏及凝血障碍、红细胞增多症等。障碍、红细胞增多症等。4.毛细血管脆性试验毛细血管脆性试验(CRF)l原理：原理：l参考值：男参考值：男5个，女个，女10个个l临床意义：阳性见于遗传性毛细知管扩张症、临床意义：阳性见于遗传性毛细知管扩张症、过敏性紫癜、维生素过敏性紫癜、维生素C或或P缺乏症、原发性和缺乏症、原发性和继发性血小板减少症、血小板增多症、先天性继发性血小板减少症、血小板增多症、先天性和获得性血小板功能缺陷症、血管性血友病和获得性血小板功能缺陷症、血管性血友病一、血栓与止血的筛选检验
4、一、血栓与止血的筛选检验二期止血缺陷的筛选检验：二期止血缺陷的筛选检验：指凝血和纤溶异常所引起的止血功能缺陷。指凝血和纤溶异常所引起的止血功能缺陷。相关筛选检验：相关筛选检验：1 全血凝固时间（全血凝固时间（CT）2 活化的部分凝血活酶时间（活化的部分凝血活酶时间（APTT）3 血浆凝血酶原时间血浆凝血酶原时间(PT)1.全血凝固时间（全血凝固时间（CT）l略略2.活化部分凝血活酶时间测定（活化部分凝血活酶时间测定（APTT）l原理：在原理：在37条件下，在血浆中加入以白陶条件下，在血浆中加入以白陶土（激活剂）和脑磷脂（部分凝血活酶）悬液土（激活剂）和脑磷脂（部分凝血活酶）悬液及及Ca+后，血
5、浆凝固所需时间。后，血浆凝固所需时间。l参考值：参考值：3243秒秒l临床意义：临床意义：延长延长:见内源性凝血系统因子缺乏及见内源性凝血系统因子缺乏及II、V、X因因子、纤维蛋白原缺乏、抗凝物质增多等。子、纤维蛋白原缺乏、抗凝物质增多等。缩短缩短:见于高凝状态及血栓性疾病。见于高凝状态及血栓性疾病。3.凝血酶原测定（凝血酶原测定（PT）l原理：在血浆中加入组织凝血活酶和原理：在血浆中加入组织凝血活酶和Ca+，使凝血酶使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白所需时间。所需时间。l参考值：参考值：PT 1115秒秒 INR 0.81.5
6、l临床意义：临床意义：延长：见于外源性凝血途径因子缺乏及延长：见于外源性凝血途径因子缺乏及II、V、X因子、因子、纤维蛋白原缺乏、抗凝物质增多等。纤维蛋白原缺乏、抗凝物质增多等。缩短：见于高凝状态及血栓性疾病。缩短：见于高凝状态及血栓性疾病。一、血栓与止血的筛选检验一、血栓与止血的筛选检验纤溶活性增强的筛选检验纤溶活性增强的筛选检验相关筛选检验：相关筛选检验：1 优球蛋白溶解时间测定优球蛋白溶解时间测定（ELT）2 血清纤维蛋白（原）降解产物检测血清纤维蛋白（原）降解产物检测（FDP）3 血浆血浆D-二聚体检测（二聚体检测（D-D）1.优球蛋白溶解时间测定优球蛋白溶解时间测定（ELT）l原理：
7、血浆优球蛋白中含有纤维蛋白原、纤溶酶原和纤溶酶原活原理：血浆优球蛋白中含有纤维蛋白原、纤溶酶原和纤溶酶原活化剂等，但不含有纤溶酶抑制物。在化剂等，但不含有纤溶酶抑制物。在pH4.5时使优球蛋白沉淀，时使优球蛋白沉淀，经离心除去纤溶抑制物，并将此沉淀经离心除去纤溶抑制物，并将此沉淀(即优球蛋白即优球蛋白)溶于缓冲液中，溶于缓冲液中，再加入适量的钙溶液再加入适量的钙溶液(加钙法加钙法)或凝血酶或凝血酶(酶法酶法)使其凝固，观察凝使其凝固，观察凝块完全溶解所需时间，即为优球蛋白溶解时间。块完全溶解所需时间，即为优球蛋白溶解时间。l参考值：加钙法：参考值：加钙法：1298+41.1minl 加酶法：加
8、酶法：l57.5+59.1minl临床意义临床意义 缩短缩短(小于小于70min)：表明纤溶活性增强，见于原发性和继发性纤：表明纤溶活性增强，见于原发性和继发性纤溶亢进。溶亢进。延长：表明纤溶活性减低，见于血栓前状态、血栓形成性疾病和延长：表明纤溶活性减低，见于血栓前状态、血栓形成性疾病和应用抗纤溶药物等。应用抗纤溶药物等。2.血清纤维蛋白（原）降解产物检测血清纤维蛋白（原）降解产物检测(FDP）原理：胶乳凝集法原理：胶乳凝集法 在血清中加入用特异性抗纤维蛋白在血清中加入用特异性抗纤维蛋白(原原)D、E片段抗体标记的胶乳颗粒悬液片段抗体标记的胶乳颗粒悬液,与血清中与血清中FDP发生抗原抗体反应
