1、艾滋病检测技术规范艾滋病检测技术规范HIVHIV抗体检测抗体检测行业标准行业标准:艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准WS298-2008技术规范技术规范:全国艾滋病检测技术规范（全国艾滋病检测技术规范（2009年修订版）艾滋病检测技术规范HIV抗体检测2HIVHIV抗体检测抗体检测HIVHIV抗体检测的目的抗体检测的目的nHIVHIV抗体检测可用于监测、诊断、血液筛抗体检测可用于监测、诊断、血液筛查：查：艾滋病检测技术规范HIV抗体检测3n以以监测监测为目的的检测是为了解为目的的检测是为了解不同人群不同人群HIVHIV感染率及感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点
2、人群和一般其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。人群。n以以诊断诊断为目的的检测是为了确定为目的的检测是为了确定个体个体HIVHIV感染状况，感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、术前检测、根据特包括临床检测、自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。殊需要进行的体检等。n以以血液筛查血液筛查为目的的检测是为了为目的的检测是为了防止输血传播防止输血传播HIVHIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。包括献血员筛查和原料血浆筛查。HIVHIV抗体检测的目的抗体检测的目的艾滋病检测技术规范HIV抗体检测41 1、根据目的选择检测方法及检测策略。、根据目的选择检测方法及检测策略。2
3、2、严格遵守实验室、严格遵守实验室SOPSOP。3 3、筛查试验阳性，须作确证实验。、筛查试验阳性，须作确证实验。4 4、筛查试验阴性，不应做确证实验。、筛查试验阴性，不应做确证实验。5 5、筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。、筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。HIV抗体检测的要点抗体检测的要点艾滋病检测技术规范HIV抗体检测5以诊断为目的的检测策略以诊断为目的的检测策略n常规常规HIVHIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确证试验复检）和确证试验艾滋病检测技术规范HIV抗体检测6筛查试剂筛查试剂n必须是经国家食品药品监督管理局注必须是经国家食品药品
4、监督管理局注册批准、在有效期内的试剂，其中酶册批准、在有效期内的试剂，其中酶联免疫试剂应批批检合格。推荐使用联免疫试剂应批批检合格。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的试临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。剂。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测7筛查样品筛查样品nHIVHIV抗体筛查可采用血清、血浆、滤纸干抗体筛查可采用血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和尿液样品。血斑、唾液和尿液样品。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测8筛查方法筛查方法n酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISAELISA）n化学发光或免疫荧光试验化学发光或免疫荧光试验n快速检测（快速检测（RTRT）及其它检测试验）及其它检测试
5、验 明胶颗粒凝集试验明胶颗粒凝集试验(PA)(PA)免疫渗滤试验免疫渗滤试验 免疫层析试验免疫层析试验艾滋病检测技术规范HIV抗体检测9(1)(1)酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISAELISA）n可使用血液、唾液、尿液样品，可使用血液、唾液、尿液样品，ELISA多为单纯多为单纯HIV抗体检测试剂。抗体检测试剂。HIV抗原抗体联合检测试剂抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中可同时检测血液中HIV-1P24抗原和抗原和HIV-1/2抗抗体。体。HIV抗原或抗体包被于固相载体，加入待检抗原或抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶标记的样品和酶标记的HIV抗原或抗体，加底物显色，抗原或抗体，
6、加底物显色，用酶标仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照用酶标仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。必须符合试剂盒规定。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测10酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISAELISA）n优点：准确性高、价格低廉、判断结果优点：准确性高、价格低廉、判断结果标准客观、结果便于记录和保存标准客观、结果便于记录和保存n用途：流行病学监测及临床大量标本的用途：流行病学监测及临床大量标本的检测检测艾滋病检测技术规范HIV抗体检测11(2)(2)化学发光或免疫荧光试验化学发光或免疫荧光试验n采用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联采用发光或荧光底物，既可检测抗体
7、，也可联合检测抗原抗体。合检测抗原抗体。HIVHIV抗原或抗体包被于固相抗原或抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶或荧光标记的载体，加入待检样品和酶或荧光标记的HIVHIV抗抗原或抗体，加发光或荧光底物，用发光或荧光原或抗体，加发光或荧光底物，用发光或荧光仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。符合试剂盒规定。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测12(3)(3)快速检测（快速检测（RTRT）及其它检测试验）及其它检测试验n明胶颗粒凝集试验（明胶颗粒凝集试验（PA）：是）：是HIV血清抗体检测的一种简便方法。血清抗体检测的一种简便方法。将将HI
