1、1晚期晚期NSCLCNSCLC分子病理诊断的重要性及分子病理诊断的重要性及新进展新进展2既往肺癌病理诊断流程既往肺癌病理诊断流程最重要的目的为区分最重要的目的为区分小细胞癌小细胞癌与与非小细胞癌非小细胞癌由于，组织分类与患者预后无关，因此进一步区分由于，组织分类与患者预后无关，因此进一步区分病理亚型（如，腺癌、鳞癌、大细胞癌）等并不十病理亚型（如，腺癌、鳞癌、大细胞癌）等并不十分重要分重要通常可以接受非小细胞肺癌的病理诊断通常可以接受非小细胞肺癌的病理诊断3NSCLCNSCLC分子分型与治疗决策密切相关分子分型与治疗决策密切相关HER2EGFR mutantsALKROS/RETb-rafK-
2、rasChemotherapy and PCIAdenoLCC/NOSSCCSCLCK-ras4国际各大指南（CAP/IASLC/AMP、NCCN、ATLAS、ESMO指南）均给予晚期NSCLC含腺癌成分必须检测EGFR&ALK鳞癌小标本推荐检测EGFR&ALK5中国中国ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC总患者数约为总患者数约为HER2HER2阳性乳腺癌患者的阳性乳腺癌患者的70%70%，CMLCML患者的患者的3 3倍多倍多ALK阳性肿瘤患者34,82034,820例乳腺癌 HER2阳性患者49,631例EGFREGFR阳性肺癌（新发病数）阳性肺癌（新发病数）208923208923例
3、例ALKALK阳性肺癌（新发病数）阳性肺癌（新发病数）3482034820例例其他其他中国肿瘤登记年报，中国肿瘤登记年报，20122012CML 10,000例左右67主要主要内容：内容：ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC的诊断的诊断ALKALK阳性非小细胞肺癌的定义阳性非小细胞肺癌的定义ALKALK检测适宜人群检测适宜人群ALKALK检测诊断流程专家共识检测诊断流程专家共识中华中华病理学杂志病理学杂志20132013年年6 6月第月第4242卷第卷第6 6期期中华肿瘤杂志中华肿瘤杂志20142014年年7 7月第月第3636卷第卷第7 7期期中华结核呼吸科杂志中华结核呼吸科杂志2014
4、2014年年3 3月第月第2727卷第卷第3 3期期8ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC具有鲜明的具有鲜明的临床及病理特征临床及病理特征特征特征EGFREGFR突变突变EML4/ALKEML4/ALK组织学腺癌 TTF1+腺癌TTF1+亚型非粘液型粘液型吸烟状态不吸烟不吸烟人种东亚所有人种发病年龄66岁52岁性别女性无差异Shaw AT,et al.J Shaw AT,et al.J ClinClin OncolOncol 2009;27:4247-4253.2009;27:4247-4253.ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC年龄年龄5050岁左右岁左右偏年轻偏年轻中华病理学杂志
5、中华病理学杂志20132013年年6 6月第月第4242卷第卷第6 6期期中华肿瘤杂志中华肿瘤杂志20142014年年7 7月第月第3636卷第卷第7 7期期中华结核呼吸科杂志中华结核呼吸科杂志20142014年年3 3月第月第2727卷第卷第3 3期期9ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC命名的由来命名的由来2007,Soda&Mano首次发现EML4-ALK基因2009,Alice T.Shaw首次出现EML4-ALK阳性非小细胞肺癌的称谓，并将其定义为NSCLC的独特亚型2010,Kwak EL:证实克唑替尼治疗有效，但仍沿用EML4-ALK阳性非小细胞肺癌的称谓Soda M,et
6、al.Nature 2007;448(7153):561-566.Soda M,et al.Nature 2007;448(7153):561-566.Shaw AT,et al.J Shaw AT,et al.J ClinClin OncolOncol 2009;27:4247-4253.2009;27:4247-4253.KwakKwak EL,et al.N EL,et al.N EnglEngl J Med 2010;363:1693-1703.J Med 2010;363:1693-1703.10ALKALK阳性非小细胞肺癌已成为阳性非小细胞肺癌已成为NSCLCNSCLC特定的亚型特
7、定的亚型不同的不同的驱动基因驱动基因不同的不同的治疗方法治疗方法不同的临床不同的临床&病理特征病理特征AT.Shaw,et al.J AT.Shaw,et al.J ClinClin OncolOncol,2009,2009不同的不同的患者预后患者预后11ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC定义定义ALKALK阳性非小细胞肺癌：阳性非小细胞肺癌：是指包括ALK FISHALK FISH检测阳性检测阳性、ALKALK序列融合变异序列融合变异或ALKALK融合蛋白表达阳融合蛋白表达阳性性的肺癌，肿瘤细胞中存在ALK融合基因表达，是非小细胞肺癌的一个分子亚型，常见于腺癌，该类患者通常可从ALK抑
