1、临床微生物学尿培养操作规范-PPT课件-PPT精选文档临床微生物学尿培养操作规范l尿路感染尿路感染l尿液标本采集和运送尿液标本采集和运送l标本验收标本验收l实验室检查实验室检查l结果观察和报告结果观察和报告尿路感染l概念：综合症l分类：上尿路感染（如肾盂肾炎）下尿路感染（如膀胱炎）男性还可出现前列腺感染，不同部位同 时感染也很常见l感染人群：各个年龄段，好发于女性，男：女之比为1:10。尿路感染l症状：发热、尿频、尿急、尿痛、排尿困难和耻骨上压痛，临床表现可因患者的年龄和健康状况不同而异。l诊断方法：细菌学检查，主要致病菌可因尿路感染的原因不同而有所不同（表1）表1 尿路感染的原因及常见病原菌
2、一、尿液标本采集和运送l1.采集指征采集指征：（1）有典型的尿路感染症状；（2）肉眼脓尿或血尿；（3）尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性；（4）不明原因的发热，无其他局部症状；（5）留置导尿管的患者出现发热；（6）膀胱排空功能受损；（7）泌尿系统疾病手术前。一、尿液标本采集和运送l2.采集方法采集方法：未使用抗生素之前，注意避免污染l（1）清洁中段尿清洁中段尿：晨尿最好，睡前少饮水，起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围；开始排尿，将前段尿排去，中段尿约10 20 ml 直接排入专用的无菌容器中，立即送检，2 h 内接种。l简单、易行
3、，最常用l很容易污染，应嘱咐患者正确留取。一、尿液标本采集和运送l2.采集方法采集方法：l（2）耻骨上膀胱穿刺耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液l是评估膀胱内细菌感染的“金标准”l有一定的痛苦，患者难以接受l主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集一、尿液标本采集和运送l2.采集方法采集方法：l（3）直接导尿直接导尿：按常规方法对会阴局部进行消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液l可减少尿液标本污染，准确反映膀胱感染情况。l但有可能将下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染l不提倡使用一、尿液标本采集和运送l2.采集方法采集方法：l（4）小儿收集包
4、小儿收集包：无自控能力的小儿l很难避免会阴部菌群污染产生假阳性l所以只有在检验结果为阴性时才有意义。l如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析l必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复检。一、尿液标本采集和运送l2.采集方法采集方法：l（5）留置导尿管留置导尿管:先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液l防止混入消毒剂l注意不能从尿液收集袋中采集尿液。一、尿液标本采集和运送l3.采集容器采集容器：l（1）应由惰性材料制成；l（2）洁净、无菌、加盖、封闭、防渗漏；l（3）不含防腐剂和抑菌剂；l（4）广口、具有较宽的底部、容积应 50 mll（5）盒盖易于开启。一、尿液标本
5、采集和运送l4.标本运送标本运送：及时送检、及时接种，l室温下保存时间不得超过2 h（夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存），4冷藏保存时间不得超过8 h，但应注意冷藏保存的标本不能用于淋病奈瑟菌培养。二、标本验收l1.申请单验收申请单验收：要求除患者的基本信息以外还应包括标本收集时间、收集方式、是否已使用抗生素等，申请单是否填写完整。l2.标本验收标本验收：（1）标本标识是否与申请单相符；（2）标本容器有无溢漏、渗出，是否加盖；（3）送检时间是否超过规定的标本保存时间。二、标本验收l3.不合格标本处理不合格标本处理：（1）对申请单信息不全者应设法与临床医师取得联系；（2）对标识不符、送检容器不合
