1、实验一坐骨神经腓肠肌标本的制备骨骼肌收缩 蟾蜍或蛙;蛙板、探针、粗剪刀、细剪刀、尖镊子、玻璃分针、大头针、培养皿、滴管、瓷碗、锌铜弓或铝银电极、任氏液。取蟾蜍一只,用左手握住,以示指压其头部前端使其尽量前俯,右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入,到达椎管,马上探针改变方向刺入颅腔,向各侧不断搅动,完全捣毁脑组织;再将探针原路退出,刺向尾侧,捻动探针使逐渐刺入整个椎管内,捣毁脊髓。此时蟾蜍下颌呼吸运动应消失,四肢松软,即成为一毁脑脊髓的蟾蜍(pithed toad)。否则须按上法再行捣毁。2、剪除躯干上部及内脏 用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。左手握住蟾蜍脊柱,右手将粗剪刀沿两侧(避开坐骨神经)剪开腹壁。
2、此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯干上部及内脏组织,弃于瓷碗内。3、剥皮 避开神经,用左手持圆头镊子夹住脊柱,右手捏住皮肤边缘,逐步向下牵拉剥离皮肤。拉至大腿时,如阻力较大,可先剥下一侧,再剥另一侧。将全部皮肤剥除后,将标本置于盛有任氏液的培养皿中。4、分离两腿:避开坐骨神经,用粗剪刀从背侧剪去骶骨,然后沿中线将脊柱剪成左右两半,再从耻骨联合中央剪开(为保证两侧坐骨神经完整,应幸免剪时偏向一侧)。将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。5、游离坐骨神经:取腿一条,先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部,然后用大头针将标本背位固定于干净蛙板上。再用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟
3、,纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分,直至分离至腘窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半腱肌和半膜肌肌腱,并绕至前方剪断股四头肌腱。自上向下剪断所有坐骨神经分支。将连着34节椎骨的坐骨神经分离出来。6、完成坐骨神经腓肠肌标本:将已游离的坐骨神经搭在腓肠肌上。用粗剪刀自膝关节周围向上剪除并刮净所有大腿肌肉,在距膝关节约1cm处剪断股骨。弃去上段股骨,保留部分即为坐骨神经腓肠肌标本 一、实验目的1.学习和掌握骨骼肌收缩的记录方法2.观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系3.观察骨骼肌的单收缩、收缩的总和以及强直收缩现象二、原理腓肠肌由许多肌纤维组成,刺激腓肠肌时,不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。当刺激强
4、度过小时,肌肉不发生收缩反应,刺激为阈下刺激。而能引起肌肉发生收缩反应的最小刺激为阈刺激,刺激的强度称为阈强度,当全部肌纤维同时收缩时,出现最大的收缩反应,引起最大收缩反应的最小刺激强度称为最适刺激强度。肌肉组织关于一个阈上强度的刺激发生一次迅速的收缩反应,称为单收缩。单收缩的过程可分三个时期:潜伏期、缩短期和舒张期。两个同等强度的阈上刺激,相继作用于神经肌肉标本,假如刺激间隔小于单收缩的时程,则出现两个收缩反应的重叠,称为收缩的总和。强直收缩:不完全强直收缩;完全强直收缩。a bcd蟾蜍坐骨神经腓肠肌单收缩曲线三、试剂与器材 蛙、计算机、生物信号处理系统、解剖针、手术剪、圆头手术镊、尖头手术
5、镊、玻璃分针、蛙板、肌槽、连接导线、张力换能器、刺激输出线、任氏液、棉线、培养皿。肌槽张力换能器1、剥制有活性的坐骨神经-腓肠肌标本(在任氏液中浸泡十分钟左右,使其兴奋性较稳定)。2、连接实验装置 将张力换能器和肌槽固定在铁支架上,肌肉标本的股骨固定于肌槽侧面的小孔中,腓肠肌跟腱的结扎线连于张力换能器的受力片上,连线应松紧适宜,并与桌面垂直,张力换能器的输入端与第四通道相连四、实验内容(步骤)3、调节刺激器,改变刺激强度(从弱到强),观察刺激强度变化对肌肉收缩的影响四、实验内容(步骤)四、实验内容(步骤)4、单收缩的分析电极直截了当刺激腓肠肌,测量单收缩的3 3个时程:潜伏期、收缩期和舒张期刺激参数不变,刺激坐骨神经,再测量单收缩的三个时程四、实验内容(续)5、复合收缩的分析刺激强度不变,调整刺激频率,记录不完全强直收缩曲线。逐渐增大刺激频率,记录腓肠肌的完全强直收缩曲线。五、注意事项 标本制备时要注意保持标本的湿润 标本制备时尽量幸免使用尖锐的器械,以免损伤神经、肌肉 使用电刺激时,刺激强度不宜太大,否则估计导致神经的损伤 实验中保持换能器与标本连线的张力不变 标本未给刺激即出现挛缩,是由于漏电引起,请检查连接 每两次剌激之间要让标本休息30秒,连续刺激不可超过5s。并用任氏液湿润标本,以保持良好兴奋性。感谢您的聆听！
