1、采集和采集和运运送送基本原则基本原则 监测标本监测标本常用采样液常用采样液 医院医院 环境卫生环境卫生学学采样采样类型类型主要内容01 标本采集和运送基本原则样品要有代表性；样品有一定数量和固定部位；样品避免再次污染、腐败；尽快对样品进行检测；送检时间不得超过2h；样品保存于040 C时，送检时间24 h。一、标本采集和运送基本原则02 监测标本常用采样液二、医院感染监测标本常用采样液分类名称成分用途A液灭菌氯化钠溶液氯化钠溶液用于医疗用品采样，如一次性针管、有内腔管道等的采样。B液灭菌氯化钠溶液氯化钠溶液物品表面的采样，消毒后手的采样。C液C1管：醇类、酚类； C2管：含氯消毒剂、含碘消毒剂
2、； C3管：手消毒剂； C4管：醛类消毒剂。灭菌营养肉汤； 灭菌营养肉汤加1%硫代硫酸钠； 灭菌营养肉汤加3%吐温-80和0.3%卵磷脂 ； 灭菌营养肉汤0.3%甘氨酸。用于醇类、醛类、碘类、酚类、氯类及手消毒剂的采样。03 医院环境卫生学采样类型三、医院环境卫生学采样常见类型（一）空气消毒效果监测（一）空气消毒效果监测 采样时间：采样时间：1.采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；2.未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；3.或怀疑与医院感染暴发有关时采样。1.洁净区域空气消毒效果监测洁净区域空气消毒效果监测采样高度：采样高度：测
3、点布置在距地面测点布置在距地面0.8m高高的平面上，在手术区检测时应无手术台。当手的平面上，在手术区检测时应无手术台。当手术台已固定时，测点高度在台面术台已固定时，测点高度在台面之上之上0.25m。详见下表。详见下表。区域最少测点数 级 洁净手术室手术区和洁净辅助用房局部100级区 5点 (双对角线布点) 级 周边区 8点 (每边内2点) 级 洁净手术室手术区 3点 (单对角线布点) 级 周边区 6点 (长边内2点，短边内1点) 级 周边区 4点 (每边内1点) 级 洁净手术室及分散布置送风口的洁室面积30m2 4点 (避开送风口正下方)面积30m2 2点 (避开送风口正下方)三、医院环境卫生
4、学采样常见类型2.具体操作具体操作（1）洁净手术室空气沉降率采样洁净手术室空气沉降率采样 （采样方法：将普通营养琼脂平皿（90mm）放置室内各采样点，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露30分钟，盖好立即送检。在100级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他级别区域检测时，采样口均向上。）（2）非洁净手术室空气沉降率采样）非洁净手术室空气沉降率采样 （采样方法：将普通营养琼脂平皿（90mm）放置室内各采样点，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露5分钟，盖好立即送检。动态空气监测平皿暴露15分钟，盖好立即送检。采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。）洁净手术室空气沉
5、降率采样1.手术间准备2.采样物品准备，培养皿采样前室温放置30分钟。洁净手术室空气沉降率采样3.采样人员准备，穿戴与待测洁净区相应的工作服4.不同级别区域采样布点，布点上方避免遮挡物洁净手术室空气沉降率采样5.打开培养皿盖，平移至培养皿边缘，暴露后的培养皿上方禁止操作，防止污染。6.暴露培养皿30分钟后，将培养皿盖合上。洁净手术室空气沉降率采样7.标识培养皿8. 随机取出培养皿一个，打开培养皿盖，平移至培养皿边缘后立即合上，做操作对照。洁净手术室空气沉降率采样9.将培养皿放入转运箱，密闭转送至细菌室，在37条件下培养24小时。10.每批次随机抽取培养皿放入培养箱中培养，做培养皿无菌试验。非洁