9、发生抗原抗体反应,导致胶乳颗粒凝集。导致胶乳颗粒凝集。l参考值：参考值：5mg/Ll临床意义：增高临床意义：增高 见于原发性纤溶症、见于原发性纤溶症、DIC、恶性肿瘤、恶性肿瘤、肝脏疾病、肾脏疾病、肺梗死、肝脏疾病、肾脏疾病、肺梗死、DVT、溶栓治疗、白、溶栓治疗、白血病、器官移植的排斥反应等。血病、器官移植的排斥反应等。3.D-二聚体测定（二聚体测定（DD）l原理：胶乳凝集法原理：胶乳凝集法 ELISA法法l参考值：参考值：200 g/Ll临床意义：临床意义：DD是交联纤维蛋白降解产物是交联纤维蛋白降解产物 是原发性纤溶与继发性纤溶鉴别指标是原发性纤溶与继发性纤溶鉴别指标 是溶栓治疗监测指标
10、是溶栓治疗监测指标增高增高 见于继发性纤溶、血栓形成及临床出血。见于继发性纤溶、血栓形成及临床出血。二、血管壁（内皮）检验二、血管壁（内皮）检验相关检验：相关检验：1 血管性血友病因子抗原测定（血管性血友病因子抗原测定（VwF:Ag）2 血浆内皮素血浆内皮素-1检测检测（ET-1）3 血浆血栓调节蛋白抗原测定血浆血栓调节蛋白抗原测定(TM:Ag)4 血浆血浆6-酮酮-前列腺素前列腺素F1a测定测定（6-k-PGF1a）1.血管性血友病因子抗原测定（血管性血友病因子抗原测定（VwF:Ag）l原理：免疫火箭电泳法原理：免疫火箭电泳法l参考值：参考值：94.1%32.5%l临床意义：临床意义：减低减
11、低 见于血管性血友病见于血管性血友病 增高增高 见于血栓性疾病（心肌梗死、心绞痛、脑梗塞见于血栓性疾病（心肌梗死、心绞痛、脑梗塞等）、肾病（急或慢性肾炎、肾病综合症）及妊娠高等）、肾病（急或慢性肾炎、肾病综合症）及妊娠高血压综合症、糖尿病、大手术后等。血压综合症、糖尿病、大手术后等。2.血浆内皮素血浆内皮素-1检测检测（ET-1）l原理：原理：ELISA法法l参考值：参考值：5ng/Ll临床意义：临床意义：增高：见于心肌梗死、心绞痛、肺动脉高压、增高：见于心肌梗死、心绞痛、肺动脉高压、原发性高血压、高脂血症、缺血性脑卒中、肾原发性高血压、高脂血症、缺血性脑卒中、肾功能衰竭、原发性醛固酮增多症、
12、支气管哮喘、功能衰竭、原发性醛固酮增多症、支气管哮喘、休克等。休克等。3.血浆血栓调节蛋白抗原测定血浆血栓调节蛋白抗原测定(TM:Ag)l原理：放射免疫法原理：放射免疫法l参考值：参考值：2035g/Ll临床意义：临床意义：l增高增高 见于糖尿病、系统性红斑狼疮、见于糖尿病、系统性红斑狼疮、DIC、血栓性血小板减少性紫癜及部分脑血栓、急性血栓性血小板减少性紫癜及部分脑血栓、急性心肌梗死、肺栓塞、闭塞性脉管炎患者。心肌梗死、肺栓塞、闭塞性脉管炎患者。4.血浆血浆6-酮酮-前列腺素前列腺素F1a测定测定（6-k-PGF1a）l原理：原理：ELISA法法l参考值：参考值：17.97.2ng/Ll临床
13、意义：临床意义：l减少减少 见于糖尿病、急性心肌梗死、心绞痛、动脉粥见于糖尿病、急性心肌梗死、心绞痛、动脉粥样硬化、脑血管病变、肿瘤转移、肾小球病变、周围样硬化、脑血管病变、肿瘤转移、肾小球病变、周围血管血栓性血小板减少性紫癜等血管血栓性血小板减少性紫癜等三、血小板相关检测三、血小板相关检测l1.血小板生存时间血小板生存时间(PST)测定测定l2.血小板相关免疫球蛋白测定（血小板相关免疫球蛋白测定（PAIg）l3.血小板粘附试验（血小板粘附试验（PAdT）l4.血小板聚集试验（血小板聚集试验（PAgT）l5.血小板第血小板第3因子有效性因子有效性(PF3aT)测定测定l6.血小板膜糖蛋白血小板
14、膜糖蛋白(GP)测定测定l7.血小板活化指标测定血小板活化指标测定1.血小板生存时间血小板生存时间(PST)测定测定l原理原理:丙二醛丙二醛(MDA)法与血栓烷法与血栓烷B2(TXB2)法法 由于阿司匹林不可由于阿司匹林不可逆性抑制血小板环氧化酶活性，使逆性抑制血小板环氧化酶活性，使MDA与与TXB2合成受抑，故血合成受抑，故血小板小板MDA与与TXB2含量减低。与此同时因新生血小板未受阿司匹含量减低。与此同时因新生血小板未受阿司匹林的抑制，故其林的抑制，故其MDA与与TXB2含量正常。因此观察口服阿司匹林含量正常。因此观察口服阿司匹林后血小板后血小板MDA与与TXB2的恢复曲线可以推断出血小
