1、白血病免疫分型白血病免疫分型一一.急性白血病急性白血病FAB分型：分型：1976年提出年提出,以形态为基础。以形态为基础。ALL AMLM M0 0 微小分化型急性髓细胞白血病微小分化型急性髓细胞白血病, , 原始细胞原始细胞30%30%M M1 1 急性髓细胞白血病未分化型急性髓细胞白血病未分化型, , 原始细胞原始细胞90%90%M M2 2 急性髓细胞白血病部分分化型，原始细胞急性髓细胞白血病部分分化型，原始细胞30-89%30-89%M M3 3 急性早幼粒细胞白血病，异常早幼粒细胞急性早幼粒细胞白血病，异常早幼粒细胞30%30%M M4 4 急性粒单核细胞白血病，原始细胞急性粒单核细
2、胞白血病，原始细胞30%30%，单核，单核20-80%20-80%M M5 5 急性单核细胞白血病，原单急性单核细胞白血病，原单+ +幼单幼单30%30% M M5a 5a 未分化型，原单细胞未分化型，原单细胞80%80% M M5b 5b 部分分化型，原单细胞部分分化型，原单细胞 30%30%，有核红细胞，有核红细胞50%50%M M7 7 急性巨核细胞白血病，原巨核细胞急性巨核细胞白血病，原巨核细胞30%30%L1 以小细胞为主，大小一致以小细胞为主，大小一致L2 以大细胞为主，大小不一以大细胞为主，大小不一L3 以大细胞为主，大小一致以大细胞为主，大小一致二二.急性白血病的急性白血病的M
3、IC分型：分型：1985-1986提出提出 MIC：Morphology Immunology Cytogenitics80年代免疫学研究的进展，单克隆抗体的大量涌现，年代免疫学研究的进展，单克隆抗体的大量涌现，利用特异的单抗可以明确区分利用特异的单抗可以明确区分ALL、AML及进一步及进一步鉴定亚型，对研究白血病的生物学特性，指导临床鉴定亚型，对研究白血病的生物学特性，指导临床治疗及判断预后起着重要的作用治疗及判断预后起着重要的作用三三.免疫分型的作用免疫分型的作用： 1.区分区分ALL、AML：形态、组化难以诊断的病例（不典型、：形态、组化难以诊断的病例（不典型、 治疗后）治疗后） 2.将
4、将ALL分为分为B、T细胞及根据细胞发育阶段分为几种亚型细胞及根据细胞发育阶段分为几种亚型 3.对对M0、M6 、M7具有诊断意义：具有诊断意义： M0：形态似：形态似ALL、组化（、组化（-), MPO(+), 髓标志髓标志+, T,B- M6：GlyA+，CD71+ M7：CD41+，CD61+（Iib/IIIa）泛泛B标志：标志：CD19，HLA-DR，cCD79a/cCD22幼稚幼稚B标志：标志：CD34，TdT， CD10，成熟成熟B标志：标志：CD22，CD23，FMC7四四.正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点及正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点及 白血病细胞免疫标志特
5、点白血病细胞免疫标志特点(一）一）. 正常正常B细胞标志细胞标志： CD19 TdT CD34 CD10 CD20 FMC7 CD22 CD23 I期期 ： + + + - II期：期： + - - + -/+ III期：期： + - - + + + 期：期： + - - - + + + + B-ALL的分型的分型亚型亚型 CD19 CD34 TdT CD10 CyIg SmIg急性早期急性早期B前体细胞白血病前体细胞白血病 + + - - -early B-precursor ALL普通型普通型B 细胞白血病细胞白血病 +/- + + - -Common B-ALL急性前急性前B细胞白血病细
6、胞白血病+-/+ + + + - Pre B-ALL急性急性B细胞白血病细胞白血病 +- - - -/+ + B-ALL意义：Common B-ALL 预后相对较好，CD34+B-ALL比CD34- 预后好，但CD34+患者伴Ph1+预后差。B-ALL预后相对 差，但随化疗方案改进，预后有所改善。 CD7 CD2 CD5 CD34 CD1a CD3c/m CD4 CD8 I期期 ： + + + + -/+ II期期： + + + - + -/+ III期期： + + + - + +/+ + + 期期： + + + - - +/+ +/- +/- 泛泛T：CD2，CD5，CD7， cCD3 幼稚