8、制剂治疗中获益。张绪超等张绪超等.中华病理学杂志中华病理学杂志 2013;42(6):402-406.2013;42(6):402-406.12主要主要内容：内容：ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC的诊断的诊断ALKALK阳性非小细胞肺癌的定义阳性非小细胞肺癌的定义ALKALK检测适宜人群检测适宜人群ALKALK检测诊断流程专家共识检测诊断流程专家共识中华中华病理学杂志病理学杂志20132013年年6 6月第月第4242卷第卷第6 6期期中华肿瘤杂志中华肿瘤杂志20142014年年7 7月第月第3636卷第卷第7 7期期中华结核呼吸科杂志中华结核呼吸科杂志20142014年年3 3月第月
9、第2727卷第卷第3 3期期13ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC的诊断的诊断-三大指南推荐三大指南推荐适宜人群适宜人群诊断方法诊断方法中国中国EGFREGFR与与ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC诊断及治疗指南（诊断及治疗指南（20142014）所有所有含腺癌成分的含腺癌成分的NSCLCNSCLCFISH,FISH,经权威机构批准的经权威机构批准的IHCIHC与与RT-PCRRT-PCR，其余其余IHCIHC可做为筛选可做为筛选CSCOCSCO中国专家共识中国专家共识所有所有含腺癌成分的含腺癌成分的NSCLCNSCLC，富集人群可优，富集人群可优先检测先检测FISH,FISH,V
10、entanaVentana IHC,IHC,RT-PCR,RT-PCR,常规常规IHCIHC可做可做初筛初筛晚期非小细胞肺癌分子靶向治疗晚期非小细胞肺癌分子靶向治疗专家共识专家共识所有所有含腺癌成分的含腺癌成分的NSCLCNSCLCFISH,FISH,RT-PCRRT-PCR，VentanaVentana IHC IHC中华中华肿瘤杂志肿瘤杂志20142014年年7 7月第月第3636卷第卷第7 7期期中华病理学杂志中华病理学杂志20132013年年6 6月第月第4242卷第卷第6 6期期中华结核呼吸杂志中华结核呼吸杂志20142014年年3 3月第月第3737卷第卷第3 3期期142015
11、NCCN V1:2015 NCCN V1:小小标本的鳞癌也需标本的鳞癌也需检测检测EGFR&ALKEGFR&ALK15小标本鳞癌诊断存在误差小标本鳞癌诊断存在误差:首次诊断为鳞首次诊断为鳞癌再次重复评估诊断腺癌癌再次重复评估诊断腺癌或者腺鳞混合或者腺鳞混合PK.Paik,et al.PK.Paik,et al.MolMol Cancer Cancer TherTher.2012.2012.Patient#Patient#AgeAgeGenderGenderBiopsy Biopsy#1#1Biopsy Biopsy#1#1 MutationMutationBiopsy Biopsy#2#2Be
12、st response Best response to EGFR TKIto EGFR TKITTP onTTP onTKI(months)TKI(months)1(1)1(1)6161MMSquamousSquamous (L1)(L1)exonexon 19 del 19 delAdenosquamousAdenosquamous(LLL lung)(LLL lung)PRPR12.112.12(2)2(2)7171F FSquamousSquamous (RLL lung)(RLL lung)exonexon 19 del 19 delAdenocarcinomaAdenocarcin
13、oma(RLL lung)(RLL lung)UnavailableUnavailable19.619.63(3)3(3)5858F FSquamousSquamous (RUL lung)(RUL lung)exonexon 19 del 19 delAdenosquamousAdenosquamous(LLL lung)(LLL lung)SDSD23.623.64(4)4(4)4545F FSquamousSquamous (sacrum)(sacrum)exonexon 19 del 19 delAdenocarcinomaAdenocarcinoma(pleural (pleural
14、 fluid)fluid)UnavailableUnavailableUnavailableUnavailable5(5)5(5)4646MMSquamous Squamous (R lung)(R lung)exonexon 19 del 19 delAdenocarcinomaAdenocarcinoma(SC LN)(SC LN)PRPR5.0+5.0+6(6)6(6)7373MMSquamousSquamous (adrenal)(adrenal)exonexon 19 del 19 delAdenocarcinomaAdenocarcinoma(SC LN)(SC LN)Unavai
