1、血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 二、散点图案例分析一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 一、血细胞各通道分析原理及散点图分析一、血细胞各通道分析原理及散点图分析血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究 参数，如直方图，参数，如直方图，DIFFDIFF散点图，散点图，NRBCNRBC散点图等。实验散点图等。实验人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注的的,进行涂片复检确认，提高工作效率，减少漏诊率。进行涂片复
2、检确认，提高工作效率，减少漏诊率。一、血细胞各通道分析原理及散点图分析血细胞分析仪提供了大量的DIFFWBC/BASONRBC半导体激光荧光染色（聚次甲基+噁嗪）主要原理FSC前向散射光：细胞大小SSC侧向散射光：复杂程度（细胞的颗粒 和细胞核等内含物的信息）SFL侧向荧光：核酸含量（DNA、RNA)D I F F 半导体激光主要原理F S C 前向散射光：细胞大小DIFF通道分析原理4DL(阴离子表面活性剂）完全溶解RBCPLT 在WBC膜上打孔溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在SSC显示复杂程度是最大的。4DS对核酸染色纵坐标：侧向荧光（SFL
3、）反映核酸含量横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂程度化学粘附化学粘附大分子有机酸与嗜酸 粒细胞中的碱性颗粒 发生化学粘附嗜酸粒细胞大分子有机酸D I F F 通道分析原理4 D L(阴离子表面活性剂）完全溶解R BRNA/DNA荧光染色原理成熟白细胞：高荧光特性网织红细胞：弱荧光特性血小板：成熟RBC：原始细胞：幼稚细胞：微弱荧光特性 无荧光特性 极高荧光特性 极高荧光特性R N A/D N A 荧光染色原理成熟白细胞：高荧光特性血小板：微弱疟原虫感染的散点图（一）DIFF散点图显示淋巴与单核之 间融合，有分类结果，但不可 信。横坐标：侧向散射光（SSC）散点图特点：嗜酸性粒细胞群向
4、中性粒细胞靠拢，间距小。灰白色散点，完全融合，不分类。4DL(阴离子表面活性剂）中华临床医师杂志，,5（2）:633-6355%的异常淋 巴细胞。红色散点，仪器报警提示有大量 原始细胞和幼稚粒细胞。异型淋巴细胞增高与 多种病毒感染及变态 反应有关。WBC增多对RBC计数的干扰5%的早幼粒细胞，单 核细胞24.镜检：47%原始淋巴细胞，未见 异淋。流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志CD13和CD33阳性，为髓 细胞性白血病。大致分成两群，一群为原始细胞，一群为幼稚粒细胞。荧光染色WBC分类的优势检测异常细胞提供幼稚粒细胞信息（IG）提供原始细胞信息（Other）疟原虫感染的散点图（一）荧光染色
5、WB C 分类的优势检测异常细胞10SFB溶血剂（酸性，低渗）溶解RBCPLT除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态Baso保持原状纵坐标：前向散射光（纵坐标：前向散射光（FSC）反反映细胞大小映细胞大小横坐标：侧向散射光（横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂程度反映细胞内部复杂程度嗜碱其它有 核细胞嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液，Baso内的蛋白为酸性蛋白，因此在该溶液中受到保护，而其他有核细胞则被 溶解成裸核WBC/BASO 通道分析原理1 0 S F B 溶血剂（酸性，低渗）纵坐标：前向散射光（F S CNRBC通道分析原理NR溶血剂完全溶解RBC，PLTWBC保持原状NRB
6、C溶解为裸核NR染液对核酸染色纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小横坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量NRBC%=NRBC#/NRBC_WBC#N R B C 通道分析原理N R 溶血剂反映细胞大小横坐标：侧向荧光出现有核红时WBC的修正红系增生活跃时，外周血易见较多的红系增生活跃时，外周血易见较多的NRBC，在，在WBC 计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。出现有核红时WB C 的修正红系增生活跃时，外周血易见较多的N RWBC增多对增多对RBC计数的干扰计数的干扰RBC：阻抗法RBC值含WBCWBC100*109/L时，需校正红系统参数贫血越严重，
7、对RBC影响越大WB C 增多对R B C 计数的干扰血红蛋白通道光电比色法光电比色法SLS（十二烷基磺酸钠）：无氰无毒（十二烷基磺酸钠）：无氰无毒血红蛋白通道光电比色法二、散点图案例分析二、散点图案例分析二、散点图案例分析嗜碱性粒细胞增多症在BASO散点图上，嗜碱区 域出现大量散点，另外DIFF散点图上，中性区域的左下方也为嗜碱区域，也出现了大量的散点。BASO%：仪器13.4%镜检13.5%嗜碱性粒细胞增多症在B A S O 散点图上，嗜碱区 域出现大量散点AML-M1(例1)不可信不可信DIFF散点图显示淋巴与单核之 间融合，有分类结果，但不可 信。IMI散点图也提示大量原始细 胞。镜检
8、发现有77.5%的原始细胞。细胞表面标志CD13和CD33阳 性，CD36阴性；为急性髓细 胞性白血病。A ML-M1(例1)不可信AML-M2DIFF散点图显示白细胞完全融合 且不分类。IMI散点图显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现有90%的原始细胞、3%的早幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞。流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志CD13和CD33阳性，为髓 细胞性白血病。A ML-M2 D I F F 散点图显示白细胞完全融合 且不分类。AML-M3DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分 类。IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒 细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发
