沉淀反应专业医学知识宣讲讲义课件.ppt

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1、沉淀反应专沉淀反应专业医学知识业医学知识宣讲宣讲 第一节 沉淀反应的特点可溶性抗原+相应抗体 肉眼可见的沉淀形成肉眼可见的大的免疫形成肉眼可见的大的免疫复合物。沉淀线或沉淀环复合物。沉淀线或沉淀环的观察以及免疫比浊法中的观察以及免疫比浊法中的终点法就是测定此阶段的终点法就是测定此阶段形成的复合物形成的复合物第一阶段第一阶段第二阶段第二阶段沉淀反应分两个阶段沉淀反应分两个阶段抗原抗体特异性结合,快抗原抗体特异性结合,快速但不可见。免疫比浊法速但不可见。免疫比浊法中的速率法就是利用此阶中的速率法就是利用此阶段测定免疫复合物形成的段测定免疫复合物形成的速率。速率。免疫浊度测定免疫浊度测定絮状沉淀试验

2、絮状沉淀试验单向扩散试验单向扩散试验双向扩散试验双向扩散试验对流免疫电泳对流免疫电泳火箭免疫电泳火箭免疫电泳免疫电泳免疫电泳免疫固定电泳免疫固定电泳液体内沉液体内沉淀试验淀试验凝胶内沉凝胶内沉淀试验淀试验凝胶免疫凝胶免疫电泳技术电泳技术沉淀反应可分三类沉淀反应可分三类第二节 液体内沉淀试验絮状沉淀试验是将抗原与相应抗体混合,在电解质存在的条件下,抗原抗体结合形成肉眼可见的絮状沉淀物。根据沉淀现象的不同,液体内沉淀又可分为三类:絮状沉淀 环状沉淀 免疫浊度沉淀方法受抗原抗体比例的影响非常明显方法受抗原抗体比例的影响非常明显应用于测定抗原抗体反应的最适比例应用于测定抗原抗体反应的最适比例(三种类型

3、三种类型)一、一、絮状沉淀试验絮状沉淀试验 (flocculation)(flocculation)抗原稀释法:抗原最适比例抗原稀释法:抗原最适比例抗体稀释法:抗体最适比例抗体稀释法:抗体最适比例方阵滴定法:抗原抗体最适比例方阵滴定法:抗原抗体最适比例絮状沉淀试验絮状沉淀试验(1)将可溶性抗原作一系列倍比稀释。将可溶性抗原作一系列倍比稀释。(2)各管加入一定浓度的适量抗血清。各管加入一定浓度的适量抗血清。(3)振摇使抗原、抗体充分混匀,置振摇使抗原、抗体充分混匀,置37孵育。孵育。(4)产生沉淀量随抗原量而不同,以出现沉淀物产生沉淀量随抗原量而不同,以出现沉淀物最多的管为最适比例管。最多的管为

4、最适比例管。1:21:41:81:16 1:32 1:64 1:128各管抗原倍比稀释各管抗原倍比稀释加入抗血清加入抗血清各管抗体量不变各管抗体量不变振摇振摇 混匀、混匀、37孵育孵育沉淀量不同沉淀量不同出现沉淀量最多的管为最适比例管。出现沉淀量最多的管为最适比例管。轻摇轻摇絮絮 状状 沉沉示示 意意 图图淀淀AgAbAg2.抗体稀释法抗体稀释法 本法采用抗原量恒定与不同倍比稀释度的抗体反本法采用抗原量恒定与不同倍比稀释度的抗体反应,出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。应,出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。3.方阵滴定法方阵滴定法 抗原和抗体同时稀释,亦称棋盘抗原和抗体同时稀释,亦称棋盘(c

5、heckerboard)滴定法,是前二法的结合,可一次完成抗原和抗滴定法,是前二法的结合,可一次完成抗原和抗体的滴定并找出抗原、抗体的最适比。体的滴定并找出抗原、抗体的最适比。抗体抗体稀释度稀释度抗原稀释度抗原稀释度1/101/101/201/201/401/401/801/801/1601/1601/3201/3201/6401/640对照对照1/51/5+1/101/10+1/201/20+1/401/40+1/801/80+原理:当原理:当可溶性抗原可溶性抗原与相应抗体特异结合,与相应抗体特异结合,二者比例合适时,在特殊的缓冲液中它们快二者比例合适时,在特殊的缓冲液中它们快速形成一定大小

