1、北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 1 页 共 14 页 高 二 生 物 （试卷满分为 100 分，考试时间为 90 分钟） 一、 单项选择题（本大题共 35 小题，1-20 每小题 1 分，21-35 每小题 2 分，共 50 分。在每小题给出的四个选项中，只有一个选项正确） 1. 发酵食品是中国传统食品中一个重要的类别，承载了中华民族悠久的历史和丰富的文化内涵。请结合所学发酵知识和生活经验，指出下列未经发酵的食品是 A泡菜 B黄酒 C牛奶 D苹果醋 2.微生物的实验室培养，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌造成污染。下列无菌操作中，错误的是 A. 对试管口、锥形瓶口等部
2、位，通过火焰灼烧进行灭菌 B. 倒平板的操作过程在酒精灯火焰附近进行 C . 对锥形瓶、塞上棉塞的试管、吸管等，用干热灭菌箱进行灭菌 D. 对操作者的双手、衣着以及操作空间等，采用紫外线进行消毒 3.如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为 12345。下列操作方法正确的是 A. 每次划线前都需要灼烧接种针，划线后则不需要 B. 为防止被污染，接种环每次灼烧后需立即划线 C. 12345 都能出现菌落，但只有 5 区域为所需菌落 D. 每次划线的始端需与上次划线的末端相交 4.下列关于微生物培养和利用的叙述，错误的是 A. 接种前要了解固体培养基是否被污染可接种蒸馏水来培育检测 B. 接种时连
3、续划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释获得单个菌落 C. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌 D. 利用刚果红培养基上是否形成透明圈可筛选纤维素分解菌 5.某种细菌菌株需要亮氨酸才能生长，但此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表格中细菌菌株类型，则配制相应选择培养基类型正确的是 注：L 代表亮氨酸，S 代表链霉素；“”代表加入，“”代表不加入 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 2 页 共 14 页 6.发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节,下列哪项不是发酵过程中需要采取的措施 A. 随时取样检测培养液中的微生物数目、产物浓度 B. 不断添加菌
4、种 C. 严格控制温度、pH、溶解氧、通气量与转速等发酵条件 D. 及时添加必需的培养液组分 7下列有关微生物培养的叙述正确的是 A通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落 B若培养基需要调节 pH，应该在灭菌后进行 C用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量 D倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染 8书经中的“若作酒醴，尔惟曲蘖”提到酿酒必须要用酒曲。酒曲是以谷物为原料，破碎加水压制而成，其中富含酵母菌等多种微生物，经水浸泡后放入蒸熟的米中即可用于酿酒。下列相关说法不正确的是 A酒曲中含有微生物分泌的多种酶 B浸泡酒曲的过程中微生物代谢加快 C酒曲中的酵母菌通过无氧呼吸将谷物中的糖转化为酒精 D
5、夏季气温升高，需使用沸水浸泡酒曲以防杂菌污染 9 诺如病毒是寄生于肠道细胞中的一种单股正链 RNA 病毒， 感染此病毒可使机体出现呕吐、腹泻甚至脱水等症状。多数患者发病后不需要进行治疗，休息 23 天即可康复，但少数症状严重的患者须及时进行治疗。以下相关叙述正确的是 A诺如病毒增殖时在宿主细胞内通过转录产生其病毒 RNA B病毒的核衣壳蛋白是在病毒的核糖体上合成的 C病毒侵入机体后，能被内环境中的效应 T 细胞和浆细胞特异性识别 D患者严重脱水后，经下丘脑合成由垂体释放的抗利尿激素将会增加 10我们的生活离不开微生物。醋酸杆菌可酿醋，毛霉可制作腐乳，酵母菌可酿酒。下列有关三种微生物的叙述中正确