8、V抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用。当待检样抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用。当待检样品含有品含有HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情况判读结果。况判读结果。PA试剂有两种：同时检测试剂有两种：同时检测HIV-1和和HIV-2抗体以及抗体以及分别检测分别检测HIV-1和和HIV-2抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。n免疫渗滤试验：斑点免疫渗滤试验：斑点ELISA和斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速和斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验：均以硝酸纤维膜为载体，试验：均以硝酸纤维膜为载体，
9、HIV抗原点状固定在膜上，加待抗原点状固定在膜上，加待检样品。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在检样品。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在10分钟以内。有效试验的质控点必须显色。分钟以内。有效试验的质控点必须显色。n免疫层析试验：以硝酸纤维膜为载体，免疫层析试验：以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原线状固定在膜上，抗原线状固定在膜上，待检样品（血液或唾液）沿着固相载体迁移，阳性结果在膜上抗待检样品（血液或唾液）沿着固相载体迁移，阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带。有效试验的质控带必须显色。原部位显示出有色条带。有效试验的质控带必须显色。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测1
10、3优点优点:试验简便快速，试验简便快速，不需专门设备和人员不需专门设备和人员培训培训,适用于应急检测、门诊急诊检测。适用于应急检测、门诊急诊检测。一般可在一般可在10103030分钟内得出结果。分钟内得出结果。缺点缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保存。易保存。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测14全血样品 加50ul样品于样品垫中手指血方法静脉血方法加一滴缓冲液15分钟内读取结果硒标法图示艾滋病检测技术规范HIV抗体检测15筛查程序筛查程序初筛试验初筛试验n根据检测目的选用符合要求的筛查试剂根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对样品进行初筛检测，对样品进行初
11、筛检测，n对呈阴性反应的样品，可出具对呈阴性反应的样品，可出具HIVHIV抗抗体阴性（体阴性（-）报告；对呈阳性反应的）报告；对呈阳性反应的样品，需要进一步做复检试验和确证样品，需要进一步做复检试验和确证试验。试验。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测16筛查程序筛查程序复检试验复检试验n对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验。或不同厂家的试剂进行复检试验。n如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包如果初筛检测使用抗原抗
12、体联合试剂，则复检必须包括一种抗原抗体联合试剂。括一种抗原抗体联合试剂。n如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进行检测为阴性反应，则应考虑进行HIV-1 p24抗原或核抗原或核酸检测，必要时进行随访。酸检测，必要时进行随访。n艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品，艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品，确证实验室可以直接进行确证试验。确证实验室可以直接进行确证试验。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测17艾滋病检测技术规范HIV抗体检测18筛查程序筛查程序筛查试验结果的报告筛查试验结果的报告nHIVHIV
13、抗体初筛试验用附表抗体初筛试验用附表1 1进行报告，阴性反进行报告，阴性反应报告为应报告为“HIV“HIV抗体阴性（抗体阴性（-）”；阳性反应；阳性反应报告为报告为“HIV“HIV抗体待复检抗体待复检”。nHIVHIV抗体复检试验用附表抗体复检试验用附表2 2进行报告，进行报告，两次检两次检测均阳性或一阴一阳报告为测均阳性或一阴一阳报告为“HIV抗体待确抗体待确证证”；两次检测均阴性报告为两次检测均阴性报告为“HIV抗体阴性抗体阴性（-）”。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测19筛查程序筛查程序筛查试验呈阳性反应样品的转送n如需送上级实验室进行复检，需要核对身份，补充个人信息（如姓名和身份证号码
14、），必要时采集第二份血样，持HIV抗体筛查报告，送当地艾滋病筛查中心实验室，或直接送确证实验室复检。nHIV抗体复检试验用附表2 进行报告，两次检测均阳性或一阴一阳报告为“HIV抗体待确证”；两次检测均阴性报告为“HIV抗体阴性（-）”。HIV抗体复检报告需由1名检验人员和1名审核人员签字。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测20艾滋病检测技术规范HIV抗体检测21艾滋病检测技术规范HIV抗体检测22HIVHIV抗体确证试验抗体确证试验确证试剂：确证试剂：必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂。确证样品：确证样品：可采用血清、血浆、滤纸干血斑确证方法：确证方法：包括免疫印迹试验(