6、的抗原抗体复合物,使反应速形成一定大小的抗原抗体复合物,使反应液体出现浊度。利用现代光学测量仪器对浊液体出现浊度。利用现代光学测量仪器对浊度进行测定从而检测抗原含量。度进行测定从而检测抗原含量。1.1.抗原抗体的比例:反应体系中保持抗体过量抗原抗体的比例:反应体系中保持抗体过量2.2.抗体的质量抗体的质量 :特异性强,效价高,亲和力:特异性强,效价高,亲和力强并使用强并使用R R型抗体型抗体 3.3.抗原抗体反应液的最适抗原抗体反应液的最适PHPH为为6.56.58.5 8.5 4.4.使用增浊剂使用增浊剂影响因素影响因素免疫浊度测定免疫浊度测定1.1.透射免疫比浊法透射免疫比浊法2.2.散射

7、免疫比浊法散射免疫比浊法 3.3.免疫胶乳比浊法免疫胶乳比浊法 分类分类免疫浊度测定免疫浊度测定 可溶性抗原和相应抗体在凝胶中扩散,形成浓度可溶性抗原和相应抗体在凝胶中扩散,形成浓度梯度,在抗原抗体相遇并且浓度比例适当的位置梯度,在抗原抗体相遇并且浓度比例适当的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。常用的凝胶有琼脂、琼脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰常用的凝胶有琼脂、琼脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝胶。胺凝胶。原理原理AbAg试管法试管法原理:抗体与待测的抗原原理:抗体与待测的抗原,在两者比例合适的部位结在两者比例合适的部位结合形成沉淀环。合形成沉淀环。环的大小与抗原的浓度成正环的

8、大小与抗原的浓度成正相关。相关。技术要点:将抗体混入技术要点:将抗体混入0.9%0.9%琼琼脂糖内(脂糖内(5050),未凝固前倾),未凝固前倾注成平板,凝固后打孔(直径注成平板,凝固后打孔(直径3 35mm 5mm),孔中加入抗原溶),孔中加入抗原溶液和不同浓度的标准品,置湿液和不同浓度的标准品,置湿盒内盒内37,2437,2448h 48h 观察孔周观察孔周围是否出现沉淀环。围是否出现沉淀环。定量试验定量试验 一、单向扩散试验一、单向扩散试验 (平板法)(平板法)(single diffusion test)(single diffusion test)倾注平板打孔加样倾注平板打孔加样 放

9、置放置3737242448h48h观察沉淀环观察沉淀环 单向扩散试验(平板法)单向扩散试验(平板法)沉淀环的直径与待测标本含量两种计算方法沉淀环的直径与待测标本含量两种计算方法ManciniMancini曲线:曲线:大分子抗原大分子抗原时间扩散时间扩散48h48h,常数常数K KCdCd2 2普通坐标纸曲线普通坐标纸曲线 C C为抗原浓度,为抗原浓度,d d为沉淀环直径为沉淀环直径单向扩散试验单向扩散试验 (平板法)(平板法)T T1 1为为161624h24h;T T2 2为为242448h48h;T T3 3为为48h48h以以上上,可见可见T T3 3为直线,为直线,T T1 1为反抛物

10、线为反抛物线ManciniMancini曲线曲线t t1 1为为161624h24h;t t2 2为为242448h48h;t t3 3为为48h48h以上以上,可见可见t t1 1为直线,为直线,t t3 3为反抛物线为反抛物线FaheyFahey曲线曲线FaheyFahey曲线:曲线:小分子抗原小分子抗原扩散时间扩散时间24h24h常数常数K KlogCd logCd 半对数坐标纸曲线半对数坐标纸曲线 C C为抗原浓度,为抗原浓度,d d为沉淀环直径为沉淀环直径标准品抗原浓度测定标准品抗原浓度测定不同病人抗原浓度测定不同病人抗原浓度测定1.1.测定沉淀环直径测定沉淀环直径2.2.在标准曲线