15、lableUnavailableUnavailableUnavailable7(10)7(10)5858MMSquamousSquamous (bronchus)(bronchus)L858RL858RSquamousSquamous(T8)(T8)PRPR1.91.98(new)8(new)7676MMSquamous Squamous (R lung)(R lung)insufficientinsufficientAdenocarcinomaAdenocarcinoma(L lung)(L lung)PRPR5.35.39(new)9(new)6868MMSquamous Squamous
16、 (L lung)(L lung)L858RL858RNoneNonePRPR2.8+2.8+10(new)10(new)3030F FAdenosquamoAdenosquamousus(R lung)(R lung)L858RL858RNoneNonePRPR8.48.411(new)11(new)5050MMAdenosquamoAdenosquamousus(L lung)(L lung)exonexon 19 del 19 delNoneNonePRPR9.2+9.2+16主要主要内容：内容：ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC的诊断的诊断ALKALK阳性非小细胞肺癌的定义阳性非
17、小细胞肺癌的定义ALKALK检测适宜人群检测适宜人群ALKALK检测诊断流程专家共识检测诊断流程专家共识中华中华病理学杂志病理学杂志20132013年年6 6月第月第4242卷第卷第6 6期期中华肿瘤杂志中华肿瘤杂志20142014年年7 7月第月第3636卷第卷第7 7期期中华结核呼吸科杂志中华结核呼吸科杂志20142014年年3 3月第月第2727卷第卷第3 3期期17NSCLC NSCLC 活检组织标本活检组织标本阴性或未知；据组织类型选择合适据组织类型选择合适技术技术新鲜标本新鲜标本VentanaVentana IHCIHC常规常规IHCIHC检测检测*阳性阳性FISHFISHRT-P
18、CRRT-PCR（qPCRqPCR、多重多重PCRPCR或或RACE-RACE-PCR-PCR-SeqSeq）EFGR突变且使用EGFR-TKIs后出现原发或继发耐药的患者石蜡标本石蜡标本3+/2+/1+阴性阴性ALKALK阳性阳性非小细胞肺癌非小细胞肺癌EGFREGFR突变检突变检测测中华病理学杂志中华病理学杂志20132013年年6 6月第月第4242卷第卷第6 6期期1818荧光原位杂交（荧光原位杂交（FISHFISH）检测检测NSCLCNSCLC中中EML4-ALKEML4-ALK融合的融合的现行现行标准标准采采用用“分离分离”分析分析，倒位倒位和和ALKALK重排后红色和绿色探针分重
19、排后红色和绿色探针分开开样本中样本中1515细胞红色和绿色信号细胞红色和绿色信号分开表示分开表示阳性结果阳性结果Varella Garcia,IASLC 2011;Abs#MTE36.1.Varella Garcia,IASLC 2011;Abs#MTE36.1.野生型野生型ALKALK重排重排19FISHFISH方法问题多多方法问题多多:15%15%阳性细胞阳性细胞Cut offCut off值的合理性值的合理性 1426例NSCLC患者接受FISH检测FISHFISH阳性细胞数阳性细胞数患者占比患者占比0%-9%0%-9%79.3%79.3%10%-15%10%-15%8.5%8.5%16
20、%-30%16%-30%1.4%1.4%31%-50%31%-50%2.7%2.7%50%50%8.1%8.1%DR.CamidgeDR.Camidge,et al.Cancer 2013,et al.Cancer 201320Ventana IHC Ventana IHC 试剂设计试剂设计ALKALK融合蛋白融合蛋白:无ALK重排的NSCLC不表达ALK融合蛋白 部分ALK融合蛋白表达较低Ventana IHCVentana IHC的原理的原理:使用具有高度敏感性和特异性的一抗D5F3 全自动仪操作，充分保证特异性 独有Optiview扩增技术，充分保证敏感性D5F3 rabbitt mon
21、oclonal antibodyOptiview DAB IHC DetectionOptiview Amplification Kit21VentanaVentana IHCIHC与与FISHFISH检测结果比较检测结果比较FISHFISH总数总数敏感性敏感性特异性特异性一致率一致率阳性阳性阴性阴性Ventana IHC(1)Ventana IHC(1)阳性阳性46753100%98.20%98.40%98.40%阴性阴性0377377Ventana IHC(2)Ventana IHC(2)阳性阳性3103194%100%99.10%99.10%阴性阴性2198200Ventana IHC(