6、的是 A三者都可在细胞质基质和细胞膜上进行有氧呼吸 B三者都能发生基因突变、基因重组和染色体变异 C三者都可通过孢子生殖进行无性繁殖 D三者在发酵过程中所需的最适温度有一定差异 11下列有关腐乳制作的操作，正确的是 A发酵初期要为霉菌生长提供良好的通气条件 B必须在豆腐上接种人工培养的菌种才能完成发酵 C将发酵温度控制在 35左右 D腌制豆腐胚后要向卤汤中加入蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 3 页 共 14 页 12有关发酵食品及制作过程，下列表述正确的是 A腐乳的口味与豆腐有显著区别的原因是加入了多种调味品 B腐乳制作过程中加入红曲霉粉的主要目
7、的是促进红曲霉长出菌丝 C泡菜制作过程中加入成品泡菜中的“老汤”减缓了发酵进程 D制作泡菜与制作酸奶控制发酵的气体条件和原理是一致的 13若要分离一定环境中能以 CO2为碳源的微生物，下列对其培养基营养物质 的描述不正确的是 A培养基中不能添加有机氮源 B碳源物质也是该微生物的能源物质 C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D分离出来的微生物不可能是某种真菌 14“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不能筛选成功的是 A用不含有机氮源的培养基筛选土壤中能够固氮的微生物 B用尿素为唯一氮源从土壤中筛选能够分解尿素的微生物 C从云南腾冲热泉的极端环境中筛选耐热的微生物 D在培养基
8、中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐的细菌突变体 15黑茶是以肉食为主的中国边疆游牧民族的主要饮品。在一系列微生物的作用下，黑茶会产生一种对人体非常有益的金黄色颗粒“金花”。 研究人员对“金花”中的微生物进行了分离和鉴定，过程如图。下列说法不正确的是 A向“金花”样品中加入蒸馏水制成样品悬液 B可根据菌落特征对菌种进行初步鉴定 C划线平板上长出的菌落比涂布平板上长出的菌落更纯 D划线平板长出的菌落可继续接种于试管斜面培养基上低温下保存 16用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀 分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为培养的结果， 其中抑菌圈是在纸片周
9、围出现的透明区域。下列分析正确的是 样品 样品悬液 涂布 划线 菌种鉴定 抑菌圈 含抗生素的纸片 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 4 页 共 14 页 A图示利用的接种方法是平板划线法 B未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异 C形成的抑菌圈较小的原因可能是病原菌对药物较敏感 D不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响 17. 下列关于微生物发酵工程的叙述不正确的是 A微生物发酵技术获取产品效率高的原因是“细胞体积/表面积”的比值大 B微生物发酵工程所用培养基一般是液体培养基 C发酵产物可能是微生物细胞本身，也可能是微生物代谢产物 D现代发酵装置
10、的计算机控制系统能对发酵温度、pH、溶解氧等进行监测 18. 如图为某个基因的部分片段，关于该结构的叙述，正确的是 A所圈定的部位是腺嘌呤 BDNA 连接酶作用于处 C限制酶作用于处 D解旋酶作用于处 19. 已知限制酶的识别序列和切点是GGATCC，限制酶的识别序列和切点 是GATC，根据图示分析下列叙述正确的是 A构建重组 DNA 时，可分别用限制酶和限制酶切割目的基因和质粒 B用限制酶切割上图中含目的基因的 DNA 时，会有四个磷酸二酯键断裂 C限制酶和限制酶切割 DNA 后获得的黏性末端不同 D质粒中的标记基因便于筛选出目的基因已经表达的细胞 20.某 DNA 分子上有 2 个 Bam
11、H I 的酶切位点，如下图，用 BamH I 酶切该 DNA 分子可以生成3 种不同长度的 DNA 片段。现有足够多的该 DNA 分子，若每个 DNA 分子至少有一处位点被该酶切断，那么经酶切后，最多能产生多少种长度不同的 DNA 片段 A3 B4 C5 D6 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 5 页 共 14 页 21. 实验室常用 PCR 技术对 DNA 进行体外扩增，下列相关叙述正确的是 A需要解旋酶和耐高温的 DNA 聚合酶 B反应过程包括变性复性延伸 C95时 DNA 的磷酸二酯键断开 D引物与模板结合后向 5方向延伸 22. 下列关于“基因探针”的叙述，正确的
