1、1 1内容制药用水系统监测制药用水系统监测洁净区环境监测洁净区环境监测趋势分析和质量回顾趋势分析和质量回顾环境监测结果超标案例分析环境监测结果超标案例分析饮用水监控饮用水监测方案饮用水监测方案周 期项 目检 验 机构取 样 点1次/月性状、pH、电导率、菌落总数公司QC贮罐、制水间入口、品管最末端2次/年全项检测当地卫生防疫部门饮用水进口3 3PW系统监控纯化水纯化水系统系统监测监测方案方案周 期项 目取 样 点1次/周全项监测（内毒素一月一次）贮罐总出水口、总回水口制水系统出口1次/月全项监测（内毒素除外）各使用点在线监测（如电导率）岗位的定期监测（通常2小时一次、如酸碱度、氯化物）。4 4
2、WFI系统监控注射用水系统监测方案周 期项 目取 样 点每罐配制前全项监测制水系统出口、配制罐出水口1次/周全项监测制水系统出口、贮罐、总回水口1次/月除不挥发物、硝酸、亚硝酸、重金属外其他项目总送水口、各使用点备注：调配用注射用水按原料药进行批次管理，相关要求参见批号管理规程（SOP xxxx）。在线监测（如温度、电导率、TOC）岗位的定期监测（通常2小时一次，如pH、氯化物）。5 5纯蒸汽管理参考标准：参考标准：n纯蒸汽冷凝水：参照注射用水标准质量控制：质量控制：n每半年进行纯蒸汽冷凝水的全项检测n根据需要制订部分检测项目、监测周期，如pH、电导率、TOC、微生物限度、内毒素。（每个月）发
3、展趋势：发展趋势：纯蒸汽饱和度、干燥值、过热值的检测。6 6水质管理的主要特性nTOC：监测制药用水中有机物的含量。n电导率：监测制药用水中离子性物质的含量。n微生物限度：水样检测为系统内的浮游微生物（Planktonic Micro-organisms）生物膜：浮游微生物的发生源。n细菌内毒素注射用水、注射剂生产过程中，污染可能性最高的发热性物质。7 7二、洁净区环境监测1，洁净区级别标准2，洁净区的验证和监测3，洁净区环境监测方案4，环境监测仪器、设备、培养基8 81，洁净级别及标准洁净洁净级别级别悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数/米米3 At rest/静态静态In operatio
4、n/动态动态Grade 0.5m 5.0m 0.5m 5.0mA3 520203 52020B3 52029 352 0002 900 C352 0002 9003 520 00029 000D3520 00029 000不作规定不作规定Not defined新版新版GMP（2010修订）和修订）和 EU-GMP、WHO-GMP 2009建议稿标建议稿标准一致准一致。级别级别b浮游菌浮游菌CFU/m3沉降碟沉降碟（90mm）CFU/4小时小时c接触碟接触碟（55mm）CFU/碟碟5指手套指手套CFU/手套手套A 1 1 1 1B10555C1005025D2001005091，洁净级别及标准微
5、生物控制微生物控制动态动态标准标准10102，洁净区验证和监测悬浮粒子的要求：附录悬浮粒子的要求：附录11 第九、十条第九、十条1、A级区确认时的采样量不少于1m32、洁净区的动态监测悬浮粒子的动态监测关键操作的全过程，对A级区进行粒子监测A级区的监测频率、取样量，及时发现人为干预、偶发事件及任何系统的破坏B级区：类似于A级区，采样频率、采样量可以调整C级区：质量风险管理原则确定D级区：一般不作要求，（法规：必要时）（法规：必要时）对于C/D级区的自净时间应达到规定要求11112，洁净区验证和监测取样量和取样点 ISO14644-1 B.4.2 节有明确的采样量的计算公式：采样量（升）=(20
6、/级别中最大粒子限度）1000，显然对于A 级，采样量为(20/20)1000=1 米3 从上式中可见，级别要求越低，取样量就越小 取样点数由B.1.1公式：取样点数 NL=A，A为洁净区面积，例如10米5米的区域，取样点应为8（取整数）取样点均匀分布，位于工作面高度注意：这里仅指在洁区划分时加以采用1212微生物的要求：附录1 第十一条监测方法有：1，空气浮游菌监测沉降菌法-被动法定量空气浮游菌采样法-主动法2，环境表面监测表面取样法（如棉签擦拭法和接触碟法）3，人员监测表面取样法（接触碟法）2，洁净区的验证和监测13131 1，空气浮游菌监测，空气浮游菌监测沉降菌法沉降菌法-被动法被动法沉
7、降碟在空气中的暴露时间沉降碟在空气中的暴露时间4小时小时监控整个灌装过程监控整个灌装过程只能给出定性和半定量的数据只能给出定性和半定量的数据应结合空气浮游菌的数据，对沉降碟的结果进行评价应结合空气浮游菌的数据，对沉降碟的结果进行评价定量空气浮游菌采样法定量空气浮游菌采样法-主动法主动法撞击式，离心式和膜过滤（明胶）取样仪撞击式，离心式和膜过滤（明胶）取样仪应取一定体积的空气（取样体积应有代表性）应取一定体积的空气（取样体积应有代表性）仪器应经过校验仪器应经过校验2，洁净区的验证和监测14142 2，环境表面监测：，环境表面监测：表面取样法表面取样法应对接触产品表面、设备、地面、墙面等定期监测接