6、净环境空气沉降率采样1.待测房间准备，静止至少10分钟。2.用物准备非洁净手术室空气沉降率采样3.根据待测房间面积大小，按GB15982 要求放置培养皿。4.空白对照非洁净手术室空气沉降率采样5.从里到外逐个打开培养皿盖，扣放于平皿盖，及时送检。6.暴露规定时间后，按打开顺序盖上平皿盖，及时送检。三、医院环境卫生学采样常见类型（3）结果判断： I类： 层流洁净手术室、层流洁净病房 10个/m3 ，其他洁净场所4cfu/(30min直径9cm平皿)。II类：非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数cfu（直径平皿）。III类
7、：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数4cfu/(5min直径9cm平皿)。三、医院环境卫生学采样常见类型（二）手卫生监测采样时间：在接触病人或从事医疗活动前进行采样。特殊监测随时采样。采样面积及方法：被检人五指并拢，将浸有灭菌氯化钠溶液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂抹各两次（一只手涂抹面积约30cm2），并随之转动采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm2）计算。结果判断：卫生手消毒
8、，细菌菌落总数10 cfu/ cm2 外科手消毒，细菌菌落总数5 cfu/ cm2 。卫生手消毒效果采样1.准备物品2.酒精灯外焰烧灼采样试管管口，用无菌棉签蘸取中和试剂。3.被检者卫生手消毒后，双手五指并拢，用棉拭纸在一手曲面从指跟到指端往返涂擦2遍，涂擦过程中同时转动棉拭纸;同发采集另一只手。4.取无菌剪刀，酒精灯外焰烧灼采样试管管口（同图2）。卫生手消毒效果采样5.剪去试纸手接触部分投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内：酒精灯外焰烧灼试管管口后盖上瓶塞（同图2）。卫生手消毒效果采样外科手消毒效果采样1.物品准备2.被检者着装规范，外科手消毒后保持双手位于胸前并高于肘部。外科手消毒效
9、果采样3.取无菌棉签两根浸蘸含相应中和剂的洗脱液。4.一根棉签，涂擦一手五指曲面，从指根到指端往返转动涂擦2次，一个手涂擦面积约30；另一只手同样涂擦。外科手消毒效果采样5.剪去棉签接触部位，两根棉签投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内。6.试管塞用酒精灯烫后塞住试管口。外科手消毒效果采样7.在试管上标记被检者姓名、采样时间。8.填写手卫生消毒效果检测申请单，及时送检。（三）内镜消毒灭菌效果监测原则：1.进入人体无菌组织、器官或者经外科切口进入人体无菌腔室的内镜及附件，如腹腔镜、关节镜、脑室镜、膀胱镜、宫腔镜等，必须灭菌。2.穿破黏膜的内镜附件，如活检钳、高频电刀等，必须灭菌。3.进入人
10、体消化道、呼吸道黏膜接触的内镜，如喉镜、气管镜、支气管镜、胃镜、肠镜、乙状结肠镜、直肠镜，进行高水平消毒。三、医院环境卫生学采样常见类型采样时间：消毒、灭菌后，使用前。采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取50mL0.9%无菌生理盐水，从待检内镜活检口注入，用A液无菌烧瓶从活检口收集，及时送检。如监测高频电刀或活检钳就用A液试管按无菌物品采样法取样。结果判断：消毒后的内镜细菌总数20CFU/件，不能检出致病菌，为合格。灭菌后内镜无菌生长，为合格。三、医院环境卫生学采样常见类型（三）内镜消毒灭菌效果监测软式内镜消毒效果监测采样1.物品准备2.采样者在采样单上注明相关信息软式内镜消