12、是 A基因探针既可以检测某一特定的 DNA，也可检测 RNA B基因探针是一小段具有随机脱氧核苷酸序列的单链 DNA C基因探针既可以检测核酸分子，又可以检测特定的蛋白质 D基因探针以其双链形式发挥作用，其放射性和荧光标记便于检测 23. 用胰高血糖素基因制成 DNA 探针，进行分子杂交检测，下列叙述正确的是 A胰岛 A 细胞中的胰高血糖素可与其形成杂交带 B胰岛 B 细胞中的 DNA 可与其形成杂交带 C胰岛 A 细胞中的 mRNA 不能与其形成杂交带 D肝细胞中的 mRNA 可与其形成杂交带 24. 科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的珠蛋白，治疗鼠的镰刀
13、型细胞贫血症。下列相关实验设计中，不合理的是 A用编码序列加启动子、终止子、抗四环素基因等元件来构建表达载体 B利用小鼠 DNA 分子通过 PCR 克隆出珠蛋白基因的编码序列 C用含有四环素的培养基筛选出已经导入珠蛋白编码序列的大肠杆菌 D用 Ca2+处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中 25. 下列能说明目的基因完成表达的是 A在奶牛乳腺细胞中检测到人的干扰素基因 B在棉花细胞中检测到重组 DNA 分子上的标记基因 C在酵母菌细胞中检测到与目的基因互补的 mRNA 分子 D在转入了人胰岛素基因的大肠杆菌中检测到人胰岛素 26. 为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝
14、集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pB121）结合，然后导入棉花细胞。下列操作与实验目的不符的是 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 6 页 共 14 页 A用限制酶 BsaB和 DNA 连接酶处理两种基因可获得 GNAACA 融合基因 B与只用 Kpn相比，Kpn I 和 Xho处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确 C将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上即可筛选出转基因细胞 D用 PCR 技术可检测 GNA 和 ACA 基因是否导入棉花细胞中 27. 如图表示细胞膜上乙酰胆碱（一种神经递质）受体基因的克隆技术操作过程，下列相关分析中正确的是 A获
15、得该 mRNA 的最佳材料是受精卵 B构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌 C合成 cDNA 过程中必不可少的酶是逆转录酶 D探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感染的细菌 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 7 页 共 14 页 28. 科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的 DNA 分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达，过程如图所示。下列相关叙述错误的是 A过程表示通过逆转录方法来获取目的基因 B构建重组质粒需要的酶是限制酶和 DNA 连接酶 C进行过程之前需用 Ca2+处理大肠杆菌 B，使其成为感受态 D只有导入了重组质粒的大肠杆菌 B 才能在含氨苄青
16、霉素的培养基上生长 29. 下列关于构建人胰岛素基因表达载体并导入大肠杆菌的叙述，正确的是 A表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞 mRNA 逆转录获得 B有关的 DNA 聚合酶能识别并结合到启动子区域从而驱动转录 C人胰岛素基因与基因探针能通过磷酸二酯键结合而形成杂交带 D含目的基因的大肠杆菌表达出来的胰岛素不一定有生物学活性 30微生物常被用于基因工程中。下列相关叙述正确的是 A从耐热的细菌中获取 PCR 所需的 DNA 连接酶 B大肠杆菌、酵母菌等是基因工程常用的载体 C作为载体的 DNA 分子必须具有合成抗生素的基因 D常利用土壤农杆菌将目的基因导入植物细胞 31. 科研人员分别将蛋白
