1、 一、病毒感染传播方式二、病毒感染致病机制 三、病毒感染的类型 四、病毒感染与肿瘤 病毒的传播方式水平传播：病毒在人群中个体间的传播 通过呼吸道、消化道、皮肤粘膜病毒侵入机体的三大重要门户病毒侵入机体的三大重要门户 垂直传播：通过胎盘、产道、乳汁，病毒由亲 代传播给子代的方式。胎盘、产道 乳汁病毒感染对宿主细胞的致病作用（细胞水平）病毒感染的免疫病理作用（整体水平）病毒释放、细胞裂解溶细胞型释放细胞裂解破坏！p杀细胞效应在体外实验中通过细胞的病理改变杀细胞效应在体外实验中通过细胞的病理改变（CPE）来反映）来反映正常细胞感染病毒后细胞病变（CPE）如发生在体内，后果？如发生在体内，后果？有包膜
2、病毒释放方式不破坏细胞，但可使细胞表面出现病毒抗原-靶细胞细胞膜上出现新抗原细胞膜上出现新抗原感染细胞易受免疫系统攻击靶细胞细胞融合细胞融合形成多核巨细胞诊断意义包涵体（包涵体（inclusion bodyinclusion body）病毒感染的细胞浆病毒感染的细胞浆内内/核内，出现的光镜下可见的圆形或椭圆形核内，出现的光镜下可见的圆形或椭圆形斑块，可作为病毒感染的依据。斑块，可作为病毒感染的依据。狂犬病毒包涵体-内基小体巨细胞病毒包涵体 潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹潜伏性病毒感染：带状疱疹潜伏性病毒感染：带状疱疹持续性病毒感染干扰素 interferon,
3、IFN概念：概念：由病毒或其他干扰素诱生剂由病毒或其他干扰素诱生剂 刺激人或动物细胞所产生的刺激人或动物细胞所产生的 具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节 等多种活性作用的糖蛋白等多种活性作用的糖蛋白v 诱生剂：诱生剂：病毒、细菌内毒素、病毒、细菌内毒素、poly I:C poly I:C 等等v 性质：性质：小分子糖蛋白，小分子糖蛋白，5630min5630min灭活，灭活，pH2-10pH2-10稳定稳定 有一定抗原性有一定抗原性IFN的诱生和作用示意图激活核酸酶间接性、广谱性（非特异性）、种属特异性、间接性、广谱性（非特异性）、种属特异性、早期中断病毒复制，阻止感染扩
4、散早期中断病毒复制，阻止感染扩散v抗病毒作用特点抗病毒作用特点v抗病毒作用意义抗病毒作用意义v抗病毒免疫v干扰素的其它作用（干扰素的其它作用（INF-）v抗病毒免疫v NKNK细胞细胞二、特异性免疫按种类：按种类：IgG IgM IgA IgG IgM IgA 体液免疫：体液免疫：按功能：按功能：中和抗体、中和抗体、血凝抑制抗体血凝抑制抗体、补体结合抗体补体结合抗体-内部抗原抗内部抗原抗体v抗病毒免疫外部抗原抗体外部抗原抗体外部抗原内部抗原血凝素中和抗体：中和抗体：针对病毒某些表面抗原的抗体，针对病毒某些表面抗原的抗体，能与细胞外游离病毒结合，阻能与细胞外游离病毒结合，阻止病毒吸附易感细胞，消
5、除病止病毒吸附易感细胞，消除病毒感染性毒感染性I IgG G、IgM、S IgA作用机制：直接封闭与细胞受体结合的病毒抗原表位改变病毒表面构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞针对病毒包膜上血凝素针对病毒包膜上血凝素 刺突刺突的抗体，可消除病毒感染性的抗体，可消除病毒感染性 补体结合抗体补体结合抗体-非中和抗体非中和抗体病毒内部抗原刺激机体产生的抗体，病毒内部抗原刺激机体产生的抗体，一般不能中和病毒、清除感染；但可一般不能中和病毒、清除感染；但可作为血清学诊断的标准作为血清学诊断的标准细胞免疫：细胞免疫：抗病毒感染中起重要作用抗病毒感染中起重要作用 CD8+TCD8+T细胞（细胞毒性细胞（细胞毒性T
