1、 血小板抗体检测的临床应用血小板抗体检测的临床应用 (妇产科篇)吉林芬瑞生物制品销售有限公司 市场部 苏 凯 2016.11.07 1 3 血小板免疫学 血小板抗体与早期流产关系 新生儿免疫性血小板减少 4 妇产科开展的意义及项目优势 2 2 一、血小板免疫学 血小板简介 血小板只见于哺乳动物体内,是具有止血凝血生理功能和自然免疫防护功能的重要的血液细胞，无细胞核，有胞膜，直径约为25 m，呈两面微凸的圆盘状,循环血中含量一般为150350109个/L。血小板生成过程血小板生成过程 骨髓干细胞 多功能祖细胞 巨核祖细胞 巨核细胞 幼巨核细胞 血小板 胞质块脱落 血小板功能 促进止血和加速凝血促
2、进止血和加速凝血 1 1 维持血管内皮细胞的完整性维持血管内皮细胞的完整性 2 2 免疫功能免疫功能 3 3 血小板抗原 自身抗原自身抗原 同种异体抗原同种异体抗原 药物诱导性抗原药物诱导性抗原 血小板血小板 抗原 同种抗原同种抗原 同种异体抗原 HLA-HLA-类抗原（HLA-AHLA-A、HLA-BHLA-B抗原和少量HLA-CHLA-C抗原），无HLA-HLA-类抗原；类抗原；HLA-HLA-类分子为血小板的固有蛋白，少量从血浆中吸附。部分为血小板的固有蛋白，另一部分从血浆中吸附；血小板上的ABH抗原个体之间表达不同，5%-10%的非O O型个体为A A抗抗原或B B抗原的高表达者。血小
3、板特异性抗原血小板特异性抗原，主要存在于血小板膜的糖蛋白（Glycoprotein,GPGlycoprotein,GP）分子上，也少量存在于血管内皮细胞、结缔上，也少量存在于血管内皮细胞、结缔组织细胞和平滑肌细胞。同种异体同种异体 抗原 HLA抗原 ABH抗原 HPA抗原 血小板抗原与临床相关性 血小板抗原 相关疾病与反应 临床病症临床病症 同种异体抗原 同种抗原 自身抗原 药物依赖性抗原 输注无效 发热、变态反应,TRALI 流产 新生儿（或胎儿）血小板减少、颅内出血 输注无效 非溶血性输血反应 反复流产 新生儿同种免疫性血小板减少症（NAIT）血小板血型与临床-同种异体抗原 血小板 妊娠妊
4、娠 致敏血小板并引起破坏 抗供者抗供者 血小板抗体血小板抗体 抗父亲 血小板抗体 抗供者抗供者 血小板抗体血小板抗体 出血/紫癜 流产/死胎 移植排斥移植排斥 二、血小板抗体与早期流产关系 血小板抗体与早期流产的关系 妊娠免疫的血小板同种异体抗体阳性的发生率有早期流产史者显著妊娠免疫的血小板同种异体抗体阳性的发生率有早期流产史者显著高于正常孕妇，高于正常孕妇，而且血小板抗体与流产胎次拟成正比关系。近年来研究发现母婴间血型不合导致的同种抗体免疫因素是造成不近年来研究发现母婴间血型不合导致的同种抗体免疫因素是造成不明原因流产的主要因素之一，母婴间红细胞血型抗体不合是导致晚期习明原因流产的主要因素之
5、一，母婴间红细胞血型抗体不合是导致晚期习惯性流产的主要原因，惯性流产的主要原因，而母婴间血小板血型不合的血小板同种抗体（包括血小板特异性抗体和HLAHLA抗体）是导致早期流产的主要原因。上海血液中心刘达庄教授对1200名正常孕妇及52名有早期流产史患者进行了血小板同种抗体的筛查和研究，探讨了抗体特异性与早期流产的发病关系和NAIT的预防，结果见下表。研究论文 项目 n 抗体阳性数 阳性率（%）有早期流产史妇女 52 11 2115 无早期流产史妇女 1201 44 366 丈夫（阴性对照）1201 0 0 血小板血型与早期流产关系的研究.刘达庄，丁苏鄂，王健等.中国输血杂志J.1996,9(4
6、).研究论文 血小板血型抗体与反复流产关系的研究.覃小青,申卫东,焦伟,朱春丽.广西医学 2005年10月,第27卷,第10期.通过对通过对12281228名正常孕妇及名正常孕妇及62名有早期流产史患患者进行血小板同种抗体的筛选和调查。结果在 1228名正常孕妇中，检出血小板抗体阳性 45例(3.66(3.66)，62名有早期流产史的患者，检出名有早期流产史的患者，检出 13例例(20.96(20.96)，统计学分析血小板血型抗体与早期流产有显著相关统计学分析血小板血型抗体与早期流产有显著相关性。性。通过对299名复发性流产的患者血浆中 HLA抗体和 GPIIbIIIa 抗体进行检测，结 果检