17、 C 基因和蛋白 G（葡萄糖转运蛋白）基因与空质粒连接，构建表达载体。将空质粒和上述两种表达载体分别转入三组蛋白 G 缺陷细胞，在三种不同浓度的葡萄糖间隔刺激下，测定三组细胞的葡萄糖转运速率，结果如图。下列分析不正确的是 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 8 页 共 14 页 A组实验的目的是排除空质粒对实验结果的影响 B、组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而减小 C由实验结果推测蛋白 C 是一种葡萄糖转运蛋白 D实验结果表明蛋白 C 的转运功能强于蛋白 G 32. 通过基因改造，获得了高效表达丝状真菌植酸酶的酵母菌。改造后的基因在酵母菌细胞内转录产生的 mRNA 上的密码
18、子 CGG 变成 AGA（精氨酸的密码子有 CGU、CGC、CGA、CGG、AGA、AGG）。与直接导入丝状真菌植酸酶基因的酵母菌相比，基因改造后的酵母菌 A变异类型属于基因突变 B识别两种密码子的 tRNA 结构完全相同 C合成植酸酶的效率提高 D合成的植酸酶氨基酸序列发生改变 33. 荧光定量 PCR 技术可定量检测样本中某种 DNA 含量。其原理是在 PCR 体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当 Taq 酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述错误的是 A引物与探针均具特异性，与模板结合时遵
19、循碱基互补配对原则 B反应最终的荧光强度与起始状态模板 DNA 含量呈正相关 C若用 cDNA 作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平 DTaq 酶催化 DNA 的合成方向是从子链的 3端向 5端延伸 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 9 页 共 14 页 34. 某致病基因 h 位于 X 染色体上，该基因和正常基因 H 中的某一特定序列 BclI 酶切后，可产生大小不同的片段（如图 1，bp 表示碱基对） ，据此可进行基因诊断。图 2 为某家庭病的遗传系谱。下列叙述错误的是 Ah 基因特定序列中 Bcl酶切位点的消失是碱基序列改变的结果 B若1 的基因诊断中只出现 1
20、42bp 片段，其致病基因来自母亲 C若2 的基因诊断中出现 142bp，99bp 和 43bp 三个片段，则其基因型为 XHXh D已知3 的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现 142bp 片段的概率为12 35. 为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如下图）。 为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的 HMA3 基因，同时避免内源 HMA3 基因的干扰，在进行 PCR 扩增时，应选择的引物组合是 A+ B+ C+ D+ 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 10 页 共 14
21、页 二、 非选择题（共 45 分） 36.(9 分)某生态研究小组为了从纤维素分解菌中获取纤维素酶，以便将农作物秸秆作为酿酒工业的原料，设计了如下操作流程分离提取较纯的纤维素分解菌。请分析回答问题: 土壤取样-选择培养-梯度稀释-将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上-挑选菌落 （1）纤维素分解菌选择培养的培养基中添加的碳源为 ；除了碳源外,培养基中还必须含有的营养成分有 、 和水。 （2）图甲所示接种方法主要用于 ，该方法不能用于测定菌体的数目，其原因主要是许多菌落并不是由 形成的。 （3）图乙中的培养对应于流程图中步骤 (填写序号)。 （4）若选择培养后预估锥形瓶中细菌细胞数为 2x107
22、个/mL，若要在鉴别平板上涂布 0.1ml 稀释后的菌液，且使得每个平板上长出的菌落在 200 个左右，则至少应将锥形瓶中的菌液稀释 倍。在鉴别培养基中含有 KH2PO4和 Na2HPO4，其作用是： 。 (5)流程图中步骤的操作中，应挑选 的菌落。 37 （8 分）为保障公共健康，需要定期对公共饮用水进行卫生检测。 （1）大肠杆菌在人体肠道内生存时，可发酵多种糖类产酸、产气，随粪便排 出后在水体中存活时间比其他病原微生物略长， 摇床震荡培养更利于其快速繁殖。 据此推断，大肠杆菌代谢类型为 。 A自养需氧型 B异养厌氧型 C异养兼性厌氧型 D自养厌氧型 （2）居于大肠中的各种细菌统称为大肠菌群
