1、第十章第十章 消毒灭菌消毒灭菌 看书找答案v1、什么是正常菌群？v2、什么是灭菌、消毒、防腐、无菌及无菌操作？想想消毒、灭菌和防腐有什么区别？第一节第一节 微生物的分布微生物的分布一、微生物在自然界的分布一、微生物在自然界的分布（一）土壤中的微生物（一）土壤中的微生物（二）水中的微生物（二）水中的微生物（三）空气中的微生物（三）空气中的微生物二、微生物在人体的分布二、微生物在人体的分布（一）（一）正常菌群的定义正常菌群的定义 分布在人类的体表及其与外界相通分布在人类的体表及其与外界相通的腔道中，在机体免疫机能正常时是的腔道中，在机体免疫机能正常时是无害无害的的微生物群体。微生物群体。（二）人体
2、微生物的分布（二）人体微生物的分布 （三）正常菌群的作用（三）正常菌群的作用1、生物拮抗作用屏障 2、免疫作用 免疫刺激3、营养与代谢作用合成维生素4、抑制肿瘤的作用 占位性生物屏障作用占位性生物屏障作用（四）、条件致病菌和菌群失调（四）、条件致病菌和菌群失调 第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌消毒灭菌概念消毒灭菌概念物理方法物理方法化学方法化学方法生物学方法生物学方法消毒消毒:杀死杀死物体或介质中的物体或介质中的病病原微生物原微生物 的方法（芽胞及非病原微生物不的方法（芽胞及非病原微生物不 一定能杀死）。一定能杀死）。灭菌灭菌:杀死杀死物体物体或介质中或介质中所有微生物所有微生物的的 方法方
3、法（包括所有细菌繁殖体及芽包括所有细菌繁殖体及芽 胞）。胞）。判断标准？判断标准？消毒灭菌有关概念消毒灭菌有关概念防腐（抑菌）防腐（抑菌）:防止或防止或抑制抑制微生物微生物生长繁生长繁 殖殖的方法。（微生物的方法。（微生物不一定死亡不一定死亡）无菌操作无菌操作:防止细菌进入机体防止细菌进入机体 或对象的技术，称无或对象的技术，称无 菌操作。菌操作。无菌无菌:在一定范围内没有活的在一定范围内没有活的 微生物存在。微生物存在。无菌操作无菌操作一、物理方法一、物理方法 常用方法常用方法（一）热力法（干热、湿热）（一）热力法（干热、湿热）（二）辐射（紫外线、电离幅射、微波）（二）辐射（紫外线、电离幅射
4、、微波）（三）滤过除菌（除菌滤器、适用物品）（三）滤过除菌（除菌滤器、适用物品）（四）超声波（机制：裂解细菌，主要用（四）超声波（机制：裂解细菌，主要用 于粉碎细胞、提取抗原）于粉碎细胞、提取抗原）（五）干燥（五）干燥（六）低温（六）低温（一）热力灭菌法（一）热力灭菌法原理原理：使微生物蛋白质变性凝固，酶失活；使微生物蛋白质变性凝固，酶失活；核糖体解体核糖体解体破坏细胞膜的结构；破坏细胞膜的结构；微生物体内的微生物体内的DNADNA断裂断裂。热力灭菌法热力灭菌法干热灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法 焚烧焚烧-最彻底的灭菌方法最彻底的灭菌方法烧灼烧灼-直接用火焰灭菌方法直接用火焰灭菌方法 如
5、接种环、试管口、三角瓶口如接种环、试管口、三角瓶口干烤干烤-加热加热160-1160-170 2h70 2h 药粉、玻璃器皿、陶瓷药粉、玻璃器皿、陶瓷1 1、干热灭菌法、干热灭菌法红外线红外线-热效应，与干烤类似热效应，与干烤类似灭菌效果：可杀死营养体和芽胞灭菌效果：可杀死营养体和芽胞灼灼烧烧灭灭菌菌法法红外线接种环红外线接种环灭菌器灭菌器干干烤烤灭灭菌菌法法电热烘箱电热烘箱真空干燥灭菌箱真空干燥灭菌箱实验室常用设备实验室常用设备湿热灭菌与干热灭菌的比较湿热灭菌与干热灭菌的比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好原因原因1 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固、湿