11、毒效果监测采样3.工作人员规范着装，内镜消毒后，清洗人员更换清洁手套，两手竖直提内镜，操作部在上端。4.采样者用无菌注射器抽取10ml含有相应中和剂的缓冲液。软式内镜消毒效果监测采样5.采样者从待检内镜活检口注入缓冲液，由另一人员用50ml采样瓶收集采样液。6.拧紧采样瓶口，放入采样箱，密闭，2小时内送检。 (四）返渗水和透析液内毒素检测采样透析液：透析液一般采用分开配制的方法，即分别配制酸液（A液）碱液（B液）这两种液体分别吸入透析机，按比例混合稀释后得到最终的透析液。酸液（A液）夏季配制1次使用不超过35日，碱液（B液）现配现用。采样方法：用无菌空针直接采集透析用水或透析液5ml放入无菌试
12、管内送检。结果判断：透析液用水（入口液）细菌总数100 cfu/mL ，每月监测1次，疑有透析液污染或发生严重感染病例时，应增加采样点。 透析用水内毒素监测：我国血液透析器复用操作规范（2005年版）规定：应定期检测透析用水细菌和内毒素的污染程度。时间：最初应为每周检测1次，连续2次检测符合要求后，应至少每3个月1次（血透机循环检测）每年每台机器最好复盖一次检测。三、医院环境卫生学采样常见类型反渗水和透析液内毒素检测采样1.用物准备2.返渗水采样 A.使用75%乙醇棉签消毒返渗水采样口； B.打开采样小开关，让返渗水流出30s左右清洁采样口； C.将无热原采样瓶对准水流接2ml返渗水于瓶内。反
13、渗水和透析液内毒素检测采样ACB反渗水和透析液内毒素检测采样3.透析液采样 A.使用75%乙醇棉签消毒透析器入口水管连接； B.分离管路，让透析液流出30s左右清洁采样口。AB反渗水和透析液内毒素检测采样3.透析液采样 C.将无热原采样瓶对准水流接2ml透析液于瓶内； D.无菌操作密封瓶盖，填写检测报告单，立即送检。CD（三）使用中的消毒液、无菌器械保存液(包括：碘酒、酒精、碘伏、复方新洁灵消毒液和戊二醛) 采样时间：更换前使用中的消毒液与无菌器械保存液，采样后立即送检。 采样方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入到9ml稀释液（中和剂）中混匀。 结果判断：1.使用中消毒液细菌
14、菌落总数应100 cfu /mL， 不得检出致病微生物。 2.无菌器械保存液必须无菌生长。三、医院环境卫生学采样常见类型消毒剂染菌量采样1.用物准备2.手消毒：按六步洗手法揉搓 至干燥消毒剂染菌量采样3.消毒试管口：将试管放在酒精灯上旋转进行消毒，此为重要步骤。4.无菌法取注射器。消毒剂染菌量采样5.用无菌注射器抽取使用中的消毒剂1ml。6.将抽取的消毒剂注入含9ml中和剂的试管内，注意不接触试管口。消毒剂染菌量采样7.再次用酒精灯消毒试管口。8.将消毒剂与中和剂震荡充分混匀。消毒剂染菌量采样9.用记号笔在试管壁编写号码，送检。（四）物体表面卫生学监测采样时间：常规物体表面监测，选择消毒处理后
15、进行采样（不超过4小时）；若暴发流行时进行采样则尽量对未处理的现场进行采样。采样面积：被采表面100 cm2，取全部表面；被采表面100cm2，取100 cm2。采样方法：用5cm5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有灭菌氯化钠溶液的棉试子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉试子，连续采样1-4各规格板面积，剪去手接触部分，将棉试子装入10ml采样液的试管内送检。结果判断：I类：5 cfu/ cm2 不得检出致病菌； II类：5 cfu/ cm2不得检出致病菌； III类：10cfu/ cm2不得检出致病菌； 类：10cfu/cm2不得检出致病菌。三、医院环境卫生学采样常见类型物体表面采样1.物品准备。2.打开无菌棉签。物体表面采样3.消毒采样管口后取下管塞。4.将无菌棉签放入无菌0.03mol/L的pBs或生理盐水中浸湿并挤出多余液体。物体表面采样5.具体操作A.在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉签，连续采样4个规格板面积：爆发流行调查时，采样面积不限。B.小件物体则涂抹物体全部表面采样。AB物体表面采样6.将棉签放入采样管中折断手接触部分并消毒试管口后盖紧。感谢聆听！