7、测的 299例 RSA患者中，IgG抗体阳性 26例，阳性率 8.69。26例IgG抗体阳性患者中，25例 HLA抗体呈阳性。HLA-I类抗体阳性占 5.02，HLA-II类抗体阳性占 1.33，HLA-I+II 类抗体阳性占 2.0l;在 26例RSA患者中，GPIIb IIIa 抗体阳性 4例(占15.38),其中GPb IIIa阳性和HLA抗体均阳性 3例(占l1.54)，GPb IIIa抗体单独阳性1例(占3.85)。研究论文 复发性流产患者 HLA及血小板特异性糖蛋白抗体 GPIIbIIIa表达的初步研究.尹爱华,邓 晶,吴菁,徐秀章,夏文杰,丁浩强,陈扬凯,叶 欣.中国免疫学杂志,
8、2012年第28卷.三、新生儿免疫性血小板减少 新生儿同种异体免疫血小板减少症（新生儿同种异体免疫血小板减少症（NAIT）NAIT是新生儿重度血小板减少症最常见原因，由于胎儿血小板表面表达的抗原既有父亲的，也有母亲的，这种表达同种异体抗原的血小板通过胎盘屏障进入母亲体内，刺激母体免疫系统产生针对同种异体抗原的血小板抗体，这种血小板抗体再通过胎盘屏障进入胎儿体内，致敏胎儿血小板，激活胎儿免疫系统发生抗原抗体反应，使胎儿血小板减少引起相应的病症，从目前文献报道显示，该疾病的发病率为 1/8001500，而新生儿溶血病的发病率为 1/1700,故NAIT发病率高于新生儿溶血病。胎儿宫内死亡或颅内出血
9、（ICH）可能早在14-16发病机理 Simona CONSTANTINESCU,Vlad ZAMFIRESCU,Prof.Radu VLADAREANU.Fetal and Neonatal Simona CONSTANTINESCU,Vlad ZAMFIRESCU,Prof.Radu VLADAREANU.Fetal and Neonatal Alloimmune Thrombocytopenia.Maedica(Buchar)2012 December;7(4):372Alloimmune Thrombocytopenia.Maedica(Buchar)2012 December;7(4
10、):372376.376.临床表现 2.较重 病情较重患儿临床表现为皮肤、体内外黏膜出血，出现紫癜、瘀点或瘀斑。3.重度 严重者会导致神经系统损伤（占已报道病例的 20%）以及颅内出血（ICH）。1.轻度 度血小板减少患儿有时没有任何临床症状。NAIT-常规检测 1.血小板数量检查 血小板减少的婴儿通常在 出生72h内血小板的量较低。然而一些中度NAIT因不会有这些出血症状而被忽略。2.血小板抗体检测 除FNAIT的可能时，需要对 母体中的抗体进行检测，必要的时抗体鉴定，可以用于血小板抗体检测及交叉配型。3.基因检测 妊娠的家族性复发率 取决于父亲的基因型。若为纯合子显性的率接近100%，杂合
11、子的父亲，复发率接近 50%。因此，有NAINAIT的治疗-产前管理 1.静脉注射用人免疫球蛋白（IVIG）许多研究中心用IVIG治疗HPA-1a免疫的孕妇，在瑞典，治疗HPA-1a免疫的孕妇用量为 0.51.0g/kg/周，新西兰为2g/kg/周，在妊娠12周开始使用。2.糖皮质激素治疗 许多治疗方案中同时使用 IVIG和糖皮质激素，研究发现IVIG和糖皮质激素一起的治疗效果高于单独使用IVIG。3.剖腹产 在分娩时选择性剖宫产可能有助于防止脑出血发生。NAIT的治疗产后处理 1.输注血小板 在分娩中或即将分娩时，许多婴儿会有出血症状发生，并且不能立即进行适当的治疗。目前，在出生过程中有出血