7、幼稚T：CD34，TdT，CD1a, CD4/8， 成熟成熟T：CD3，CD4，CD8 (二）二）.正常正常T细胞标志细胞标志：根据在胸腺内发育阶段分根据在胸腺内发育阶段分4期期T-ALL的分型的分型分型分型 CD7 CD2 TdT CD3c/m急性早期急性早期T前体细胞白血病前体细胞白血病 + - + +early T precursor ALL急性急性T细胞白血病细胞白血病 + + - +T-ALLT-ALL特点：特点： 1. 幼稚幼稚T细胞数量增多：细胞数量增多：CD34+，TdT+ 2. 泛泛T标志丢失标志丢失 3. CD4/8双双+或或CD4/CD8单阳单阳 意义：儿童：意义：儿童：
8、ALL发病率发病率占肿瘤的占肿瘤的25%， B-ALL 预后比预后比T-ALL相对好相对好 成人：成人：ALL 发病率发病率20% T-ALL 预后比预后比B-ALL 好。好。(三三).正常粒细胞标志正常粒细胞标志 全粒细胞标志：全粒细胞标志：CD13， cMPO幼稚粒细胞：幼稚粒细胞：CD34，CD117，HLA-DR，CD33成熟粒细胞：成熟粒细胞：CD15，CD11b，CD10，CD64 cMPO CD13 CD34 CD117 HLA-DR CD33 CD11b CD15 CD64 CD10幼稚粒幼稚粒 + + + + + + - - - -成熟粒成熟粒 + + - - - - + +
9、 + + (四四).正常单核细胞标志：正常单核细胞标志： 全单核细胞标志：全单核细胞标志：CD33，CD13，HLA-DR幼稚单核细胞标志：幼稚单核细胞标志：CD34，CD117，成熟单核细胞标志：成熟单核细胞标志：CD14，CD64 HLA-DR CD33 CD13 CD34 CD117 CD14 CD64 幼稚单幼稚单 + + + + + - - 成熟单成熟单 + + + - - + + (五五).成熟粒、单核细胞主要区别：成熟粒、单核细胞主要区别：成熟粒细胞：成熟粒细胞：CD33- HLA-DR- CD14- CD64+dim成熟单核细胞：成熟单核细胞：CD33+ HLA-DR+ CD1
10、4+ CD64+st正常正常BM各系细胞比率：各系细胞比率： 淋巴：淋巴：20-30%：T：70%，B：20%，NK：10%； 单核：单核：2-6%；粒细胞：；粒细胞：40-60%；有核红：；有核红：50%FCM的主要测定指标的主要测定指标：FSC，SSC，FL1，FL2，FL3（FL4） FSC：反应细胞的大小。：反应细胞的大小。SSC：反应细胞内颗粒的多少。：反应细胞内颗粒的多少。FCM设门法：设门法： FSC/SSC： 缺点：缺点： 不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开 CD45/SSC：CD45是是WBC抗原，抗原，RBC、Plt为阴性。为阴性。 CD45在
11、成熟细胞表达强，幼稚细胞表达弱，在成熟细胞表达强，幼稚细胞表达弱， 在淋巴、单核及粒细胞表达强度不同。在淋巴、单核及粒细胞表达强度不同。 优点：能将淋巴、单核及优点：能将淋巴、单核及幼稚细胞幼稚细胞区分开。区分开。特异分析特异分析 白血病细胞免疫表型白血病细胞免疫表型 FCM标记方法：标记方法： 单标：一种单抗单标：一种单抗/tube: FL1,FSC,SSC(三参数）三参数） 双标：双标：(两种单抗两种单抗/tube/)：FL1,FL1,FSC.SSC（四参数）（四参数） 三三/四标：四标：(三种单抗三种单抗/tube)(四种单抗四种单抗/tube)：FL1-FL3/4,FSC,SSCCD4