6、格、送检时间超过规定时间的标本应注明原因，退回，要求重新留取标本，并做记录。三、实验室检查l1.直接涂片检查直接涂片检查：无需常规进行涂片检查。l对于临床怀疑淋病奈瑟菌、假丝酵母菌或结核分枝杆菌感染的标本：可用无菌吸管吸取尿液5 10 ml置无菌试管中，3 000 4 000 r/min 离心30 min，倾去上清液，取沉渣涂片，行革兰染色或抗酸染色后镜检。三、实验室检查l2.细菌培养细菌培养：l（1）普通培养普通培养：将收集标本的容器轻轻旋转混匀，用定量接种环分别取尿液1 l 涂抹接种血平板和麦康凯平板（或中国蓝平板），35 37培养18 24 h，观察结果。对导尿、耻骨上膀胱穿刺和已使用抗
7、生素治疗的患者标本应增加一个10 l 接种量。l（2）特殊培养特殊培养：对怀疑有苛养菌感染者应采用耻骨上膀胱穿刺法或导尿法采集样本，加种一块巧克力平板，置5%CO2环境中培养48 h。检查淋病奈瑟菌、结核分枝杆菌感染时无需做定量培养，可将标本离心后取尿沉渣进行培养，以提高阳性率。三、实验室检查l2.细菌培养细菌培养l（3）普通培养18 24 h 无菌生长时，应将所有培养基继续培养24 h。四、结果观察和报告l1.结果观察和评价：结果观察和评价：l（1）菌落计数菌落计数：计数平板上的菌落数，采用1 l 接种量者，将菌落数乘以103；采用10 l 接种量者，将平板菌落数乘以102，即为每ml 尿液
8、中所含有的细菌数（CFU/ml）。如菌落生长过多无法精确计数时，则报告 105 CFU/ml。四、结果观察和报告l1.结果观察和评价：结果观察和评价：l（2）结果评价结果评价：正常情况下从肾脏排泌至膀胱的尿液是无菌的，但膀胱中的尿液经尿道排出体外时可受到下尿道中正常菌群的污染，而出现细菌。因此对不同方法获取的尿液标本培养结果需正确评价，才能有效指导临床合理治疗。一般，清洁中段尿标本中单种细菌菌落数105 CFU/ml 可能为感染;5104CFU/ml 可能为污染，在两者之间需要根据具体情况进行评估。表2 不同方法采集的尿标本培养结果评价四、结果观察和报告l2.阴性培养结果报告：培养48 h 无
9、菌落生长，即为阴性。l接种1 l 尿量者，应报告“培养48 h，菌落计数 103CFU/ml”；l接种10 l 尿量者，应报告“培养48 h，菌落计数 105CFU/ml 只是诊断尿路感染的一般标准。对一个实验室而言，过松，滥用与浪费，过严，漏诊。l与临床医师密切合作，根据不同的情况制定不同的解释标准：尿培养菌落计数可受多种因素的影响，在一些患者即使菌落数较少，也有明显的临床意义，所以对菌落数 5 104 CFU/ml，“规范”中认为无意义的阳性结果，不应随意丢弃，必要时应根据患者的具体情况或与临床医师联系后，附录：附录：l决定是否需要做细菌鉴定和药敏试验。判断结果时应予以注意：（1）使用抗生
10、素治疗，细菌生长受到抑制；（2）尿液稀释，尿比重 1.003，营养成分减少，细菌生长迟缓；（3）尿pH 8.5，细菌生长受阻；（4）尿频时，膀胱内细菌停留时间短，菌落数减少；（5）尿道口消毒液混入标本中，影响细菌繁殖，菌落数少；（6）不同种类的细菌生长速度不同、营养要求不同，菌落计数有所不同，有文献推荐：革兰阴性菌以菌落计数 105CFU/ml，而革兰阳性菌以菌落计数 104CFU/ml 为诊断尿路感染的标准。附录：附录：l4.尿培养检验中常见的错误：l（1）将尿液标本接种于增菌液中；l（2）将中段尿标本离心后取沉渣进行一般细菌培养；l（3）标本保存时间超时，细菌大量繁殖；l（4）直接用导尿管头划线培养；l（5）使用中段尿标本做厌氧菌培养。临床微生物学检验操作规范编写组成员l顾问：王金良l组长：童明庆 l副组长：倪安平 刘建栋l成员（按姓氏笔画为序）：马筱玲 王树琴 徐英春 倪语星 孙自镛 李桂琴 任健康 邹伟民 谷海瀛 张远春 桂炳东