22、2)Ventana IHC(2)阳性阳性32032100%100%100%100%阴性阴性0217217Ventana IHC(3)Ventana IHC(3)阳性阳性4024291%96%94%94%阴性阴性45357Ventana IHC(4)Ventana IHC(4)阳性阳性1801890%100%99.60%99.60%阴性阴性2503505(1)(1)JinghuiJinghui Wang,et al.Wang,et al.PLoSPLoS ONE ONE 2014 9(72014 9(7):e101551):e101551(2)(2)EugenEugen C.C.Minca,et
23、Minca,et al.al.J Mol Diagn 2013,15:341-346J Mol Diagn 2013,15:341-346(3)(3)MurryMurry W.W.Wynes,etWynes,et al.J al.J ThoracThorac OncolOncol.2014;9:631638.2014;9:631638(4)(4)Greta,etGreta,et al.Arch al.Arch PatholPathol Lab Med.Lab Med.doidoi:10.5858/arpa.2013-0388-OA:10.5858/arpa.2013-0388-OA22Vent
24、ana IHCVentana IHC优势二优势二可重复性高可重复性高全自动检测，避免操作流程中的误差，可重复性好全自动检测，避免操作流程中的误差，可重复性好23VentanaVentana ALK(D5F3)ALK(D5F3)的的 CFDACFDA注册注册临床实验临床实验 三家公立医院超过11001100例NSCLC样本进行Ventana ALK(D5F3)与FISH ALK结果的对比验证实验 结果表明Ventana ALK(D5F3)与FISH ALK的一致性为99.23%99.23%24Ventana IHCVentana IHC试剂盒已于试剂盒已于2013.82013.8全部获得全部获得
25、CFDACFDA批准，用于检测批准，用于检测ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC25LDK378 LDK378 全球全球IIIIII期临床使用期临床使用VentanaVentana IHCIHC做为伴随诊断方法做为伴随诊断方法LDK378 Versus Chemotherapy in Previously Untreated Patients With LDK378 Versus Chemotherapy in Previously Untreated Patients With ALK Rearranged Non-small Cell Lung CancerALK Rearranged
26、 Non-small Cell Lung Cancer（NCT01828099）Estimated Enrollment:Estimated Enrollment:348348Study Start Date:Study Start Date:July 2013July 2013Estimated Study Completion Date:Estimated Study Completion Date:June 2018June 2018Inclusion Criteria:Inclusion Criteria:1.Patient has a histologically or cytolo
27、gically confirmed diagnosis of non-squamous Non-small cell lung cancer(NSCLC)that is Anaplastic lymphoma kinase(ALK)positive as assessed by the Ventana the Ventana Immunohistochemistry(IHC)testImmunohistochemistry(IHC)test.The test will be performed at Novartis designated central laboratories.2.Pati
28、ent has newly diagnosed stage IIIB(who are not a candidate for definitive multimodality therapy)or stage IV NSCLC or relapsed locally advanced or metastatic NSCLC not previously treated with any systemic anti-cancer therapy(e.g.cytotoxic drugs,monoclonal antibody therapy,crizotinib or other ALK inhi