6、 T细胞细胞CTLCTL）特异性直接杀伤感染病毒的靶细胞特异性直接杀伤感染病毒的靶细胞CD4+TCD4+T细胞细胞 （Th1Th1）释放多种细胞因子，发挥细胞免疫效应释放多种细胞因子，发挥细胞免疫效应免疫应答的类型和过程示意图免疫应答的类型和过程示意图病毒为细胞内感染的微生物病毒为细胞内感染的微生物清除感染病毒的靶细胞，清除感染病毒的靶细胞，彻底清除病毒感染，主要依靠细胞免疫彻底清除病毒感染，主要依靠细胞免疫v抗病毒免疫第三节第三节 病毒感染的检查方法与防治原则病毒感染的检查方法与防治原则一、一、病毒感染的检查方法病毒感染的检查方法（一）、（一）、标本采集与送检：标本采集与送检：供分离病毒、检
7、出核酸及抗原的标本：供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：血清学诊断的标本：血清学诊断的标本：原则：1.尽早采取：发病初期、采取急性期 2.部位适宜：由感染部位采取 3.冷藏速送：装有冰块或干冰的容器内 防止病毒灭活双份血清，4-20保存病毒材料采集与检验结果的关系病毒材料采集与检验结果的关系采取标本的时期采取标本的时期检查病毒及其成分检查病毒及其成分测定抗体测定抗体潜伏期及前驱期潜伏期及前驱期刚发病或急性期刚发病或急性期恢复期及康复期恢复期及康复期较难查见较难查见最多查见最多查见很难查见很难查见未增多未增多未增多或增未增多或增多不明显多不明显明显增多明显增多（常超过（常超过4倍）倍）理化因素对病
8、毒的影响理化因素对病毒的影响温度：病毒在病毒在pH5.0以下或以下或pH9.0以上迅速灭活以上迅速灭活射线：射线：大多大多病毒耐冷不耐热，但有例外的，如大多大多病毒耐冷不耐热，但有例外的，如HBV等等pH：射线，射线，射线，紫外线多能使病毒灭活射线，紫外线多能使病毒灭活化学因素：化学因素：氧化剂氧化剂，卤素及其他化合物有灭活病毒的功能脂溶剂脂溶剂 可破坏有包膜的病毒酚类酚类可 除去病毒衣壳蛋白甲醛甲醛 可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大（二）、常规分离与鉴定（二）、常规分离与鉴定动物接种动物接种-动物模型动物模型鸡胚接种鸡胚接种组织培养组织培养器官培养移植培养 细胞培养 原代细胞培养二倍体
9、细胞培养传代细胞培养三大培养方法三大培养方法1、病毒分离、病毒分离标本采集标本采集杀灭杂菌杀灭杂菌（青链霉素青链霉素）接种接种鉴定病毒种型鉴定病毒种型易感动物易感动物出现病状出现病状鸡胚鸡胚病变或死亡病变或死亡细胞培养细胞培养细胞病变细胞病变三大方法三大方法2、病毒鉴定、病毒鉴定（1）.形态学鉴定形态学鉴定观察观察CPECPE。常见的细胞形态学变化为细胞变圆、坏死、。常见的细胞形态学变化为细胞变圆、坏死、溶解、脱落或形成合胞体。有些病毒能形成包涵体。溶解、脱落或形成合胞体。有些病毒能形成包涵体。正常细胞正常细胞病变细胞病变细胞多见于以出芽方式释放的病毒。多见于以出芽方式释放的病毒。红细胞吸附红
10、细胞吸附正常细胞正常细胞 血吸附作用血吸附作用吸附试验可通过特异抗血清抑制来达到鉴定具有吸附试验可通过特异抗血清抑制来达到鉴定具有吸附特性的病毒吸附特性的病毒 血凝作用血凝作用血凝试验血凝试验血凝抑制试验血凝抑制试验（3）病毒成分的直接检测）病毒成分的直接检测 用免疫学或分子生物学技术直接检查感染细用免疫学或分子生物学技术直接检查感染细胞或其上清液中病毒抗原（或核酸）。胞或其上清液中病毒抗原（或核酸）。病毒的快速诊断病毒的快速诊断光镜光镜-包涵体电镜电镜免疫荧光免疫荧光ELISA分子生物学技术分子生物学技术杂交Southern blotPCRNorthern blot 电子显微镜检查电子显微镜