23、。一般用大肠菌群作为水体受粪 便污染的指示菌，饮用水的卫生标准是 100mL 不得检出大肠菌群（或者 1000mL 饮用水中不超过 3 个大肠杆菌） 。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测饮用水中的大肠菌群，过程如下图所示： 甲 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 11 页 共 14 页 检测前需要进行灭菌处理的材料用具有 （选择字母代号填写） ； 它们均可以采用 法灭菌。 A水样收集瓶 B滤膜 C培养基 D镊子 E水样 完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在 37下培养 2022 小时后进行观察。若 ，则此水不符合饮用水标准。为减少误差，应按照上述步骤_进行检测。
24、一般不用稀释涂布平板法检测饮用水中的大肠菌群，原因是_ 。 （3）KONFIRM 培养基可以检测大肠杆菌的存在。KONFIRM 中含有 ONPG 和 MUG可作碳源，色氨酸可作为氮源。在检测大肠菌群时，检测指标如下表所示。 菌群 检测项目及原理 大肠菌群（有 -半乳糖苷酶） ONPG 检测：-半乳糖苷酶水解无色的 ONPG 为黄色物质 肠杆菌群（降解色氨酸为吲哚） 吲哚检测：吲哚可与特定显影剂显为绿色 大肠杆菌（有 -葡糖醛酸酶） MUG 检测：-葡糖醛酸酶降解MUG 为具有荧光的物质 （注：出现上述颜色变化为阳性，未现上述颜色变化为阴性） 从功能上分类，KONFIRM 培养基属于_培养基。结
25、合表中内容分析，若上述检测结果为 （选择字母代号填写） ，则可以确定待测菌为大肠杆菌。 A. ONPG 检测和吲哚检测为阳性，MUG 检测为阴性 B. 吲哚检测为阳性，ONPG 检测和 MUG 检测为阴性 C. ONPG 检测、MUG 检测、吲哚检测均为阴性 D. ONPG 检测、MUG 检测、吲哚检测均为阳性 38.(10 分)注意缺陷多动障碍（ADHD）是临床上常见的一种神经发育障碍性疾病，主要表现为注意力不集中、多动、冲动。已有研究发现 ADHD 与cntnap 2 基因相关，该基因在不同的脊椎动物中具有高度同源性。研究人员尝试通过改变斑马鱼中该基因表达，来研究cntnap 2 基因与
26、ADHD 具体关系。 （1）cntnap 2 基因转录时， 酶与基因中的启动子结合，催化合成前体RNA；随后前体 RNA 中 对应部分被切掉，外显子对应部分拼接起来，形成成熟 mRNA。上述过程发生在 中（场所）。 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 12 页 共 14 页 （2）研究人员将吗啉反义寡核苷酸基因转入斑马鱼的受精卵中（实验组），吗啉反义寡核苷酸基因的转录产物可以抑制前体 RNA 的剪接。针对它在cntnap 2 基因的表达中的具体作用，科研人员提出以下假说： 假说 1：导致前体 RNA 上内含子 1 的对应序列不能被剪切下去 假说 2：导致前体 RNA 上内含
27、子 1 和外显子 2 的对应序列同时被剪切下去 为了验证上述假说，分别从受精后 3 天的实验组和对照组斑马鱼的脑中提取 ，逆转录形成 cDNA。若假说 1 成立，使用如图所示引物 2 和引物 4 进行 PCR 后电泳的结果 为 （从下列选项中选择）。 A实验组有目的条带 B实验组无目的条带 C对照组有目的条带 D对照组无目的条带 若要证明假说 2 成立，还需要选择上图所示引物 4 和引物 进行 PCR。 （3）用上述方法获得的实验组斑马鱼的运动距离和速度都大于对照组，说明 。 （4）科研人员向实验组斑马鱼的培养液中加入托莫西汀（一种常用于治疗 ADHD 的临床药物），若 则证明转入吗啉反义寡核
28、苷酸基因获得了 ADHD 斑马鱼模型。应用该动物模型可以进行哪些研究？ 。 39.（10 分）枯草芽孢杆菌作为一种安全、高效、多功能和极具开发潜力的微生物菌种已广泛应用于工业、农业、医药、卫生、食品、畜牧业、水产及科研诸领域。 （1）某种枯草芽孢杆菌粉剂为广谱的微生物杀菌剂，每克粉剂约含 100 亿个芽孢，加水稀释后以喷雾方式喷洒叶片，可防治柑橘的溃疡病、白菜的软腐病等。其杀菌的有效成分为枯草芽孢杆菌产生的抗菌物质。 有关枯草芽孢杆菌，下列表述错误的是（多选） A枯草芽孢杆菌通过产生芽孢方式繁殖 B枯草芽孢杆菌和其他病原菌的关系为捕食 C100加热半小时，能彻底杀死枯草芽孢杆菌 D线粒体是枯草