12、症状的婴儿可输注与献血员配型的、抗原阴性的血小板治疗。在95%的FNAIT患儿中，源于HPA-1a-和HPA-5b-阴性的个体血小板是相合的，且可有效增加血小板量。如果兼容的血小板不可用，而与母亲 的机采血小板相合，可给新生儿输经洗涤的、照射和去白细胞的母亲的血小板。Simona CONSTANTINESCU,Vlad ZAMFIRESCU,Prof.Radu VLADAREANU.Fetal and Neonatal Alloimmune Thrombocytopenia.Maedica(Buchar)2012 December;7(4):372376.治疗方案 四、妇产科开展的意义及项目优
13、势检测原理-SPRCA 采用先进的采用先进的固相红细胞吸附试验技术（solid-phase red cell adherence,SPRCA），反应板中已包被抗血小板单克隆抗反应板中已包被抗血小板单克隆抗体，血小板悬液经离心洗涤后可在反应孔底部形成血小板单层。加入血清或血浆，在孔中经过孵育后，若该血清或血浆中含有血小板抗体，过孵育后，若该血清或血浆中含有血小板抗体，则该抗体与反应孔中的血小板单层结合，未结合的成分通过洗涤被去除。加入抗人 IgGIgG及人IgGIgG致敏红细胞（指示红细胞），经离心后指致敏红细胞（指示红细胞），经离心后指示红细胞通过抗人示红细胞通过抗人 IgGIgG的桥连与血小
14、板单层上的桥连与血小板单层上的血小板抗体结合，因此 阳性反应为指示红细胞平铺在反应孔底部表面。而阴性反应为指示试验流程 结果解释 可疑阳性，要对该患者给予风险提示，告知可疑阳性，要对该患者给予风险提示，告知下次妊娠可能会导致血小板抗体强度增强，从下次妊娠可能会导致血小板抗体强度增强，从而引起相关疾病。可建议该患者推迟怀孕的时而引起相关疾病。可建议该患者推迟怀孕的时间并以中医调理为主。间并以中医调理为主。血小板抗体阳性，引起患者流产、死胎、不孕不育、NAITNAIT等相应疾病的风险极大。建议临床要采取干预和治疗措施，如注射丙球、糖皮质激素等。血小板抗体阴性，可排除由血小板抗体引起血小板抗体阴性，
15、可排除由血小板抗体引起相关疾病的可能。相关疾病的可能。临床意义 三阶段：孕前，孕期，产后三阶段：孕前，孕期，产后 一、育龄妇女孕前血小板抗体筛查对孕期流产风险做出评估一、育龄妇女孕前血小板抗体筛查对孕期流产风险做出评估 对于对于有不良孕产史、反复流产史、复发性流产有不良孕产史、反复流产史、复发性流产史、不孕不育史、多次妊娠史、高龄产妇、需借助史、不孕不育史、多次妊娠史、高龄产妇、需借助辅助生殖措施怀孕的妇女以及有自身免疫性疾病史的育龄妇女皆建议在孕前及孕期检测的育龄妇女皆建议在孕前及孕期检测 其体内血小板其体内血小板抗体状况，检测患者血清和血浆中血小板抗体的水抗体状况，检测患者血清和血浆中血小
16、板抗体的水平，对其孕期流产、死胎风险做出评估，从而提高平，对其孕期流产、死胎风险做出评估，从而提高优生优育的水平。优生优育的水平。二、产检（尤其针对高龄、二胎产妇）二、产检（尤其针对高龄、二胎产妇）1.1.孕早期检测孕早期检测 由于胎儿和母亲血小板不相容所产生的同种抗由于胎儿和母亲血小板不相容所产生的同种抗临床意义 三、妊娠期血小板降低的查因：三、妊娠期血小板降低的查因：对于妊娠期血小板减低的孕妇（尤其是罹患或有自身免疫性疾病史）建议进行血小板抗体检测以对其孕期流产、死胎以及新生儿罹患血小板相关免疫性疾病的风险作出评估并提示临床医生尽早制定相应血小板相关免疫性疾病的风险作出评估并提示临床医生尽早制定相应治疗方案。项目优势 风险小、收益大风险小、收益大 1 1、很少涉及血小板输注，减少了很多麻烦；2、流产查因、不良孕产史查因、不孕不育查因、辅助生殖等项目皆为自费，不占医保费用；3、优生优育每个家庭都很重视，多一项检测则多一份保障；一份保障；4、没有过度医疗风险；5 5、临床患者量巨大，无须担心临床标本量和科室、临床患者量巨大，无须担心临床标本量和科室 谢 谢！