11、检查 病毒的很多特征如大小、形态、结构等必须借助电子显微病毒的很多特征如大小、形态、结构等必须借助电子显微镜进行检查。对于目前尚难培养而形态又非常典型的病毒，可镜进行检查。对于目前尚难培养而形态又非常典型的病毒，可直接从感染组织或分泌液，或者接种病料的鸡胚和细胞培养收直接从感染组织或分泌液，或者接种病料的鸡胚和细胞培养收获的材料作电子显微镜检查，直接观察病毒粒子。获的材料作电子显微镜检查，直接观察病毒粒子。正染法：超薄切片法正染法：超薄切片法负染技术负染技术 酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验（ELISA）将已知的抗体或抗原结合在某种固相裁体上，并保持其将已知的抗体或抗原结合在某种固相裁体上，并
12、保持其免疫活性。测定时，将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步免疫活性。测定时，将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。然后加入酶骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。然后加入酶的作用底物催化显色，进行定性或定量测定。的作用底物催化显色，进行定性或定量测定。间接间接ELISA夹心夹心ELISA335533333355555533553355模板模板DNA双链双链形成新的双链形成新的双链DNA退火退火变性变性 聚合酶链反应（聚合酶链反应（PCR）核酸杂交技术核酸杂交技术核酸探针（核酸探针（probe）是指能与特定核酸序列）是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已
13、知核酸片段，可检测发生特异性互补的已知核酸片段，可检测待检样品中特定的基因顺序。待检样品中特定的基因顺序。二、病毒的血清学诊断二、病毒的血清学诊断中和试验中和试验补体结合试验补体结合试验血凝抑制试验血凝抑制试验免疫扩散等免疫扩散等virus1 1、中和反应、中和反应 观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡，能否抑制观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡，能否抑制病毒的细胞病变效应。凡能与病毒结合，使其失去感染力的抗病毒的细胞病变效应。凡能与病毒结合，使其失去感染力的抗体又称中和抗体。体又称中和抗体。2 2、免疫扩散、免疫扩散 三、病毒感染的防治三、病毒感染的防治免疫预防免疫预防人工主动免疫人工主动免疫灭活疫苗：乙脑疫苗 狂犬疫苗 流感灭活疫苗HAV等减毒活疫苗：脊髓灰质炎疫苗麻疹疫苗腮腺炎疫苗风疹疫苗HAV疫苗 其他疫苗：基因工程疫苗，核酸疫苗，亚单位疫苗等药物防治药物防治金刚烷胺金刚烷胺-抑制病毒脱壳抑制病毒脱壳-预防感冒预防感冒 核苷类药物核苷类药物病毒蛋白酶的抑制物病毒蛋白酶的抑制物-indinavir其他其他-干扰素及干扰素诱生剂，中草药干扰素及干扰素诱生剂，中草药抗病毒基因治疗抗病毒基因治疗-asODN，asON，核酶，核酶-疱疹净，阿昔洛韦，疱疹净，阿昔洛韦，AZT抗病毒药物抗病毒药物特异性抗体治疗性疫苗免疫制剂