9、现3%的原始细胞，91%的早幼粒 细胞、3.5%的中幼粒细胞，0.5%晚幼 粒细胞。A ML-M3 D I F F 散点图显示白细胞完全融合且不分 类。AML-M4DIFF散点图，白细胞区域出现大量灰白色散点，完全融合，不分类。大致分成两群，一群为原始细胞，一群为幼稚粒细胞。IMI散点图也显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。A ML-M4 D I F F 散点图，白细胞区域出现大量血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态IMI散点图也提示大量原始细 胞。溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在Baso内的蛋白为酸性蛋白，
10、因此在该大分子有机酸与嗜酸 粒细胞中的碱性颗粒 发生化学粘附NRBC散点图：红色散点疟原虫感染的散点图（一）其他1 492份散点图基本正常。在BASO散点图上，嗜碱区 域出现大量散点，另外DIFF散点图显示白细胞完全融合 且不分类。血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究 参数，如直方图，DIFF散点图，NRBC散点图等。荧光染色WBC分类的优势报警提示异常淋巴细胞/原始细 胞，异淋？镜检发现59%的原始细胞，淋巴与单核区域分界不 清，仪器提示淋巴细胞 增多/原始淋巴。NRBC散点图：红色散点散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。DIFF散点图淋巴与单核 融为一体，不分类
11、，IMIAML-M5bDIFF散点图淋巴与单核 融为一体，不分类，IMI散点图显示大量原始细胞 和幼稚粒细胞。镜检发现59%的原始细胞，0.5%的早幼粒细胞，单 核细胞24.5%。血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义A ML-M5 b D I F F 散慢粒危象DIFF散点图OTHER区域出现大 量散点，中性粒细胞上方也有少 量散点，IMI散点图也出现大量红色散点，仪器报警提示有大量 原始细胞和幼稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现38.5%的原始细胞，幼 稚粒细胞和幼稚的单核细胞。酯 酶染色阴性或弱阳性，可被氟化 钠抑制。这是一例慢粒急单变。慢粒危象D I F F 散点图O T H E
12、 R 区域出现大 量散点，中性粒细MDSDIFF：淋巴细胞和单核细胞之间界限不清，提示出现原 始细胞。中性粒细胞散点向 左下方延伸到嗜碱区域。IMI：少量红点NRBC：幼红镜检：原始：1%，BASO：5%，NRBC：MD S D I F F：淋巴细胞和单核细胞范*，女，67y。，诊 断为MDS伴原始细胞增多（10%）DIFF散点图淋巴与单核区域融 合，提示出现原始细胞报警提示异常淋巴细胞/原始细 胞，异淋？镜检：47%原始淋巴细胞，未见 异淋。血片POX（-）。急淋变MDS急淋变范*，女，6 7 y。，诊 断为MD S 伴原始细胞增多（1 0急性T淋巴细胞白血病DIFF散点图淋巴与单核完 全融
13、合，IMI散点图几乎没有红色散点，仪器提示异 常淋巴/原始淋巴细胞。镜检发现有59.5%的异常淋 巴细胞。本例被诊为ATL。急性T 淋巴细胞白血病D I F F 散点图淋巴与单核完 全融合，I MCLL淋巴与单核区域分界不 清，仪器提示淋巴细胞 增多/原始淋巴。镜检：L：%，幼淋2.0%C L L 淋巴与单核区域分界不 清，仪器提示淋巴细胞 增多/原始异型淋巴细胞异型淋巴细胞增高与 多种病毒感染及变态 反应有关。常见有：传染性单核 细胞增多症、病毒性 肺炎、病毒性肝炎、肾综合征出血热等病 毒性感染。特点：胞体增大，胞 质增多、嗜碱性增强，细胞核母细胞化，荧光强度最强。异型淋巴细胞异型淋巴细胞增
14、高与 多种病毒感染及变态 反应有关散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。原因：疟原虫裂殖体破裂，疟色素从感染的血细胞中释放出来，继而被白细胞吞噬，吞噬原因：疟原虫裂殖体破裂，疟色素从感染的血细胞中释放出来，继而被白细胞吞噬，吞噬 了疟色素的白细胞侧向散射光强度改变，显示在散点图靠近中性粒细胞一侧，但也被仪器了疟色素的白细胞侧向散射光强度改变，显示在散点图靠近中性粒细胞一侧，但也被仪器 以以EoEo特有的红色标示出来。特有的红色标示出来。张时民等张时民等.血细胞分析仪测定疟原虫感染患者特征二例血细胞分析仪测定疟原虫感染患者特征二例
15、.中华临床医师杂志，中华临床医师杂志，,5 ,5（2 2）:633-635:633-635疟原虫感染的散点图（一）疟原虫感染的散点图（一）散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。疟原虫感从仪器报警从仪器报警EOEO增高或无增高或无EOEO分类结果的分类结果的1 5011 501份标本中发现有份标本中发现有9 9份疟份疟 原虫标原虫标本，本，6 6份散点图表现为份散点图表现为EOEO与与NEGNEG之间间距缩小之间间距缩小(图图1)1)，3 3份报警白细胞散份报警白细胞散 点图点图异常异常,且散点图显示且散点图显示EOEO与与NEGNEG之间无间距之间无间距(图图2)2)。其他其他1 4921 492份散点图基本正常。因为是真性份散点图基本正常。因为是真性EOEO增多，表现在散点图上是增多，表现在散点图上是EO EO 数量增加，为正常分类散点图数量增加，为正常分类散点图(图图3)3)。戴燕，万海英等.XE-2100血细胞分析仪嗜酸粒细胞异常散点图报警筛选疟原虫感染的研究.中华检验医学杂志，,31（7）:763-766疟原虫感染的散点图（二）疟原虫感染的散点图（二）从仪器报警E O 增高或无E O 分类结果的1 5 0 1 份标本中发现有谢谢谢谢教培用血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义课件