29、bitors,or other targeted therapies,either experimental or not),with exception of neo-adjuvant or adjuvant therapy3.Patient has at least one measurable lesion as defined by RECIST 1.1.A previously irradiated site lesion may only be counted as a target lesion if there is clear sign of progression sinc
30、e the irradiation26AlectinibAlectinib全球全球IIIIII期临床亦使用期临床亦使用VentanaVentana IHCIHC做为伴随诊断方法做为伴随诊断方法ALEX Study:A Randomized,Phase III Study Comparing ALEX Study:A Randomized,Phase III Study Comparing AlectinibAlectinib With With CrizotinibCrizotinib in Treatment-Naive in Treatment-Naive AnaplasticAnapla
31、stic Lymphoma Lymphoma KinaseKinase(ALK)-Positive (ALK)-Positive Advanced Non-Small Cell Lung Cancer(NSCLC)Patients(Advanced Non-Small Cell Lung Cancer(NSCLC)Patients(NCT02075840)Estimated Enrollment:Estimated Enrollment:286286Study Start Date:Study Start Date:August 2014August 2014Estimated Study C
32、ompletion Date:Estimated Study Completion Date:December 2017December 2017Inclusion Criteria:Inclusion Criteria:1.1.Histologically or Histologically or cytologicallycytologically confirmed diagnosis of advanced or recurrent(Stage IIIB not amenable for confirmed diagnosis of advanced or recurrent(Stag
33、e IIIB not amenable for multimodality treatment)or metastatic(Stage IV)NSCLC that is ALK-positive as assessed multimodality treatment)or metastatic(Stage IV)NSCLC that is ALK-positive as assessed by the Ventana by the Ventana IHC testIHC test2.Age/=18 years old3.Life expectancy of at least 12 weeks4
34、.ECOG PS of 0-25.Patients had no prior systemic treatment for advanced or recurrent(Stage IIIB not amenable for multimodality treatment)or metastatic(Stage IV)NSCLC6.Adequate renal,hematologic and liver function7.Patients must have recovered from effects of any major surgery or significant traumatic
35、 injury at least 28 days before the first dose of study treatment8.Measurable disease(by RECIST v1.1)prior to the administration of study treatment9.Prior brain or leptomeningeal metastases allowed if asymptomatic(e.g.,diagnosed incidentally at study baseline).Asymptomatic CNS lesions might be treat