11、上查找在标准曲线上查找 相应抗原浓度相应抗原浓度1.抗血清要求亲和力强、特异性好和效价高,注意保存。2.标准曲线必须每次制作。3.每次必须加质控血清。4.双环现象,不同扩散率抗原性相同的两个组分5.Ig测定中,可出现测量值降低:单克隆抗体。6.假阳性:多克隆抗体。二、双向扩散试验 (double immunodiffusion test)原理:将抗原抗体分别加在琼脂糖不同的对应原理:将抗原抗体分别加在琼脂糖不同的对应孔中,两者在凝胶中自由扩散,在比例合适孔中,两者在凝胶中自由扩散,在比例合适处形成白色沉淀线。处形成白色沉淀线。AbAg模拟图模拟图染色标本图染色标本图1.1.抗原抗体双向自由扩散

12、抗原抗体双向自由扩散2.242.24小时出结果小时出结果3.3.呈现沉淀线或弧呈现沉淀线或弧技术要点:平板玻璃上倾注一层均匀的琼脂技术要点:平板玻璃上倾注一层均匀的琼脂糖薄层,凝固后打孔,孔径为糖薄层,凝固后打孔,孔径为3mm,孔间,孔间距在距在35 mm之间,在相对的孔中加入抗之间,在相对的孔中加入抗原或抗体,放置湿盒原或抗体,放置湿盒371824h 后,观后,观察孔周围是否出现沉淀环。察孔周围是否出现沉淀环。1.1.检测未知抗原或抗体检测未知抗原或抗体2.2.抗原性质分析抗原性质分析 3.3.抗体效价滴定抗体效价滴定4.4.抗原或抗体纯度鉴定抗原或抗体纯度鉴定AgAbA B C D E F

13、 A:A:浓度浓度AgAg、AbAb及分子量近似;及分子量近似;B B:浓度:浓度AgAg、AbAb近似,分子量近似,分子量Ag Ag Ab Ab;C C:浓度:浓度AgAg、AbAb近似,分子量近似,分子量Ag Ag Ab Ab;D D:浓度:浓度AgAgAbAb,分子量近似;,分子量近似;E E:浓度:浓度AgAgAbAb,分子量,分子量Ag Ag Ab Ab;F F:浓度:浓度AgAgAbAb,分子量,分子量Ag Ag Ab Ab;2 2表示标准表示标准AgAg1 1表示待检表示待检AgAg待检待检AgAg与标准抗原完全吻合与标准抗原完全吻合待检待检AgAg中含有与标准中含有与标准AgA

14、g相同的相同的AgAg;还有另外的;还有另外的AgAg与与AbAb相对应相对应待检待检AgAg有与有与AbAb相对应的相对应的AgAg,但,但与标准与标准AgAg不同不同待检待检AgAg与标准与标准AgAg性质相同;但性质相同;但含量较低;含量较低;1.1.周围周围6 6个孔放不同稀释度的相应个孔放不同稀释度的相应AbAb。2.2.以出现沉淀线的血清最高稀释倍数为以出现沉淀线的血清最高稀释倍数为 该抗体的效价。该抗体的效价。3.3.可进行任意稀释。可进行任意稀释。“1”“1”为单一抗原抗体系统。为单一抗原抗体系统。“n”“n”为多个抗原抗体系统。为多个抗原抗体系统。*可以用混合抗原鉴定抗体纯度

15、。可以用混合抗原鉴定抗体纯度。*可以用混合抗体鉴定抗原纯度。可以用混合抗体鉴定抗原纯度。沉淀反应定义和特点沉淀反应的类型1.液体内沉淀试验 絮状沉淀试验 免疫浊度测定2.凝胶内沉淀试验 单向扩散试验 双向扩散试验3.免疫电泳技术掌握沉淀反应的含义和类型1.影响絮状沉淀试验的主要因素是()A.抗原的质量B.抗体的质量C.抗原抗体的比例D.反应溶液pHE.抗体特异性强2.双向扩散试验中沉淀环弯向抗原一方是因为()A.抗原分子量大B.抗体分子量大C.抗原抗体分子量大致相等D.抗原含量大E.抗体含量大3.单向扩散试验出现双环的沉淀线是因为()A.两种抗原B.两种抗体C.抗体为多克隆抗体D.抗原为多态性