6、热中细菌菌体蛋白较易凝固2 2、湿热的穿透力比干热强、湿热的穿透力比干热强3 3、湿热的蒸汽有潜热、湿热的蒸汽有潜热2 2、湿热灭菌法、湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法最有效的湿热灭菌法最有效的湿热灭菌法 121 121 15-20mim15-20mim（杀芽胞（杀芽胞)煮沸消毒法煮沸消毒法水煮水煮100 5100 5mim(mim(杀繁殖体杀繁殖体)-)-5h5h(杀芽胞杀芽胞)流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法间歇灭菌法间歇灭菌法水蒸汽水蒸汽100 15-30100 15-30mimmim(杀繁殖体杀繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽
7、胞）杀芽胞）较低的温度较低的温度 61 3061 30mim/71 30smim/71 30s（杀致病菌）（杀致病菌）u方法：水中煮沸方法：水中煮沸 15min15minu灭菌效果：可杀死所有营养细胞和一部灭菌效果：可杀死所有营养细胞和一部 分芽胞分芽胞u适用对象：玻璃注射器和外科器械的消适用对象：玻璃注射器和外科器械的消毒。毒。Cncnc-microNoImage（1 1）煮沸法）煮沸法方法：方法：100 蒸汽持续蒸汽持续1530min效果：杀繁殖体效果：杀繁殖体适用范围：外科手术器械、注射器、适用范围：外科手术器械、注射器、胶管或食具等胶管或食具等（2 2）流通蒸汽消毒法）流通蒸汽消毒法奶
8、瓶消毒器方法：常压蒸汽反复几次进行灭菌。方法：常压蒸汽反复几次进行灭菌。适用对象：不宜高压灭菌的培养基适用对象：不宜高压灭菌的培养基，不耐热的药物和营养物、不耐热的药物和营养物、发酵车间的管道等。发酵车间的管道等。灭菌效果：可杀死芽胞。灭菌效果：可杀死芽胞。（3 3）间歇灭菌）间歇灭菌法法适用对象：牛奶、奶酪、果汁、酒类、适用对象：牛奶、奶酪、果汁、酒类、糖浆等食品消毒。糖浆等食品消毒。方法：方法：61.761.762.862.8处理处理30min30min 或或71.671.6度处理度处理1515秒秒 或或8282处理处理4 4秒秒效果：消毒效果：消毒（4）巴氏消毒法）巴氏消毒法（低温消毒法
9、）（低温消毒法）UHTUHT技术技术 （超高温灭菌瞬时灭菌）（超高温灭菌瞬时灭菌）135152135152 v灭菌效果：杀芽孢灭菌效果：杀芽孢v适用范围：耐高温的物体，如普通适用范围：耐高温的物体，如普通 培养基、生理盐水、玻璃器培养基、生理盐水、玻璃器 皿、敷料、手术器械、某些皿、敷料、手术器械、某些 注射液、手术衣等。注射液、手术衣等。湿热灭菌法中效果最好的方法湿热灭菌法中效果最好的方法（5 5）高压蒸气灭菌）高压蒸气灭菌高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌法法温度/压力/kPa(kg/cm2)时间/min11040.52(0.4)4011570.91(0.7)30120101.3(1.0)20125
10、141.82(1.4)15130182.34(1,8)10灭菌条件灭菌条件最常用是：最常用是：121，103.1kPa，15-20min高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅常用设备：手提式热压灭菌器常用设备：手提式热压灭菌器高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌法法常用设备：卧式热压灭菌柜常用设备：卧式热压灭菌柜高压蒸气灭菌注意点高压蒸气灭菌注意点:v检查压力表是否灵敏，压力与温度是否对应检查压力表是否灵敏，压力与温度是否对应v灭菌初期先排净锅内冷空气灭菌初期先排净锅内冷空气;v灭菌时间计算：达到规定压力和灭菌时间计算：达到规定压力和 温度开始计。温度开始计。v锅内水分要充足锅内水分要充足;v灭菌物品装量不宜太满灭