29、芽孢杆菌有氧呼吸的主要场所 生产中，最好将该枯草芽孢杆菌杀菌剂与作用机制不同的杀菌剂轮换使用，其目的 是_。 （2）枯草芽孢杆菌是当今工业酶应用最广泛的菌种之一，据不完全统计，枯草芽孢杆菌所产的酶占整个酶市场的 50%，具有产酶量高、种类多、安全性好和环保等优点。研究者筛选到一株降解纤维素能力较强的枯草芽孢杆菌菌株（B 菌） ，从中克隆得到了一种纤维素酶（C1酶）基因。将获得的 C1酶基因与高效表达载体（HT 质粒）连接，再导入 B 菌，以期获得降解纤维素能力更强的工程菌。 纤维素属于 糖，经过一系列酶催化最终可降解成单糖 。 对克隆到的 C1酶基因测序，与数据库中的 C1酶基因编码序列相比有
30、两个碱基对不同，但两者编码出的蛋白质氨基酸序列相同，这是因为 。 C1酶基因以 B 链为转录模板链，转录时 mRNA 自身的延伸方向为 53。为了使 C1北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 13 页 共 14 页 酶基因按照正确的方向与已被酶切的 HT 质粒连接，克隆 C1酶基因时在其两端添加了 Sma I 和 BamH I 的酶切位点。该基因内部没有这两种酶切位点。图 1 中酶切位点 1 和 2 所对应的酶分别是 。 将纤维素含量为 20%的培养基分为三组，一组接种工程菌，对照组 1 不进行处理，对照组 2 进行相应处理。在相同条件下培养 96 小时，检测培养基中纤维素的
31、含量。结果 （图 2）说明工程菌降解纤维素的能力最强。对照组 2 的处理应为 。 预期该工程菌在处理废弃物以保护环境方面可能的应用（举一例） 。 （3）枯草芽孢杆菌是我国允许使用的饲料微生物菌种，因其无毒、无害，经常被制成微生物添加剂，用于改善动物肠道功能、促进动物生长和预防疾病。枯草芽孢杆菌在动物肠道内分泌高活性的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶，这有助于动物_；枯草芽孢杆菌还产生具有拮抗肠道致病菌的多肽类物质，起到抑菌和预防疾病作用。枯草芽孢杆菌是好氧菌，能_肠道内优势菌厌氧菌的繁殖，维持肠道生态平衡。 （4）枯草芽孢杆菌作为基因工程受体菌，可表达出近 200 种原核和真核生物来源的蛋白基因。枯草芽
32、孢杆菌能表达出来源于不同生物的多种基因，其理论基础是_。 40. （8 分）阅读以下材料，回答（1）（3）。 基因魔剪：CRISPR/Cas 系统 要揭示生命的运作原理，常需要对基因进行编辑。在过去，这一步异常艰难。但随着CRISPR/Cas 技术的出现，科学家已能在极短时间内就更改生命密码。 CRISPR/Cas9 系统由 Cas9 蛋白和人工设计的 gRNA 构成。在 gRNA 引导下，Cas9 与靶序列结合并将 DNA 双链切断。随后细胞通过自身的 DNA 损伤修复机制，将断裂上下游两端的序列连接起来，但通常会在断裂处造成少量核苷酸的插入或缺失。当 DNA 双链断裂后，如果细胞中有 DN
33、A 修复模板（由需要插入的目的基因和靶序列上下游的同源序列组成），断裂部分可依据修复模板进行精确修复，从而将目的基因插入到指定位点。 通过在 Cas9 基因中引入突变，获得了只有切割一条链活性的 nCas9。将 nCas9 与胞嘧啶脱氨酶或腺嘌呤脱氨酶融合，科学家开发出了单碱基编辑技术（图 2），能够对靶位点进行精准的碱基编辑。 图 1 C1酶基因 酶切位点 1 酶切位点 2 A 链 B 链 酶切 连接 启动子 HT 质粒 图 2 对照组 1 对照组 2 工程菌 纤维素含量（%） 北京四中 20212022 学年度第二学期期中试卷 第 14 页 共 14 页 对 CRISPR/Cas 系统的不
34、断改造，使其在基因编辑外，还可用于激活或抑制基因的转录等。虽然目前 CRISPR/Cas 技术还存在一些不足，但作为一种革命性的技术，其应用前景广阔。 （1） 利用 CRISPR/Cas9 技术进行基因编辑，需构建含 gRNA 基因和 Cas 基因的_，并导入受体细胞。gRNA 依据_原则与靶序列特异性结合，引导 Cas9 蛋白进行切割。 （2）有些遗传病是由于基因中一个碱基对的改变引起的，如果要修正此基因突变，图示的三种途径中，哪种更为合适？_，因为_。 （3）通过途径仅能够实现某基因内部少量核苷酸的插入或缺失， 如果要将该基因从基因组序列中删除，利用 CRISPR/Cas9 技术，设计 gRNA 的思路是_。