15、板生存时间。的恢复曲线可以推断出血小板生存时间。l 参考值参考值:MDA法法 PST为为10.84.2d;TXB2法法 PST为为9.31.7dl临床意义临床意义:缩短：见于血小板破坏增多性疾病：如特发性血小板减少性紫癜、缩短：见于血小板破坏增多性疾病：如特发性血小板减少性紫癜、药物免疫性血小板减少性紫癜、输血后紫癜、脾功能亢进、系统药物免疫性血小板减少性紫癜、输血后紫癜、脾功能亢进、系统性红斑狼疮；血小板消耗过多性疾病：如性红斑狼疮；血小板消耗过多性疾病：如DIC、血栓性血小板减、血栓性血小板减少性紫癜少性紫癜(TTP)、溶血尿毒症综合征、溶血尿毒症综合征(HUS)；血栓性疾病：如心；血栓性
16、疾病：如心肌梗死、心绞痛、糖尿病伴血管病变、深静脉血栓形成、肺梗死、肌梗死、心绞痛、糖尿病伴血管病变、深静脉血栓形成、肺梗死、妊高征、恶性肿瘤等。妊高征、恶性肿瘤等。2.血小板相关免疫球蛋白测定（血小板相关免疫球蛋白测定（PAIg）l原理：原理：ELISA法法l参考值：参考值：PAIgG 078.8ng/107血小板血小板 PAIgA 02.0ng/107血小板血小板 PAIgM 07.0ng/107血小板血小板 PAC3 018ng/107血小板血小板l临床意义临床意义:增高增高 见见ITP、SLE、同种免疫性血小板减、同种免疫性血小板减少性紫癜、输血后紫癜、药物免疫性血小板减少性紫少性紫癜
17、、输血后紫癜、药物免疫性血小板减少性紫癜、恶性淋巴瘤、慢性活动性肝炎及淋巴细胞白血病、癜、恶性淋巴瘤、慢性活动性肝炎及淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤、多发性骨髓瘤、Evan综合症、良性单株丙球蛋白血症综合症、良性单株丙球蛋白血症等。等。3.血小板粘附试验（血小板粘附试验（PAdT）l原理：血小板具有粘附于受损血管表面或异物表面的特性，测定原理：血小板具有粘附于受损血管表面或异物表面的特性，测定一定量血液与一定异物面积接触前后血小板数，即可求出血小板一定量血液与一定异物面积接触前后血小板数，即可求出血小板粘附率。粘附率。l参考值：玻璃柱法：参考值：玻璃柱法：62.5%5.61%玻璃球旋转法：玻璃球
18、旋转法：34.9%5.95%玻璃滤器法：玻璃滤器法：31.9%10.9%l临床意义：临床意义：增高增高:见于高凝状态和血栓性疾病见于高凝状态和血栓性疾病,如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、深静脉血栓、肾小球病变、妊娠高血压综合症、口服避孕药、切深静脉血栓、肾小球病变、妊娠高血压综合症、口服避孕药、切脾术后。脾术后。减低减低:见于血小板无力症、见于血小板无力症、vWD、巨血小板综合症、巨血小板综合症、MDS、尿、尿毒症、异常纤维蛋白原血症、肝硬化、服用抗血小板药物等。毒症、异常纤维蛋白原血症、肝硬化、服用抗血小板药物等。4.血小板聚集试验（血小板聚集试验（PAgT）l原理：
19、比浊法原理：比浊法 加入诱导剂前后，富含血小板血浆浊加入诱导剂前后，富含血小板血浆浊度变化。度变化。l参考值：参考值：ADP 0.5mmol/L 3575%l临床意义：临床意义：增高：见于高凝状态和血栓性疾病增高：见于高凝状态和血栓性疾病 急性心肌梗死、急性心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合症、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合症、深部静脉血栓等。深部静脉血栓等。减低：见于血小板无力症、巨血小板综合症、纤维蛋减低：见于血小板无力症、巨血小板综合症、纤维蛋白原降低、尿毒症、肝硬化、骨髓增生性疾病、急性白原降低、尿毒症、肝硬化、骨髓增生性疾病、急性白血病、服用抗血小板药物