36、ed at the discretion of the investigator per local clinical practice.If patients have neurological symptoms or signs due to CNS metastasis,patients need to complete whole brain radiation or gamma knife irradiation treatment.In all cases,radiation treatment must be completed at least 14 days before e
37、nrollment and patients must be clinically stable10.Use of highly effective contraception as defined by the study protocol27ALKALK阳性阳性NSCLCNSCLC诊断方法比较诊断方法比较FISH：昂贵的金标准金标准PCR：结果详细结果详细(For ALK(For ALK only)only)FISHFISH(Abbott(Abbott VysisVysis)IHCIHC(VentanaVentana/RTD)/RTD)IHCIHC(手动手动/CST)/CST)PCRPCR
38、（AmoyAmoy）SFDA批准时间2014年10月28日2013年8月8日/2013年3月26日可检测融合类型所有融合类型，但不能区分所有融合类型，但不能区分所有融合类型，但不能区分已知的多数融合类型操作要求高，需经培训且有经验医师判读简便简便简便所需组织量厚度3-5m的石蜡切片，1张厚度3-5m的石蜡切片，2张厚度3-5m的石蜡切片，1张0.1-0.5g RNA蜡块4-5片 胸水，新鲜组织优点特异性高操作简便、价格便宜、可直接诊断操作简便、价格便宜、可筛选操作简便、敏感性高价格高低低高Ventana：最具性价比具性价比的标准*依照规范化流程处理的依照规范化流程处理的FFPEFFPE样本，其
39、样本，其RNARNA质量已完全满足实时质量已完全满足实时RT-PCRRT-PCR的检测要求的检测要求中华病理学杂志中华病理学杂志20132013年年6 6月第月第4242卷第卷第6 6期期28NSCLCNSCLC驱动基因检测标本类型驱动基因检测标本类型肿瘤组织标本肿瘤组织标本 细胞学标本细胞学标本29细胞学样本细胞学样本国内外各指南推荐国内外各指南推荐指南来源指南来源细胞学检测推荐细胞学检测推荐ALKALK诊断方法诊断方法JLCSJLCS可用于诊断，推荐制成细胞蜡可用于诊断，推荐制成细胞蜡块块FISHFISH、IHCIHCSEOM and SEAPSEOM and SEAP未讨论未讨论CAP-
40、IASLC-AMPCAP-IASLC-AMP可用于诊断，细胞蜡块优于的可用于诊断，细胞蜡块优于的细胞学涂片细胞学涂片FISHFISH、IHCIHC用于筛选用于筛选ATLASATLAS可用于诊断，细胞蜡块与细胞可用于诊断，细胞蜡块与细胞学涂片均可学涂片均可FISHFISH、IHCIHC用于筛选用于筛选中国专家共识中国专家共识可用于诊断，细胞蜡块与细胞可用于诊断，细胞蜡块与细胞学涂片均可学涂片均可FISHFISH、IHCIHC，新鲜标本可用，新鲜标本可用PCRPCRNCCNNCCN未讨论未讨论AIOM and SIAPEC-IAPAIOM and SIAPEC-IAP可以诊断，包括细胞学涂片可以诊
41、断，包括细胞学涂片FISHFISH30中国中国ALKALK阳性非小细胞肺癌诊断阳性非小细胞肺癌诊断中华病理学杂志中华病理学杂志,2013,42(6):402-406,2013,42(6):402-406适合适合ALKALK融合基因诊断的肿瘤样本，包括各种组织样本和融合基因诊断的肿瘤样本，包括各种组织样本和细细胞学标本。胞学标本。组织标本获取手段包括手术标本、支气管镜、经皮肺穿刺、组织标本获取手段包括手术标本、支气管镜、经皮肺穿刺、淋巴结活检、手术活检等淋巴结活检、手术活检等。对于恶性胸腔积液、心包积液、痰液或支气管灌洗液、细胞对于恶性胸腔积液、心包积液、痰液或支气管灌洗液、细胞学穿刺和外周血肿
42、瘤细胞等样本，在细胞数量充足条件下可学穿刺和外周血肿瘤细胞等样本，在细胞数量充足条件下可制备制备细胞蜡块（细胞蜡块（cell blockcell block），检测方法可采用），检测方法可采用IHCIHC或或FISHFISH。如果是如果是新鲜细胞标本可考虑采用特异性新鲜细胞标本可考虑采用特异性PCRPCR方法方法。考虑到。考虑到细胞学样本的细胞数量少等特点，细胞学标本的检测结果解细胞学样本的细胞数量少等特点，细胞学标本的检测结果解释需格外谨慎释需格外谨慎。31胸水与组织学胸水与组织学ALKALK检测之间的比较检测之间的比较研究目的研究目的：浙大附一对：浙大附一对5252例经组织学例经组织学FI
43、SHFISH诊断诊断ALKALK阳性的患者采集胸水，阳性的患者采集胸水，通过通过VentanaVentana IHC IHC、RT-PCRRT-PCR、FISHFISH法进行胸水蜡块法进行胸水蜡块ALKALK检测，与组织学检测，与组织学对比，进行一致性分析。对比，进行一致性分析。研究结果研究结果：组织阳性率：组织阳性率15.4%15.4%（8/528/52）。总体符合度：）。总体符合度：VentanaVentana IHC IHC 100%100%（52/5252/52），），FISH 78.9%FISH 78.9%（41/5241/52），），RT-PCR 98.1%RT-PCR 98.1%
