1、病毒感染的检查方法和防治原则第一节第一节 病毒感染的检测方法病毒感染的检测方法一、病毒分离培养与鉴定：一、病毒分离培养与鉴定：(1)急性期标本；急性期标本；(2)根据感染性质取不同的标本；根据感染性质取不同的标本；(3)标本置于转运液中；标本置于转运液中；(4)冷藏快运。冷藏快运。2.病毒的分离培养病毒的分离培养动物接种动物接种鸡胚培养鸡胚培养细胞培养细胞培养原代细胞培养原代细胞培养二倍体细胞株二倍体细胞株传代细胞系传代细胞系绒毛尿囊膜痘病毒特异性损伤动物的红细胞而发生血吸现象。Fig HSV 荧光抗体法查抗原动物的红细胞而发生血吸现象。三、检测机体的体液免疫应答：其他：IFN、TNF、IL-
2、2、中草药等抑制病毒复制。抗病毒基因治疗：asODN、asON、ribozyme(4)病毒蛋白、核酸的检测：Fig A)HIV attach to a CD4 receptor.(3)标本置于转运液中；在体外连续培养5060代仍保持其二倍染色体数目的单型细胞。化、突变的原代细胞或二倍体细胞株。蚀斑测定 plaque forming unit/PFU病毒感染宿主细胞后，细胞形态的变化，如细胞团缩、肿大、融合等。动物或人组织直接用蛋白酶消化所得的细胞经体外培养后可贴壁或悬浮生长；蚀斑测定 plaque forming unit/PFU抗病毒基因治疗：asODN、asON、ribozyme(1)原代
3、细胞培养原代细胞培养 动物或人组织直接用蛋白酶消化所得动物或人组织直接用蛋白酶消化所得的细胞经体外培养后可贴壁或悬浮生长；的细胞经体外培养后可贴壁或悬浮生长；(2)二倍体细胞二倍体细胞株株 在体外连续培养在体外连续培养5060代仍保持其二倍染色代仍保持其二倍染色体数目的单型细胞。体数目的单型细胞。为生产人用疫苗的首选细胞株。为生产人用疫苗的首选细胞株。(3)传代细胞传代细胞系系 能在体外连续传代、来自癌细胞或发生自发转能在体外连续传代、来自癌细胞或发生自发转化、突变的原代细胞或二倍体细胞株。化、突变的原代细胞或二倍体细胞株。(1)细胞病变效应：细胞病变效应：cytopathic effect，
4、CPE 病毒感染宿主细胞后，细胞形态的变化，如细病毒感染宿主细胞后，细胞形态的变化，如细胞团缩、肿大、融合等。胞团缩、肿大、融合等。绒毛尿囊膜痘病毒特异性损伤(3)标本置于转运液中；抗病毒基因治疗：asODN、asON、ribozyme三、检测机体的体液免疫应答：为生产人用疫苗的首选细胞株。(1)细胞病变效应：cytopathic effect，CPE某些病毒感染的宿主细胞能吸附脊椎能在体外连续传代、来自癌细胞或发生自发转化、突变的原代细胞或二倍体细胞株。核苷类药物 阻抑子代病毒结构基因的合成与表达。二、检测病毒的基本组成能在体外连续传代、来自癌细胞或发生自发转Negri Body*包涵体形成
5、的观察(2)红细胞吸附：红细胞吸附：某些病毒感染的宿主细胞能吸附脊椎某些病毒感染的宿主细胞能吸附脊椎动物的红细胞而发生血吸现象。动物的红细胞而发生血吸现象。(3)干扰现象：干扰现象：(4)病毒蛋白、核酸的检测：病毒蛋白、核酸的检测：Fig HSV 荧光抗体法查抗原荧光抗体法查抗原蚀斑测定蚀斑测定 plaque forming unit/PFU50%组织细胞感染量组织细胞感染量50%tissue culture infective doseTCID50TCID(50%tissue culture infective dose):在半数细胞培养板孔或试管内引起细胞在半数细胞培养板孔或试管内引起细胞
6、病变（病变（CPE）的病毒量的病毒量空斑试验空斑试验：在细胞培养表面覆盖一层半固体：在细胞培养表面覆盖一层半固体物质使细胞病变形成空斑物质使细胞病变形成空斑二、检测病毒的基本组成二、检测病毒的基本组成蛋白抗原蛋白抗原病毒核酸病毒核酸PCR cycler三、检测机体的体液免疫应答：三、检测机体的体液免疫应答：1、单份血清检测：、单份血清检测：IgMIgG2、双份血清检测：、双份血清检测：IgG恢复期恢复期/早期早期 4:1Fig Identification of specific IgM antibody by capture and ELISA.第二节第二节 病毒感染的防治原则病毒感染的防治
7、原则一、抗病毒治疗一、抗病毒治疗1.抗病毒药物或制剂抗病毒药物或制剂 核苷类药物核苷类药物 阻抑子代病毒结构基因的合成与表达阻抑子代病毒结构基因的合成与表达。病毒蛋白酶的抑制剂病毒蛋白酶的抑制剂 阻止大分子病毒蛋白的降解阻止大分子病毒蛋白的降解。其他：其他：IFN、TNF、IL-2、中草药等抑制病毒复制。中草药等抑制病毒复制。抗病毒基因治疗：抗病毒基因治疗：asODN、asON、ribozyme 策略：作用于病毒复制周期的不同环节策略：作用于病毒复制周期的不同环节吸附吸附拟受体制剂拟受体制剂拟配体制剂拟配体制剂中和抗体中和抗体穿入穿入金刚烷胺金刚烷胺脱壳脱壳生物合成生物合成装配、释放装配、释放核苷类似物核苷类似物干扰素干扰素反义技术等反义技术等Fig A)HIV attach to a CD4 receptor.B)A soluble synthetic version of the receptor can prevent attachment of the virus.mRNAProtein谢谢观看谢谢观看谢谢观看谢谢观看