20、等。白血病、服用抗血小板药物等。5.血小板第血小板第3因子有效性因子有效性(PF3aT)测定测定 l原理原理:PF3是血小板在活化过程中所形成的一种膜表面磷脂是血小板在活化过程中所形成的一种膜表面磷脂(即磷即磷脂酰丝氨酸脂酰丝氨酸)，是凝血的重要成分。当，是凝血的重要成分。当PF3缺乏时凝血即有异常。缺乏时凝血即有异常。本试验将正常人和病人富血小板血浆本试验将正常人和病人富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆和贫血小板血浆(PPP)交叉配合，以白陶土作活化剂，促使交叉配合，以白陶土作活化剂，促使PF3形成，再测定各组标本形成，再测定各组标本的复钙时间，比较各组时差，从而得知的复钙时间，比较各组时
21、差，从而得知PF3是否有缺陷。是否有缺陷。l参考值参考值:第第l组比第组比第2组的结果延长不超过组的结果延长不超过5s。若延长超过。若延长超过5s，则，则为为PF3有效性减低。第有效性减低。第3组与第组与第4组为对照，在血友病时第组为对照，在血友病时第3组亦组亦会延长。会延长。l临床意义临床意义:PF3aT减低减低 见于先天性见于先天性PF3缺乏症、血小板无力症、缺乏症、血小板无力症、巨大血小板综合征以及肝硬化、尿毒症、异常蛋白血症、骨髓增巨大血小板综合征以及肝硬化、尿毒症、异常蛋白血症、骨髓增殖异常综合征、殖异常综合征、SLE、血小板减少症、急性白血病、再生障碍性、血小板减少症、急性白血病、
22、再生障碍性贫血以及某些药物的影响。贫血以及某些药物的影响。6.血小板膜糖蛋白血小板膜糖蛋白(GP)测定测定l原理原理:用抗人血小板膜用抗人血小板膜GPIb、GPlIb和和GPlla单克隆抗单克隆抗体与被检者血小板膜相应糖蛋白的特异免疫反应的原体与被检者血小板膜相应糖蛋白的特异免疫反应的原理，通过放射免疫分析可以定量测定血小板膜相应理，通过放射免疫分析可以定量测定血小板膜相应GP的含量。的含量。l参考值参考值:每个血小板含每个血小板含GPIb分子数为分子数为(1.540.49)104；GPbGP a分子数为分子数为(5.451.19)104l临床意义临床意义:GPIb缺乏缺乏:见于巨大血小板综合
23、征。见于巨大血小板综合征。GPbGPa缺乏缺乏:见于血小板无力症见于血小板无力症7.血小板活化指标测定血小板活化指标测定血小板活化指标包括血小板活化指标包括:血浆血浆-血小板球蛋白血小板球蛋白(-TG)、血小、血小板板a颗粒膜蛋白颗粒膜蛋白140(GMP-140)和血小板第和血小板第4因子因子(PF4)l原理：原理：ELISA法法l参考值：参考值：-TG 16.4 9.8g/L GMP-140（1.61 0.72）X1010分子数分子数/L PF4 3.2 2.3 g/L l临床意义：临床意义：见于高凝状态和血栓性疾病，表示血小板被激活及释见于高凝状态和血栓性疾病，表示血小板被激活及释放反应亢
24、进，对缺血性心、脑血管病变的早期诊断及放反应亢进，对缺血性心、脑血管病变的早期诊断及糖尿病血管病变、尿毒症预后有重要意义。糖尿病血管病变、尿毒症预后有重要意义。四、凝血因子检验四、凝血因子检验常用血液制剂中所含有的因子常用血液制剂中所含有的因子1.正常混合血浆正常混合血浆:含有除含有除、外所有凝血因子外所有凝血因子2.正常人血清正常人血清:含含、乏乏、3.正常人贮存血浆正常人贮存血浆(正常人血浆于正常人血浆于37中贮存中贮存24小时或于小时或于冰箱贮存冰箱贮存2周周):乏乏、4.正常人贮存血清正常人贮存血清(正常人血清于正常人血清于4贮存贮存1周周):乏乏、5.正常人硫酸钡吸附血浆正常人硫酸钡
25、吸附血浆:乏乏、6.正常吸附血清正常吸附血清:含含、四、凝血因子检验四、凝血因子检验1.简易凝血活酶生成试验（简易凝血活酶生成试验（STGT）及纠正试）及纠正试验验2.血浆因子血浆因子、促凝活性检测促凝活性检测3.血浆因子血浆因子、促凝活性检测促凝活性检测4.凝血因子凝血因子定性试验和亚基抗原检测定性试验和亚基抗原检测1.简易凝血活酶生成（简易凝血活酶生成（STGT）及纠正试验）及纠正试验l原理：原理：STGT是用受检者稀释全血溶液作为试验所需是用受检者稀释全血溶液作为试验所需的全部凝血因子的来源，自身红细胞溶解产物替代的全部凝血因子的来源，自身红细胞溶解产物替代 PF3，按一定时间加入基质血