16、抗原E.抗原为性质相同的两个组分扩散率不同4.沉淀反应中的钩状效应是因为()A.pH浓度过高B.pH浓度过低C.抗体过量D.抗原过量E.以上都不是5.单向扩散试验中大分子抗原和长时间扩散(48h)的结果处理宜用()A.Mancini曲线B.Fahey曲线C.海德堡曲线D.直线E.抛物线 电泳迁移率:同一电场条件下,各种带电泳迁移率:同一电场条件下,各种带电粒子在单位时间内移动的距离电粒子在单位时间内移动的距离 NH 3+NH 3+NH 2|+OH-|+OH-|Pr-COOH=Pr-COO-=Pr-COO-+H+H+阳离子 两性离子阴离子 pHpI 蛋白质的等电点(pI):在一定的介质中,某一蛋

17、白质解离成阴、阳离子的趋势相等,成为两性离子(净电荷为零),此时介质的pH称为蛋白质的等电点。电泳时有两种力,即电泳力和电渗力。电泳时有两种力,即电泳力和电渗力。如果物质原来带正电荷,向负极移动,则如果物质原来带正电荷,向负极移动,则因电渗作用向负极移动得更快。如果物质因电渗作用向负极移动得更快。如果物质向正极移动,所带电荷少,电泳力抵不过向正极移动,所带电荷少,电泳力抵不过电渗力,则也向负极移动。电渗力,则也向负极移动。支撑物支撑物 一般是采用琼脂或琼脂糖、纤维素膜、滤一般是采用琼脂或琼脂糖、纤维素膜、滤纸以及聚丙烯酰胺凝胶等。纸以及聚丙烯酰胺凝胶等。优点:优点:1.1.加快反应的速度。加快

18、反应的速度。2.2.提高了灵敏度。提高了灵敏度。3.3.增加了分辨率。增加了分辨率。电泳分析电泳分析沉淀反应沉淀反应抗原抗体反应抗原抗体反应的高度特异性的高度特异性电泳技术的高电泳技术的高分辨率、快速、分辨率、快速、微量微量免疫电泳技术免疫电泳技术免疫电泳包括免疫电泳包括:对流免疫电泳对流免疫电泳 火箭电泳火箭电泳 免疫电泳免疫电泳 免疫固定电泳免疫固定电泳 免疫印迹等免疫印迹等原理:双向扩散原理:双向扩散+电泳电泳比双向扩散试验灵比双向扩散试验灵敏度提高敏度提高8 81616倍倍技术要点:制备技术要点:制备1.2%1.2%巴比妥巴比妥琼脂凝胶板,在其上成对打琼脂凝胶板,在其上成对打孔,孔径孔

19、,孔径3mm3mm,孔距,孔距6 mm6 mm,于阴极侧孔内加待测血清,于阴极侧孔内加待测血清,阳性侧孔加抗血清,电泳条阳性侧孔加抗血清,电泳条件件3 34mA/cm4mA/cm,30min30min1h1h。一、对流免疫电泳一、对流免疫电泳(counter immunoeletrophoresis,CIEP)(counter immunoeletrophoresis,CIEP)通电通电蛋白质抗原常蛋白质抗原常带较强的负电带较强的负电荷,在电场中荷,在电场中向正极移动向正极移动抗体球蛋白抗体球蛋白带负电荷较少,带负电荷较少,籍电渗作用向籍电渗作用向负极泳动负极泳动 对流免疫电泳对流免疫电泳结果

20、分析:结果分析:无沉淀线出现则表明无相无沉淀线出现则表明无相应的抗原。应的抗原。沉淀线位于抗原抗体孔中沉淀线位于抗原抗体孔中间,说明两者比例较适合。间,说明两者比例较适合。沉淀线偏向抗原孔一方,沉淀线偏向抗原孔一方,表示抗体浓度抗原,反表示抗体浓度抗原,反之,则是抗体浓度抗原之,则是抗体浓度抗原浓度。浓度。对流免疫电泳对流免疫电泳电泳时凝胶中抗体不移动,样品孔中的电泳时凝胶中抗体不移动,样品孔中的抗原向正极泳动,随着抗原量的逐渐减抗原向正极泳动,随着抗原量的逐渐减少,抗原泳动的基底区越来越窄,抗原少,抗原泳动的基底区越来越窄,抗原抗体分子复合物形成的沉淀线逐渐变窄,抗体分子复合物形成的沉淀线逐