11、菌物品装量不宜太满;v灭菌结束需缓慢减压；灭菌结束需缓慢减压；v灭菌结束，趁热取出物品。灭菌结束，趁热取出物品。（二）辐射（二）辐射1 1、日光与紫外光、日光与紫外光 紫外线紫外线杀菌机理杀菌机理：波长波长2 265nm65nm的杀菌作用最强的杀菌作用最强干扰干扰DNADNA的复制与转录的复制与转录 穿透力较弱穿透力较弱u表面消毒：不耐热物品表面消毒：不耐热物品特特 点：点：适用范围：适用范围：u空气消毒：手术室、传染空气消毒：手术室、传染 病房、车间、微生物实验室病房、车间、微生物实验室 灭菌效果灭菌效果:杀营养体杀营养体使用时注意防护！使用时注意防护！杀菌机理杀菌机理：适用范围：适用范围：
12、2 2、电离辐射、电离辐射包括高速电子、包括高速电子、X X射线和射线和射线射线产生游离基产生游离基,破坏破坏DNADNA。一次性医用塑料制品的消毒一次性医用塑料制品的消毒食品的消毒食品的消毒-不破坏其营养成分不破坏其营养成分 （三）滤过除菌法（三）滤过除菌法物理阻留方法：物理阻留方法：除去液体或空气中的细菌除去液体或空气中的细菌滤菌器滤菌器 滤膜孔径滤膜孔径0.220.220.45m,m,不能除病毒、支原体不能除病毒、支原体 适用范围适用范围血清、毒素、输液、生物制品、血清、毒素、输液、生物制品、抗生素以及空气等的除菌抗生素以及空气等的除菌 过滤灭菌过滤灭菌（四）超声与超声波：使微生物细胞（
13、四）超声与超声波：使微生物细胞裂解破碎。裂解破碎。（五）干燥：脱水和盐类浓度增高。（五）干燥：脱水和盐类浓度增高。（六）低温：（六）低温：抑制生长繁殖。抑制生长繁殖。4 41010存活数月；存活数月；273273可长期保存菌种。可长期保存菌种。常用的物理消毒灭菌方法常用的物理消毒灭菌方法 种类种类 方法方法 效果效果 适用范围适用范围干热灭菌法干热灭菌法 焚烧法焚烧法 直接燃烧直接燃烧 灭菌灭菌 废弃污染物、废弃污染物、或焚烧炉或焚烧炉 有传染性的有传染性的 内燃烧内燃烧 动物尸体等动物尸体等 烧灼法烧灼法 直接用火焰烧直接用火焰烧 灭菌灭菌 接种环、试接种环、试 管口或瓶口管口或瓶口 干烤法
14、干烤法 干烤箱内干烤箱内 灭菌灭菌 耐高温物品耐高温物品 160 1601702-3h 1702-3h 灭菌灭菌 玻璃物品、玻璃物品、瓷器等瓷器等 种类种类 方法方法 效果效果 适用范围适用范围 湿热灭菌法湿热灭菌法 巴氏消毒法巴氏消毒法 62.1-62.8 30min62.1-62.8 30min 消毒消毒 牛奶、酒类、牛奶、酒类、或或71.1 1571.1 1530s30s 糖浆、果汁糖浆、果汁 煮沸法煮沸法 l00 5-10minl00 5-10min 杀死繁殖体杀死繁殖体 外科手外科手 术器械术器械、注射器、注射器、胶管或胶管或 食具等食具等 流通蒸气消毒法流通蒸气消毒法 阿诺氏灭菌器
15、阿诺氏灭菌器 消毒消毒 同上同上 或普通蒸笼进行或普通蒸笼进行 间歇灭菌法间歇灭菌法 反复多次的反复多次的 灭菌灭菌 不耐热物不耐热物 流通蒸气流通蒸气 品或特殊条品或特殊条 件下的灭菌件下的灭菌 种类种类 方法方法 效果效果 适用范围适用范围高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法 高压蒸汽高压蒸汽 灭菌灭菌 耐高温高耐高温高 灭菌器内灭菌器内 压手术器压手术器 1515磅磅 121.3 15121.3 1520min20min 械、手术械、手术 衣、敷料等衣、敷料等 一般培养基一般培养基 1010磅磅115 15115 1530min 30min 含糖培养基含糖培养基 或注射剂或注射剂 种类种类 方法