15、WB)、条带免疫试验(LIATEK HIV)、放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧光试验(IFA)。国内常用的确证试验方法是WB。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测23HIVHIV抗体确证检测流程图抗体确证检测流程图确证试剂确证试剂筛查试验阳性反应样品筛查试验阳性反应样品根据具体情况进一步根据具体情况进一步检测检测HIV-2HIV-2报告阴性报告阴性出现出现HIV-2HIV-2指示条指示条带带阴性反应阴性反应不确定反应不确定反应报告报告HIV-1 阳性阳性HIV-1 阳性反应阳性反应结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报告阳性
16、；如随访期间带型有进展，但不满足阳性标准，应继续随访到8周。如带型没有进展或呈阴性反应则报告阴性；满足HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可视情况决定是否继续随访。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测25HIV抗体确证试验结果的判定注：nHIV-1抗体特异带包括：nenv带：gp160/gp120、gp41；ngag带：p55、p24、p17（或p18）；npol带：p66（或p65）、p51、p31。nHIV-2抗体特异条带包括：nenv带：gp140/gp105、gp36；ngag带：p56、p26、p16；npol带：p68、p53、p34。n（由于使用的毒株不同，HIV-2
17、 env带也可为gp125/gp80、gp36）。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测26a 强阳性对照（强阳性对照（HIV-1和和HIV-2）b弱阳性对照（弱阳性对照（HIV-1）c阴性对照阴性对照d典型的典型的HIV-2血清阳性反应血清阳性反应艾滋病检测技术规范HIV抗体检测27 HIV抗体确证试验结果的判定 n（1）HIV-1抗体阳性n同时符合以下2条标准可判为HIV-1抗体阳性：n至少有2条env带（gp41和gp160/gp120）出现，或至少1条env带和p24带同时出现；n符合试剂盒提供的阳性判定标准。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测28n试剂盒提供的阳性判定标准是 2条env（Gp
18、160/gp41gp120）and pol（p66、p51、p31）or gag（p55、p24、p17）n Gp160 gp120 p66/p51/p31/p55/p24/p17n或 Gp41 gp120 p66/p51/p31/p55/p24/p17 Gp160 gp120 p24艾滋病检测技术规范HIV抗体检测29HIV抗体确证试验结果的判定n（2）HIV-2抗体阳性n出现HIV-2型特异性指示带的样品：如果同时呈HIV-1抗体阳性反应，报告HIV-1抗体阳性，不推荐进一步做HIV-2抗体确证试验；如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应，需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证
19、试验。n同时符合以下二条标准，即出现至少2条env带（gp36和gp140/gp105），和试剂盒提供的阳性判定标准，可判为HIV-2抗体阳性。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测30HIV抗体确证试验结果的判定n3）HIV抗体不确定n出现HIV抗体特异带，但不足以判定阳性。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测31n（4）HIV抗体阴性n无HIV抗体特异带出现。HIV抗体确证试验结果的判定艾滋病检测技术规范HIV抗体检测32HIV抗体确证试验结果报告HIV抗体确证试验结果用附表3报告。n（1）符合HIV-1/HIV-2抗体阳性判断标准，报告“HIV-1/HIV-2抗体阳性（）”，并按规定做好检测后咨询
20、、保密和疫情报告工作。n（2）符合HIV抗体阴性判断标准，报告“HIV抗体阴性（）”。如疑似“窗口期”感染，建议进一步做HIV核酸检测，尽早明确诊断。n（3）符合HIV抗体不确定判断标准，报告“HIV抗体不确定（）”，在备注中应注明“4周后复检”。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测33n发出确证报告的同时要做好检测后咨询。nHIV抗体确证报告由检测者，复核人员和签发人员签字后，按原送检程序反馈一式三份（确证实验室一份、送检单位一份、患者一份）。如确证对象户口不属于本辖区，确证报告应同时抄送感染者户口所在地的省艾滋病确证中心实验室。其它系统确证的地方人员，也应及时向当地卫生行政部门和省艾滋病确证中
21、心实验室报告。n省艾滋病确证中心实验室难以确证的样品，送国家艾滋病参比实验室确证。同一受检对象的样品在不同实验室得到不一致的确证结果时，由国家艾滋病参比实验室予以仲裁。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测34艾滋病检测技术规范HIV抗体检测35VCT替代检测策略n除上述常规检测程序以外，对HIV高流行地区高危人群的VCT检测，可采用替代策略。使用要求n使用替代策略，应在确证中心实验室和确证实验室或以上实验室指定的筛查实验室进行，用临床试剂质量评估敏感性和特异性高的筛查试剂检测。使用该策略判断结果，阳性报告须由确证中心实验室和确证实验室或以上实验室认可的筛查实验室出具。艾滋病检测技术规范HIV抗体检测36送检样品阳性反应阴性反应筛查试剂 1（高敏感性）阳性反应阴性反应筛查试剂 2（高特异性）S/CO 6.0S/CO 1.05.9筛查试剂 3（高特异性 ELISA）报告阳性确证试验阳性反应不确定阴性反应随访报告阴性图图 3 3 高危人群高危人群 VCTVCT 检测流程检测流程艾滋病检测技术规范HIV抗体检测37HIV 抗体检测不能用来诊断抗体检测不能用来诊断：nHIV 急性感染急性感染n新生儿新生儿HIV 感染感染艾滋病检测技术规范HIV抗体检测38艾滋病检测技术规范HIV抗体检测39
