1、胰岛素和肾上腺素对血糖胰岛素和肾上腺素对血糖 浓度的影响浓度的影响 了解血糖测定的原理和方法了解血糖测定的原理和方法 【目的目的】 促进肌促进肌、脂肪组织等的细胞膜葡萄糖载体将葡萄糖转脂肪组织等的细胞膜葡萄糖载体将葡萄糖转 运入细胞运入细胞。 通过增强磷酸二酯酶活性通过增强磷酸二酯酶活性,降低降低cAMP水平水平,从而使糖从而使糖 原合酶活性增强原合酶活性增强、磷酸化酶活性降低磷酸化酶活性降低,加速糖原合成加速糖原合成、 抑制糖原分解抑制糖原分解。 通过激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶而使丙酮酸脱氢酶激活通过激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶而使丙酮酸脱氢酶激活, 加速丙酮酸氧化为乙酰加速丙酮酸氧化为乙酰CoA,从
2、而加快糖的有氧氧化从而加快糖的有氧氧化。 抑制肝内糖异生抑制肝内糖异生。这是通过抑制磷酸烯醇式丙酮酸羧这是通过抑制磷酸烯醇式丙酮酸羧 激酶的合成以及促进氨基酸进入肌组织并合成蛋白质激酶的合成以及促进氨基酸进入肌组织并合成蛋白质, 减少肝糖异生的原料减少肝糖异生的原料。 通过抑制脂肪组织内的激素敏感性脂肪酶通过抑制脂肪组织内的激素敏感性脂肪酶,可减缓脂可减缓脂 肪动员的速率肪动员的速率。 胰岛素的作用机制胰岛素的作用机制: : 肾上腺素是强有力的升高血糖的激素肾上腺素是强有力的升高血糖的激素 肾上腺素的作用机制:肾上腺素的作用机制: 通过肝和肌肉的细胞膜受体通过肝和肌肉的细胞膜受体、cAMP、蛋
3、蛋 白激酶级联激活磷酸化酶白激酶级联激活磷酸化酶,加速糖原分解加速糖原分解。 主要在应激状态下发挥调节作用主要在应激状态下发挥调节作用。 【操作操作】 (一)小白鼠取血、注射药物(一)小白鼠取血、注射药物 (二)血糖测定(二)血糖测定 小鼠取血注射药物 小鼠小鼠1 空腹断尾用空腹断尾用 移液器取血移液器取血 200l标明标明 为为1管管 腹腔注射腹腔注射 胰岛素胰岛素 0.8ml 断尾用移断尾用移 液器取血液器取血 200l标标 明为明为3管管 30min后后 小鼠小鼠2 空腹断尾用空腹断尾用 移液器取血移液器取血 200l标明标明 为为2管管 腹腔注射腹腔注射 肾上腺素肾上腺素 1ml 断尾
4、用移断尾用移 液器取血液器取血 200l标标 明为明为4管管 30min后后 *将小鼠的血液置将小鼠的血液置5ul肝素抗凝管中肝素抗凝管中 血糖测定血糖测定 (一)将上述抗凝全血在离心机中离(一)将上述抗凝全血在离心机中离3000r/min,5min,即得血浆即得血浆 (二)取小试管(二)取小试管6支,按下表操作支,按下表操作 血浆(血浆(ul) 空白管 标准管 20 测定管测定管 注射胰注射胰 岛素前岛素前 注射胰注射胰 岛素后岛素后 注射肾上注射肾上 腺素前腺素前 注射肾上注射肾上 腺素后腺素后 20 20 20 葡萄糖标葡萄糖标 准液(准液(ul) 磷酸盐缓磷酸盐缓 冲液冲液 (ul)
5、酶酚混合试酶酚混合试 剂(剂(ml) 20 20 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 混匀,混匀,3715min,冷却后以,冷却后以505nm比色,空白管调零,分别记录各管吸光度比色,空白管调零,分别记录各管吸光度 实验记录实验记录 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 日期、室温日期、室温 A 空白管空白管 标准管标准管 0.000 测定管测定管 注射胰注射胰 岛素前岛素前 注射胰注射胰 岛素后岛素后 注射肾上注射肾上 腺素前腺素前 注射肾上注射肾上 腺素后腺素后 实验报告 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 日期 室温 一、实验目的一、实验目的 二、实验原理二、实验原理 三、实验步骤(小鼠断尾取血、注射药物及血糖测定)三、实验步骤(小鼠断尾取血、注射药物及血糖测定) 四、数据处理四、数据处理 标准管公式计算法求小鼠标准管公式计算法求小鼠1、2空腹及注射药物后血糖浓度空腹及注射药物后血糖浓度 五、实验结果:五、实验结果: 小鼠小鼠1、2空腹及注射药物后血糖浓度升高、降低的百分率空腹及注射药物后血糖浓度升高、降低的百分率 六、实验讨论六、实验讨论 七、实验结论七、实验结论 Ax As Cx = CsVs Vx 1 稀释倍数 1000 180