44、（51/5251/52）胸水与组织学胸水与组织学符合率符合率 （N=52N=52）VentanaVentana IHC IHCFISHFISHRT-PCRRT-PCRALKALK（+）100%100%（8/88/8）62.5%62.5%（5/85/8）87.5%87.5%（7/87/8）ALKALK（-）100%100%（44/4444/44）100%100%（33/3333/33）100%100%（44/4444/44）胸水检测中，胸水检测中，VentanaVentana IHC IHC检测最敏感，检测最敏感，其次为其次为RT-PCRRT-PCR，FISHFISH相对最低相对最低Zhou J
45、,et al.histopathology,2014 Sep 25Zhou J,et al.histopathology,2014 Sep 25其中有11例胸水样本因细胞量不足，FISH结果无法判定32116116例例 EGFR(-)EGFR(-)胸水样本中，胸水样本中，RT-PCRRT-PCR EML4-ALK EML4-ALK 阳性检阳性检出率为出率为34%34%（39/11639/116）胸胸水与组织样本水与组织样本 EML4-ALK EML4-ALK 检测的符合率为检测的符合率为85%85%。FISHFISH（组织）（组织）RT-RT-PCRPCR（胸水）（胸水）PositivePos
46、itiveNegativeNegativetotaltotalEML4-ALK(+)EML4-ALK(+)10212EML4-ALK(-)EML4-ALK(-)178TotalTotal11920Wu SG et al J Wu SG et al J ThoracThorac OncolOncol ，2012 Jan;7(1):98-1042012 Jan;7(1):98-104胸水与组织学胸水与组织学ALKALK检测之间的比较检测之间的比较33VentanaVentana IHC IHC和和FISHFISH检测胸水的检测胸水的ALKALK重排重排N=58FISH 阳性阳性（N=6）FISH
47、阴性阴性（N=52）IHC 阳性阳性（N=6）60IHC 阴性阴性（N=52）0525858例例ALK ALK VentanaVentana IHC IHC和和FISHFISH结果均可判读者结果均可判读者ALK ALK VentanaVentana IHC IHC和和FISHFISH结果符合率为结果符合率为100%100%四川大学四川大学华西医院对华西医院对6363例晚期例晚期NSCLCNSCLC癌性胸水细胞癌性胸水细胞块块进行进行ALK ALK VentanaVentana IHC IHC染色和染色和ALK ALK FISHFISHWangWang，weiyaweiya et al.Canc
48、er et al.Cancer(Cancer(Cancer CytopatholCytopathol)2015;123:117-22)2015;123:117-22.34根据胸水检测根据胸水检测ALKALK重排与临床治疗关系重排与临床治疗关系No.No.a aAgeAgeSexSexIHCIHC-ALK-ALKFISHFISH-ALK-ALKResponseResponseECOG ECOG PSPSTherapyTherapyMonthsMonthsDiscontinuatioDiscontinuation of n of crizotinibcrizotinibP5P547M+PD1Fir
49、st-line 2YesP8P882M+CR1First-line10NoP9P966F+SD1First-line 3YesP13P1360F+PR1First-line13NoP16P1652M+PR0Second-line13NoP20P2045M+SD1First-line16NoP21P2150M+SD1Third-line 6NoP22P2251F+SD3First-line 4NoP24P2421F+PR3First-line 2NoP26P2648F+CR1First-line 6NoP27P2731F+PR1First-line 1No客观缓解率（客观缓解率（ORR ORR）
50、：）：54.5%(6/11)54.5%(6/11)疾病控制率（疾病控制率（DCRDCR）：）：90.9%(10/11)90.9%(10/11)35细胞学标本替代组织学标本总结细胞学标本替代组织学标本总结在病理诊断方面，细胞学标本制作细胞学蜡块后，通过免疫在病理诊断方面，细胞学标本制作细胞学蜡块后，通过免疫组化染色，能够实现准确的病理诊断，可以成为组织学标本组化染色，能够实现准确的病理诊断，可以成为组织学标本良好的替代品；良好的替代品；在病理质控及采用正确前期处理方法的前提下，所有基因、在病理质控及采用正确前期处理方法的前提下，所有基因、且一种基因蛋白水平、且一种基因蛋白水平、DNADNA、RN