16、方法 效果效果 适用范围适用范围紫外线消毒法紫外线消毒法 紫外线灯照射紫外线灯照射 消毒消毒 空气或物体空气或物体 3060min 3060min 表面消毒品表面消毒品过滤除菌法过滤除菌法 细菌滤器细菌滤器 血清、抗毒素血清、抗毒素、生物制品、维生物制品、维 生素、蛋白质生素、蛋白质 二、二、化学方法化学方法 利用化学药物破坏微生物的化学组利用化学药物破坏微生物的化学组成、物理结构和生理活动，达到防腐灭成、物理结构和生理活动，达到防腐灭菌目的。菌目的。类类型型 名称及使用方法名称及使用方法 作用原理作用原理 应用范围应用范围醇醇类类70%70%75%75%乙醇乙醇脱水、蛋白质脱水、蛋白质变性变
17、性皮肤、器皿皮肤、器皿醛醛类类0 0.5.5%10%10%甲醛甲醛2%2%戊二醛（戊二醛（pH=8pH=8）蛋白质变性蛋白质变性房间、物品消毒房间、物品消毒（不适合食品厂）（不适合食品厂）酚酚类类3%3%5%5%石炭酸石炭酸 2%2%来苏儿来苏儿3%3%5%5%来苏儿来苏儿破坏细胞膜、破坏细胞膜、蛋白质变性蛋白质变性地面、器具地面、器具皮肤皮肤地面、器具地面、器具氧氧化化剂剂0 0.1.1%高锰酸钾高锰酸钾3%3%过氧化氢过氧化氢0 0.2.2%0.5%0.5%过氧乙酸过氧乙酸氧化蛋白质活氧化蛋白质活性基团，酶失性基团，酶失活活皮肤、水果、蔬菜皮肤、水果、蔬菜皮肤、物品表面皮肤、物品表面水果、
18、蔬菜、塑料水果、蔬菜、塑料等等（一）化学消毒剂（一）化学消毒剂1 1、化学消毒剂的种类、化学消毒剂的种类类型类型 名称及使用方法名称及使用方法 作用原理作用原理 应用范围应用范围重重金金属属盐盐类类0.05%0.1%0.05%0.1%升汞升汞2%2%红汞红汞0.1%1%0.1%1%硝酸银硝酸银0.1%0.50.1%0.5%硫酸铜硫酸铜蛋白质变性、酶失蛋白质变性、酶失活活变性、沉淀蛋白变性、沉淀蛋白蛋白质变性、蛋白质变性、酶失活酶失活非金属器皿、体温计非金属器皿、体温计皮肤、粘膜、伤口皮肤、粘膜、伤口皮肤、新生儿眼睛皮肤、新生儿眼睛防治植物病害防治植物病害表表面面活活性性剂剂0.05%0.1%0
19、.05%0.1%新洁尔灭新洁尔灭0.05%0.1%0.05%0.1%杜灭芬杜灭芬蛋白变性、破蛋白变性、破坏细胞膜坏细胞膜皮肤、粘膜、器械皮肤、粘膜、器械皮肤、金属、棉织品、皮肤、金属、棉织品、塑料塑料类型类型名称及使用方法名称及使用方法 作用原理作用原理 应用范围应用范围卤素及卤素及其化合其化合物物0.20.50.20.5mg/Lmg/L氯气氯气10%20%10%20%漂白粉漂白粉0.5%1%0.5%1%漂白粉漂白粉2.5%2.5%碘酒碘酒破坏细胞膜、破坏细胞膜、蛋白质蛋白质饮水、游泳池饮水、游泳池水水地面地面水、空气等水、空气等皮肤皮肤 染料染料2%4%2%4%龙胆紫龙胆紫与蛋白质的羧与蛋白
20、质的羧基结合基结合皮肤、伤口皮肤、伤口 酸类酸类 0 0.1%.1%苯甲酸苯甲酸 0 0.1%.1%山梨酸山梨酸食品防腐食品防腐食品防腐食品防腐（二）化学消毒剂作用机制（二）化学消毒剂作用机制v1 1、促进菌体蛋白质变性凝固、促进菌体蛋白质变性凝固 （酚、醇、醛、酸碱类等）（酚、醇、醛、酸碱类等）v2 2、干扰细菌酶系统和代谢（氧化、干扰细菌酶系统和代谢（氧化 剂、重金属盐类等）剂、重金属盐类等）v3 3、损伤细菌细胞膜，增加其通透、损伤细菌细胞膜，增加其通透 性（表面活性剂、脂溶剂等）性（表面活性剂、脂溶剂等）v4 4、菌体成分氧化、水解或结构改、菌体成分氧化、水解或结构改 变（氧化剂、卤素、醛、酚等）变（氧化剂、卤素、醛、酚等）三、生物抗菌法三、生物抗菌法（一）噬菌体：裂解细菌。（一）噬菌体：裂解细菌。（二）抗生素：抑制细菌细胞壁合成、（二）抗生素：抑制细菌细胞壁合成、改变其通透性、抑制菌体蛋白合改变其通透性、抑制菌体蛋白合 成和抑制核酸合成。成和抑制核酸合成。（三）细菌素（三）细菌素