12、5CD45CD5CD5CD19CD19CD64CD64CD34CD34CD11bCD11bCD117CD117Side scatterCD64CD64CD11bCD11bSide scatterSide scatterCD45CD45CD7CD7CD117CD117CD34CD34CD5CD5CD19CD19HLA-DRHLA-DRCD11bCD11bCD117CD117CD45CD45CD7CD7CD19CD19CD117CD117CD34CD34CD11bCD11bCD7CD7Side scatterCD117CD117CD11bCD11bCD10-,CD34-CD45CD45CD7CD7
13、CD8CD8CD117CD117CD3CD3CD34CD34CD38CD38HLA-DRHLA-DRCD7CD7Side scatterCD45CD45CD7CD7CD8CD8CD117CD117CD3CD3CD34CD34CD38CD38HLA-DRHLA-DRCD7CD7cCD3cCD3Side scatterSide scatterCD45CD45cCD22CD117CD117CD34CD34cCD13CD10CD10HLA-DRHLA-DRcCDMPOCD13CD13 IGg1 CD64CD64Side scatterSide scatterCD45CD45CD64CD64CD34CD
14、34CD5CD5CD19CD19HLA-DRHLA-DRCD11bCD11bCD117CD117CD45CD45CD5CD5CD19CD19CD64CD64CD34CD34HlA-DRHlA-DRCD117CD117Side scatterCD64CD64CD11bCD11bCD64CD64CD117CD117CD34CD34CD11CD117 7CD34CD34CD64CD64cMPOCD45CD45CD117CD117CD34CD34CD64CD64CD34CD34CD117CD117Side scatterCD64CD64CD11bCD11bCD11bCD11bCD79aCD79aCD6
15、4CD64Side scatterSide scatterCD45CD45CD64CD64CD34CD34CD5CD5CD19CD19HLA-DRHLA-DRCD11bCD11bCD117CD117CD45CD45CD5CD5CD19CD19CD64CD64CD34CD34HlA-DRHlA-DRCD117CD117Side scatterCD64CD64CD11bCD11bCD64CD64Side scatterSide scatterCD45CD45CD64CD64CD34CD34CD5CD5CD19CD19CD11bCD11bCD117CD117CD13CD13CD7CD7CD45CD4
16、5CD5CD5CD19CD19CD64CD64CD34CD34CD7CD7Side scatterCD64CD64CD11bCD11bCD117CD117CD13CD13CD64CD64Side scatterSide scatterCD45CD45CD64CD64CD34CD34CD5CD5CD19CD19CD11bCD11bCD117CD117CD11bCD11bGlyAGlyACD45CD45CD5CD5CD19CD19CD64CD64CD34CD34CD117CD117Side scatterCD64CD64CD11bCD11bCD11bCD11bGlyAGlyAGlyAGlyACD4
17、5CD45CD5CD5CD19CD19CD64CD64CD34CD34CD11bCD11bCD64CD64CD11bCD11bCD117CD117CD41干祖细胞标志：干祖细胞标志：T祖细胞祖细胞 B祖细胞祖细胞 髓祖细胞髓祖细胞CD34 + + +TdT + + -CD117 -/+ - +HLA-DR +/- + +CD38 + +/- + 诊断白血病主要标志：诊断白血病主要标志：B-ALL：CD34，HLA-DR，CD19，CD10+/-，cCD79T-ALL： CD34，CD38, CD7,CD2+/-,CD5+/-,cCD3AML： CD34，CD117，CD33，CD13，cMPO M3：CD34 -，HLA-DR- M2：CD19+：t（8，21） M4/M5：CD14+ M6：GlyA+,CD71+ M7：IIb/IIIa(CD41,CD61)+