21、渐变窄,形成一个形状如火箭的不溶性复合物沉形成一个形状如火箭的不溶性复合物沉淀峰,抗体浓度固定时,峰的高度与抗淀峰,抗体浓度固定时,峰的高度与抗原量呈正相关。原量呈正相关。原理原理单向免疫扩散电泳单向免疫扩散电泳,定量检测技术定量检测技术二、火箭免疫电泳二、火箭免疫电泳(rocket immunoeletrophoresis,RIE)(rocket immunoeletrophoresis,RIE)1.2%1.2%巴比妥琼脂糖约巴比妥琼脂糖约5555,加入适量抗血,加入适量抗血清,混匀后制板,打孔,孔内加待测样品,清,混匀后制板,打孔,孔内加待测样品,样品孔放负极侧,样品孔放负极侧,6h 6h

22、后观察琼脂板上沉后观察琼脂板上沉淀峰,绘制标准曲线,求出待测样品浓度。淀峰,绘制标准曲线,求出待测样品浓度。技术要点技术要点火箭免疫电泳火箭免疫电泳1.1.琼脂(无电渗或电渗很小的)影响火箭形状不规则。琼脂(无电渗或电渗很小的)影响火箭形状不规则。2.2.电泳终点时间的确定。电泳终点时间的确定。3.3.标本数量多时应先通电后加样标本数量多时应先通电后加样,防止宽底峰形防止宽底峰形.4.IgG4.IgG定量时,可用甲醛与定量时,可用甲醛与IgGIgG上的氨基结合(甲酰上的氨基结合(甲酰化),抵消了电渗作用。化),抵消了电渗作用。影响因素影响因素火箭免疫电泳火箭免疫电泳火箭免疫电泳图火箭免疫电泳图

23、为标准抗原;为标本为标准抗原;为标本-+火箭免疫电泳示意图火箭免疫电泳示意图原理:区带电泳双向扩散原理:区带电泳双向扩散1 1、将蛋白质抗原在凝胶中电、将蛋白质抗原在凝胶中电泳分成肉眼不可见的若干区泳分成肉眼不可见的若干区带带 2 2、沿电泳方向挖一与之平行、沿电泳方向挖一与之平行的抗体槽,加入相应抗血清的抗体槽,加入相应抗血清进行双向扩散进行双向扩散 。技术要点:制备琼脂板技术要点:制备琼脂板打孔,加样于孔内,电打孔,加样于孔内,电泳泳2 23mA/cm 3mA/cm,0.50.51h1h后,槽内加入相应抗血后,槽内加入相应抗血清作双向扩散。清作双向扩散。三、免疫电泳三、免疫电泳(immun

24、oeletrophoresis,IEP)(immunoeletrophoresis,IEP)免疫电泳免疫电泳纯化抗原和抗体成分的分析及正常和纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常免疫球蛋白的识别与鉴定异常免疫球蛋白的识别与鉴定影响因素影响因素抗原抗体比例不当抗原抗体比例不当,需测抗原抗体最适比需测抗原抗体最适比 抗血清的的抗体谱抗血清的的抗体谱 ,混合抗血清的使用,混合抗血清的使用电泳条件直接影响分辨率电泳条件直接影响分辨率应用应用-+免疫电泳示意图免疫电泳示意图免疫电泳原理,不同之处是将抗免疫电泳原理,不同之处是将抗血清直接加于电泳后的蛋白质区血清直接加于电泳后的蛋白质区带表面,抗原抗体在凝胶

25、中直接带表面,抗原抗体在凝胶中直接发生沉淀反应,在适当位置形成发生沉淀反应,在适当位置形成抗原抗体复合物,经染色后,可抗原抗体复合物,经染色后,可对各类免疫球蛋白及其轻链进行对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型分型 原理原理区带电泳沉淀反应区带电泳沉淀反应四、免疫固定电泳四、免疫固定电泳Immuno fixation electrophoresis,IFEImmuno fixation electrophoresis,IFE先将患者血清或血浆在醋纤膜或先将患者血清或血浆在醋纤膜或琼脂上作区带电泳,根据血清蛋琼脂上作区带电泳,根据血清蛋白质的电荷不同将其分开,然后白质的电荷不同将其分开,然后将将Ig