26、浆（提供凝血酶和纤维，按一定时间加入基质血浆（提供凝血酶和纤维蛋白原），测定凝血活酶生成所需时间，以检查内源蛋白原），测定凝血活酶生成所需时间，以检查内源凝血系统凝血活酶生成有无障碍。凝血系统凝血活酶生成有无障碍。l 纠正试验：在纠正试验：在STGT延长的受检稀释全血溶血液中分延长的受检稀释全血溶血液中分别加入别加入1/100容量的正常硫酸钡吸附血浆、正常血清容量的正常硫酸钡吸附血浆、正常血清和正常新鲜血浆，分别测定正常基质血浆的最短凝固和正常新鲜血浆，分别测定正常基质血浆的最短凝固时间，以确定内源性凝血活酶生成缺陷的因子。时间，以确定内源性凝血活酶生成缺陷的因子。l2、参考值：最短的凝固时间
27、小于、参考值：最短的凝固时间小于15S（10-14S）l临床意义：检测凝血因子缺乏及抗凝物质存在。临床意义：检测凝血因子缺乏及抗凝物质存在。2.血浆因子血浆因子、促凝活性检测促凝活性检测l原理：将受检血浆分别与乏因子原理：将受检血浆分别与乏因子、基质血浆混基质血浆混合，再加免脑粉浸出液和钙溶液，分别作血浆凝血酶原时间合，再加免脑粉浸出液和钙溶液，分别作血浆凝血酶原时间测定。将受检者血浆测定结果与正常人新鲜混合血浆比较，测定。将受检者血浆测定结果与正常人新鲜混合血浆比较，分别计算各自的因子分别计算各自的因子：C、：C、：C、：C促凝活促凝活性。性。l参考值：参考值：F：C:97.7%16.7%F
28、：C:102.4%30.9%F ：C:103%17.3%F ：C:103%19.0%l临床意义：本试验是继外源凝血系统筛选试验异常，进而直临床意义：本试验是继外源凝血系统筛选试验异常，进而直接检测诸因子促凝活性的更更敏感、更可靠指标。增高见血接检测诸因子促凝活性的更更敏感、更可靠指标。增高见血栓性疾病栓性疾病;减低见肝病变、维生素减低见肝病变、维生素K缺乏、缺乏、DIC、口服抗凝剂、口服抗凝剂、抑制物存在。抑制物存在。3.血浆因子血浆因子、促凝活性检测促凝活性检测l原理：受检血浆中分别加入乏原理：受检血浆中分别加入乏F、的基质血浆、白陶土的基质血浆、白陶土脑磷脂悬液和钙溶液，分别记录开始出现纤
29、维蛋白丝所需的时间。脑磷脂悬液和钙溶液，分别记录开始出现纤维蛋白丝所需的时间。从各自的标准曲线中，分别计算出受检血浆中从各自的标准曲线中，分别计算出受检血浆中F：C、：C、：C、：C相当于正常人的百分率（相当于正常人的百分率（%）l参考值：参考值：F：C:103%25.7%F ：C:98.1%30.4%F：C:100%18.4%F：C:92.4%20.7%l临床意义：本试验是在内源凝血筛选试验的基础上，省略以往逐级临床意义：本试验是在内源凝血筛选试验的基础上，省略以往逐级筛选和纠正试验，直接检测各自相应凝血因子促活性的更为理想和筛选和纠正试验，直接检测各自相应凝血因子促活性的更为理想和直观的实
30、验方法，同时也是血友病评价和分型的重要指标之一。直观的实验方法，同时也是血友病评价和分型的重要指标之一。增高见血栓性疾病增高见血栓性疾病;减低见血友病、血管性血友病、肝病变、维生素减低见血友病、血管性血友病、肝病变、维生素K缺乏、缺乏、DIC、口服抗凝剂、抑制物存在。、口服抗凝剂、抑制物存在。4.凝血因子凝血因子定性试验和亚基抗原检测定性试验和亚基抗原检测l(1)凝血因子凝血因子定性试验定性试验l原理：受检血浆加入钙离子，使纤维蛋白原转变为纤原理：受检血浆加入钙离子，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝块，将凝块置维蛋白凝块，将凝块置5mol/L尿素溶液中，凝块溶解尿素溶液中，凝块溶解表明受检血浆缺乏
31、因子表明受检血浆缺乏因子，反之，凝块不溶，则表，反之，凝块不溶，则表明受检血浆不缺乏因子明受检血浆不缺乏因子。l参考值：参考值：24小时凝块不溶小时凝块不溶l临床意义：见先天性和后天性因子临床意义：见先天性和后天性因子缺乏，肝病变、缺乏，肝病变、系统性红斑狼疮、系统性红斑狼疮、DIC、原发纤溶、转移性肝癌、恶、原发纤溶、转移性肝癌、恶性淋巴瘤等。性淋巴瘤等。4.凝血因子凝血因子定性试验和亚基抗原检测定性试验和亚基抗原检测l(2)凝血因子凝血因子亚基抗原检测亚基抗原检测l原理：免疫火箭电泳法。原理：免疫火箭电泳法。l参考值：参考值：Fa Ag:100.4%12.9%l F Ag:98.8%12.
32、5%l临床意义：先天性因子临床意义：先天性因子缺乏症缺乏症 纯合子型纯合子型Fa Ag1%，F Ag轻度减轻度减低；杂合子型低；杂合子型Fa Ag50%，F Ag正常。正常。后天性因子后天性因子缺乏症，见肝病变、原发纤溶、急性缺乏症，见肝病变、原发纤溶、急性心梗、急性白血病，心梗、急性白血病，ITP、DIC、SLE、恶性淋巴瘤等。、恶性淋巴瘤等。五五.生理性抗凝蛋白检验生理性抗凝蛋白检验l1.抗凝血酶检测抗凝血酶检测l2.蛋白蛋白C检测检测 l3.血浆蛋白血浆蛋白S抗原检测抗原检测l4.组织因子途径抑制物检测组织因子途径抑制物检测1.抗凝血酶检测抗凝血酶检测（1）血浆抗凝血酶活性检测）血浆抗凝
33、血酶活性检测l原理：发色底物法原理：发色底物法 受检血浆加入过量凝血酶，使受检血浆加入过量凝血酶，使AT与凝血酶形成与凝血酶形成1：1复合物，多余的凝血酶作用于发色复合物，多余的凝血酶作用于发色底物底物S-2238，释出显色基团对硝基苯胺，其显色深浅，释出显色基团对硝基苯胺，其显色深浅与多余的凝血酶呈正相关，而与与多余的凝血酶呈正相关，而与AT呈负相关。呈负相关。l参考值：参考值：108.5%5.3%l临床意义：临床意义：增高增高 见血友病、和再障等疾病的急性出血期及口服见血友病、和再障等疾病的急性出血期及口服抗凝药物治疗。抗凝药物治疗。降低降低 见先天和获得性见先天和获得性AT缺乏症，后者见
34、血栓前状态、缺乏症，后者见血栓前状态、血栓性疾病和肝病、肾病综合症等。血栓性疾病和肝病、肾病综合症等。1.抗凝血酶检测抗凝血酶检测l(2）血浆抗凝血酶抗原检测）血浆抗凝血酶抗原检测l原理：免疫火箭电泳法。原理：免疫火箭电泳法。l参考值：参考值：0.29 0.06g/Ll临床意义：临床意义：增高增高 见血友病、和再障等疾病的急性出血期及口服见血友病、和再障等疾病的急性出血期及口服抗凝药物治疗。抗凝药物治疗。降低降低 见先天和获得性见先天和获得性AT缺乏症，后者见血栓前状态、缺乏症，后者见血栓前状态、血栓性疾病和肝病、肾病综合症等。血栓性疾病和肝病、肾病综合症等。2.蛋白蛋白C检测检测l（1）血浆
35、蛋白）血浆蛋白C活性检测活性检测l原理：发色底物法原理：发色底物法 受检血浆加入蛋白受检血浆加入蛋白C 激活剂，蛋激活剂，蛋白白C被激活为活化蛋白被激活为活化蛋白C，作用于发色底物释出显色，作用于发色底物释出显色基团对硝基苯胺，其显色深浅与蛋白基团对硝基苯胺，其显色深浅与蛋白C含量呈平行关含量呈平行关系。系。l参考值：参考值：108.24%13.18%l临床意义：临床意义：增高增高 见冠心病、糖尿病、肾病综合症、妊娠后期、见冠心病、糖尿病、肾病综合症、妊娠后期、炎症及疾病急性期。炎症及疾病急性期。降低降低 见先天和获得性蛋白见先天和获得性蛋白C 缺陷，后者见缺陷，后者见DIC、肝、肝功能不全、
36、手术后、口服双香豆素抗凝剂等。功能不全、手术后、口服双香豆素抗凝剂等。2.蛋白蛋白C检测检测l(2）血浆蛋白）血浆蛋白C抗原检测抗原检测l原理：免疫火箭电泳法。原理：免疫火箭电泳法。l参考值：参考值：102.5 20.1%l临床意义：临床意义：增高增高 见冠心病、糖尿病、肾病综合症、妊娠后期、见冠心病、糖尿病、肾病综合症、妊娠后期、炎症及疾病急性期。炎症及疾病急性期。降低降低 见先天和获得性蛋白见先天和获得性蛋白C 缺陷，后者见缺陷，后者见DIC、肝、肝功能不全、手术后、口服双香豆素抗凝剂等。功能不全、手术后、口服双香豆素抗凝剂等。3.血浆蛋白血浆蛋白S抗原检测抗原检测l原理：免疫火箭电泳法。
37、原理：免疫火箭电泳法。l参考值：参考值：TPS：96.6 9.8%FPS：40.4 11.6%l临床意义：临床意义：降低降低 见先天和获得性蛋白见先天和获得性蛋白S 缺乏症，后者缺乏症，后者见肝疾病、口服抗凝剂等。见肝疾病、口服抗凝剂等。4.组织因子途径抑制物抗原检测组织因子途径抑制物抗原检测原理：原理：ELISA法。法。l参考值：参考值：97.5 26.6 g/Ll临床意义：临床意义：增高增高 生理性见老年人和妊娠，病理性见慢生理性见老年人和妊娠，病理性见慢性肾功能衰竭期。性肾功能衰竭期。降低降低 见先天和获得性组织因子途径抑制物见先天和获得性组织因子途径抑制物缺乏，前者易患血栓性疾病，后者