26、GIgG、IgAIgA、IgMIgM、轻链和轻链和轻轻链的抗血清加于分离的蛋白质泳链的抗血清加于分离的蛋白质泳道,参考泳道则加蛋白质固定剂,道,参考泳道则加蛋白质固定剂,用于区带对照,作用一定时间后用于区带对照,作用一定时间后洗去游离蛋白质,染色后则可见洗去游离蛋白质,染色后则可见被固定的相应被固定的相应M M蛋白成分。蛋白成分。技术要点技术要点免疫固定电泳免疫固定电泳左图为左图为IgG IgG 型型,中图为中图为IgG IgG 型,右为正常型,右为正常 SP G AM SP G AM SPG AM 免疫固定电泳示意图免疫固定电泳示意图分辨率强,敏感度高,操作周期短,仅分辨率强,敏感度高,操作

27、周期短,仅需数小时,结果易于分析。需数小时,结果易于分析。应用应用最常用于最常用于M M蛋白的鉴定与分型,也蛋白的鉴定与分型,也用于尿中本周氏蛋白质的检测与用于尿中本周氏蛋白质的检测与、分型,脑脊液中寡克隆蛋白的检分型,脑脊液中寡克隆蛋白的检测与分型。测与分型。优点优点免疫固定电泳免疫固定电泳1.1.主要用于血液、体液中蛋白质的测定。主要用于血液、体液中蛋白质的测定。2.2.优点:稳定性好,敏感度高,精确度高,简便快优点:稳定性好,敏感度高,精确度高,简便快速,易于自动化,无放射性核素污染,适合大批量速,易于自动化,无放射性核素污染,适合大批量标本检测。标本检测。3.3.对流免疫电泳与火箭免疫

28、电泳技术由于电渗的缘对流免疫电泳与火箭免疫电泳技术由于电渗的缘故已不推荐使用。故已不推荐使用。4.4.免疫电泳扩散时间长,影响因素多,结果不易分免疫电泳扩散时间长,影响因素多,结果不易分析。析。5.5.免疫固定电泳分辨力强,敏感度高,结果易于分免疫固定电泳分辨力强,敏感度高,结果易于分析,常用于析,常用于M M蛋白的鉴定与分型。蛋白的鉴定与分型。沉淀反应在医学检验中的应用沉淀反应在医学检验中的应用沉淀反应沉淀反应凝集反应凝集反应相同处相同处都是抗原抗体反应,都分为两个阶段:抗原抗体的都是抗原抗体反应,都分为两个阶段:抗原抗体的特异性结合,出现肉眼可见的复合物。反应机制和特异性结合,出现肉眼可见

29、的复合物。反应机制和影响因素相同影响因素相同不同处不同处抗原性质抗原性质 可溶性抗原可溶性抗原颗粒性或可溶性致敏颗粒颗粒性或可溶性致敏颗粒反应时间反应时间 数小时至数天数小时至数天几分钟至十几分钟几分钟至十几分钟反应产物反应产物 主要由抗体所形成的主要由抗体所形成的沉淀物沉淀物主要由抗原分子形成的凝集主要由抗原分子形成的凝集物物稀释物稀释物抗原分子小,反应面抗原分子小,反应面积大,故稀释抗原积大,故稀释抗原抗原分子大,反应面积小,抗原分子大,反应面积小,故稀释抗体故稀释抗体反应形式反应形式 液体内、凝胶内、凝液体内、凝胶内、凝胶免疫电泳胶免疫电泳直接、间接、胶乳直接、间接、胶乳 电泳定义和影响因素 免疫电泳的基本原理 免疫电泳的类型 对流免疫电泳(CIEP)火箭免疫电泳(RIE)免疫电泳(IEP)固定免疫电泳(IFE)掌握免疫电泳的类型和原理RIE代表哪种电泳技术()A.对流免疫电泳B.火箭免疫电泳C.免疫电泳D.固定免疫电泳E.以上都不对下列哪种电泳技术可进行定量检测()A.对流免疫电泳B.火箭免疫电泳C.免疫电泳D.固定免疫电泳E.以上都不对鉴定多发性骨髓瘤最常用的免疫电泳技术是()A.对流免疫电泳B.火箭免疫电泳C.免疫电泳D.固定免疫电泳E.以上都不对

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