38、常见缺乏，前者易患血栓性疾病，后者常见DIC、大手术、脓毒血症。大手术、脓毒血症。六六.病理性抗凝物质检验病理性抗凝物质检验l1.复钙交叉试验复钙交叉试验l2.凝血酶时间检测及纠正试验凝血酶时间检测及纠正试验l3.普通肝素和低相对分子质量肝素检测普通肝素和低相对分子质量肝素检测l4.凝血因子凝血因子抑制物检测抑制物检测l5.狼疮抗凝物质的筛选试验和确诊试验狼疮抗凝物质的筛选试验和确诊试验1.复钙交叉试验复钙交叉试验l原理：受检血浆复钙时间延长不能被原理：受检血浆复钙时间延长不能被1/10量正量正常血浆纠正，提示受检血浆中存在抗凝物质。常血浆纠正，提示受检血浆中存在抗凝物质。l参考值：参考值：2
39、.2 3.8minl临床意义：临床意义：延长延长 见反复输血的血友病、肝病、系统性红见反复输血的血友病、肝病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎及胰腺疾病。斑狼疮、类风湿性关节炎及胰腺疾病。2.凝血酶时间检测及纠正试验凝血酶时间检测及纠正试验l（1）凝血酶时间检测）凝血酶时间检测l原理：受检血浆中加入凝血酶后，血浆凝固所需时间。原理：受检血浆中加入凝血酶后，血浆凝固所需时间。l参考值：参考值：16 18秒秒l临床意义：临床意义：延长延长 超过正常对照超过正常对照3秒以上，见秒以上，见DIC、低或无纤维蛋、低或无纤维蛋白原血症、原发纤溶、肝病、肝素及肝素样抗凝物质白原血症、原发纤溶、肝病、肝素及肝素
40、样抗凝物质增多、增多、FDP增多。增多。缩短缩短 见异常蛋白血症、巨球蛋白血症。见异常蛋白血症、巨球蛋白血症。2.凝血酶时间检测及纠正试验凝血酶时间检测及纠正试验l（2）凝血酶纠正试验时间检测）凝血酶纠正试验时间检测l原理：甲苯胺蓝可纠正肝素的抗凝作用，在凝血酶时原理：甲苯胺蓝可纠正肝素的抗凝作用，在凝血酶时间延长受检血浆中加入甲苯胺蓝后，血浆凝血酶时间间延长受检血浆中加入甲苯胺蓝后，血浆凝血酶时间恢复正常或明显缩短，则表示受检血浆中肝素或肝素恢复正常或明显缩短，则表示受检血浆中肝素或肝素样物质增多。样物质增多。l参考值：参考值：TT5秒秒l临床意义：临床意义：血中类肝素物质增多，见于过敏性休
41、克、严重肝病血中类肝素物质增多，见于过敏性休克、严重肝病DIC、使用氮芥及放疗后患者。、使用氮芥及放疗后患者。3.普通肝素和低相对分子质量肝素检测普通肝素和低相对分子质量肝素检测l原理：发色底物法。原理：发色底物法。l参考值：参考值：0 U/Ll临床意义：临床意义：用于肝素防治过程中用量的监测。用于肝素防治过程中用量的监测。4.凝血因子凝血因子抑制物检测抑制物检测l原理：原理：Bethesda法。法。l参考值：参考值：F：C:100%l临床意义：临床意义：凝血因子凝血因子抑制物出现见于反复输血或接受抑制物出现见于反复输血或接受抗血友病球蛋白治疗的血友病抗血友病球蛋白治疗的血友病A患者，也可见患
42、者，也可见于某些免疫性疾病和妊娠期妇女。于某些免疫性疾病和妊娠期妇女。5.狼疮抗凝物质的筛选试验和确诊试验狼疮抗凝物质的筛选试验和确诊试验l原理：改良原理：改良Russell蝰蛇毒稀释法。蝰蛇毒稀释法。l参考值：参考值：0.8 1.2 l临床意义：临床意义：狼疮抗凝物质阳性见于狼疮抗凝物质阳性见于SLE、自发性流产、自发性流产、也可见于某些血栓形成性疾病。也可见于某些血栓形成性疾病。七七.纤溶活性检验纤溶活性检验1.血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验2.血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测3.血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测4.
43、纤溶酶原的检测纤溶酶原的检测5.血浆血浆a2-抗纤溶酶的检测抗纤溶酶的检测1.血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验l原理：血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（原理：血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（plasma protamine paracoagulation 3P），在凝血酶的作用下，纤维蛋白原释放），在凝血酶的作用下，纤维蛋白原释放出肽出肽A、B后转变后转变FM，Fib在在PL的作用下产生的作用下产生FDP，FM与与FDP可可形成可溶性复合物，硫酸鱼精蛋白可使该复合物的形成可溶性复合物，硫酸鱼精蛋白可使该复合物的FM游离，游离，FM可自行聚合呈肉眼可见的纤维网状、絮状或胶冻状，此为阳性
44、反可自行聚合呈肉眼可见的纤维网状、絮状或胶冻状，此为阳性反应结果。应结果。l参考值：正常人为阴性参考值：正常人为阴性l 临床意义：临床意义：l3P试验对继发性纤溶有较好的特异性，但敏感性差。建议用试验对继发性纤溶有较好的特异性，但敏感性差。建议用D二二聚体来代替聚体来代替3P试验。试验。l阳性：阳性：DIC早、中期，外科大手术后、严重感染、人工流产、分早、中期，外科大手术后、严重感染、人工流产、分娩、肝病变以及呕血、咯血等。娩、肝病变以及呕血、咯血等。l阴性：正常人、阴性：正常人、DIC晚期和原发性纤溶。晚期和原发性纤溶。2.血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测(1)血
45、浆组织型纤溶酶原活化剂活性检测血浆组织型纤溶酶原活化剂活性检测l原理：发色底物法。原理：发色底物法。l参考值：参考值：300 600U/mll临床意义：临床意义：增高增高 纤溶亢进（原发和继发），见纤溶亢进（原发和继发），见DIC、药、药物治疗。物治疗。减低减低 纤溶减低，见高凝状态、血栓性疾病、纤溶减低，见高凝状态、血栓性疾病、高脂血症、手术及口服避孕药。高脂血症、手术及口服避孕药。2.血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测(2)血浆组织型纤溶酶原活化剂抗原检测血浆组织型纤溶酶原活化剂抗原检测l原理：原理：ELISA法。法。l参考值：参考值：1.5 10.5g/Ll临床
46、意义：临床意义：增高增高 纤溶亢进（原发和继发），见纤溶亢进（原发和继发），见DIC、药、药物治疗。物治疗。减低减低 纤溶减低，见高凝状态、血栓性疾病、纤溶减低，见高凝状态、血栓性疾病、高脂血症、手术及口服避孕药。高脂血症、手术及口服避孕药。3.血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测(1)血浆纤溶酶原活化抑制剂活性检测血浆纤溶酶原活化抑制剂活性检测l原理：发色底物法。原理：发色底物法。l参考值：参考值：100 1000U/Ll临床意义：临床意义：增高增高 见高凝状态、血栓性疾病见见高凝状态、血栓性疾病见DIC、药物、药物治疗。治疗。减低减低 见纤溶亢进（原发和继发见纤溶亢进（
47、原发和继发)。3.血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测(2)血浆纤溶酶原活化抑制剂抗原检测血浆纤溶酶原活化抑制剂抗原检测l原理：原理：SDS-PAGE凝胶密度法。受检血浆中加入过量凝胶密度法。受检血浆中加入过量PA,与与PAI形成复合物形成复合物,于于SDS凝胶板上电泳、染色、凝胶板上电泳、染色、扫描。扫描。l参考值：参考值：1 U/mll临床意义：临床意义：增高增高 见高凝状态、血栓性疾病见见高凝状态、血栓性疾病见DIC、药物治疗。、药物治疗。减低减低 见纤溶亢进（原发和继发见纤溶亢进（原发和继发)4.纤溶酶原的检测纤溶酶原的检测(1)血浆纤溶酶原活性检测血浆纤溶酶原活性
48、检测l原理：发色底物法。原理：发色底物法。l参考值：参考值：75%140%l临床意义：临床意义：增高增高 表示纤溶活性减低，见高凝状态、血栓性疾病。表示纤溶活性减低，见高凝状态、血栓性疾病。减低减低 表示纤溶活性增高，见表示纤溶活性增高，见PLG缺陷症、纤溶亢进缺陷症、纤溶亢进（原发和继发（原发和继发)、肝病等获得性纤溶酶原缺乏症。、肝病等获得性纤溶酶原缺乏症。4.纤溶酶原的检测纤溶酶原的检测(2)血浆纤溶酶原抗原检测血浆纤溶酶原抗原检测l原理：原理：ELISA法。法。l参考值：参考值：0.22 0.03g/Ll临床意义：临床意义：增高增高 表示纤溶活性减低，见高凝状态、血栓性疾病。表示纤溶活
49、性减低，见高凝状态、血栓性疾病。减低减低 表示纤溶活性增高，见表示纤溶活性增高，见PLG缺陷症、纤溶亢进缺陷症、纤溶亢进（原发和继发（原发和继发)、肝病等获得性纤溶酶原缺乏症。、肝病等获得性纤溶酶原缺乏症。5.血浆血浆a2-抗纤溶酶的检测抗纤溶酶的检测(1)血浆血浆a2-抗纤溶酶活性检测抗纤溶酶活性检测l原理：发色底物法。原理：发色底物法。l参考值：参考值：800 1200 U/Ll临床意义：临床意义：增高增高 见动、静脉血栓形成、恶性肿瘤、分娩见动、静脉血栓形成、恶性肿瘤、分娩后等。后等。减低减低 见肝病、见肝病、DIC、手术后、先天性、手术后、先天性a2-抗纤抗纤溶酶缺乏症。溶酶缺乏症。5
50、.血浆血浆a2-抗纤溶酶的检测抗纤溶酶的检测(2)血浆血浆a2-抗纤溶酶抗原检测抗纤溶酶抗原检测l原理：原理：ELISA法。法。l参考值：参考值：1500 300 U/Ll临床意义：临床意义：增高增高 见动、静脉血栓形成、恶性肿瘤、分娩见动、静脉血栓形成、恶性肿瘤、分娩后等。后等。减低减低 见肝病、见肝病、DIC、手术后、先天性、手术后、先天性a2-抗纤抗纤溶酶缺乏症。溶酶缺乏症。八八.血液流变学检测血液流变学检测l1.全血粘度测定全血粘度测定l2.血浆粘度测定血浆粘度测定l3.红细胞变形性测定红细胞变形性测定l4.红细胞电泳检测红细胞电泳检测1.全血粘度测定全血粘度测定l原理：毛细管式粘度计