8、触蝶法：适用于平整表面l取样面积25cm2 l培养基略有凸起，高于碟子边缘，便于取样 l培养基中应含有中和剂/保护剂棉签擦拭法：适用于不规则表面l取样面积25cm2 l定性或定量表面样应在无菌操作结束时取l以最大限度地降低无菌制造过程中关键表面污染的风险2，洁净区的验证和监测15152，洁净区的验证和监测3 3，人员监测，人员监测表面取样法（接触碟法），取样时间一般为：l工作结束，离开洁净区前取样l处理异常情况后（取样后重新更衣或更换手套）l生产过程中随时监测特别注意：特别注意：l不得在刚消毒过后取样不得在刚消毒过后取样1616 其它事项每个受训者必须经过3次更衣试验确认合格后才能进入无菌操作
9、区。资格确认合格的操作员工每年需重复一次更衣试验。当有已确认合格的人员有违反更衣程序趋向时，须重复l3次更衣试验。连续3次监测不合格人员，取消相关资质，需重新培训和进行更衣验证。在连续10次监测中，如有4次不合格的人员，取消相关资质，需重新培训和进行更衣验证。采样点参考标准（CFU皿）采样点参考标准（CFU皿）手套3口罩10胸口5前额5前臂5靴子裤子接合处5无菌区人员监测无菌区人员监测合格标准合格标准2，洁净区验证和监测17173，环境监测方案 洁净区应制定系统的环境监测方案，包括动态监测和静态监测。关键项目：悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物。取样计划的影响因素：产品类型、生产过程、设施/
10、工艺设计、生产密度、人为干扰、环境监测历史数据等。取样点的选择主要取决于洁净室的设计和生产要求。环境监测计划案例。环境监测动态标准。1818环境监测方案 环境监控整体要求洁净区监测年度洁净级别确认日常环境监测动态监测静态监测无菌生产区A/B最终灭菌C级的主要功能间C级区域D级区域1919取样区域取样区域取样频率取样频率百级或更严百级或更严 Class 100 or better room designations1次次/班班毗邻百级区如万级毗邻百级区如万级 Supporting areas immediately adjacent to Class 100(e.g.，Class 10，000)
11、1次次/班班其它辅助区域其它辅助区域10万级万级 Other support areas2次次/周周可能与产品可能与产品/容器接触区域容器接触区域 Potential product/container contact areas2次次/周周10万级或以下万级或以下 or lower Other support areas to aseptic processing areas but non-product contact1次次/周周参考：USP311116从表中可以看出，美国药典中没有明确B级，但有100级、1 万级、10万级甚至更低级别，划分比较灵活，按需要而定。美国药典微生物监测频率美
12、国药典微生物监测频率环境监测方案环境监测案例监控区监控区（洁净度级别）监控频率监控频率监控项目监控项目最终灭菌产品生产区域称量配料、配液（C级区）每周一次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物灌封间（C/A级区）每周两次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物操作者手套表面微生物轧盖间、洗塞间（C/A级区）每周一次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物操作者手套表面微生物容器精洗区（D级区）两周一次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物1.每月一次环境监测案例监控区监控区（洁净度级别）监控频率监控频率监控项目监控项目非最终灭菌产品生产区域称量配料、配液（C/A级区
13、）每周两次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物无菌灌封辅助区（C级区）每周两次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物无菌灌封间(B/A级区)每班一次每批一次空气悬浮粒子空气浮游菌空气沉降菌表面微生物操作者手套和操作服表面微生物1.每月一次环境监测案例监控区监控区（洁净度级别）监控频率监控频率监控项目监控项目取样间(C/A级区)每周一次每次取样空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌表面微生物微生物实验室无菌实验室(B/A级区)每次实验空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌表面微生物操作者手套表面微生物限度检查实验室（C/A级区）每次实验空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌1表面微生物操作
14、者手套表面微生物抗生素效价测定室（D级区）每周一次空气悬浮粒子1空气浮游菌空气沉降菌表面微生物1.每月一次2323洁净区监测的位置取样位置选择时考虑因素：哪些部位的微生物污染最可能对产品质量造成不良影响？在生产过程中，什么地点最容易长菌？哪些地方是清洁、消毒或灭菌时最难覆盖/接触或最难奏效的部位？什么活动会导致污染的扩散？在某一部位的取样操作，足以导致测试数据的差错或污染产品？取样只应在生产结尾换班时进行吗？2424洁净区监测的位置系统取样点环境空气（灌装线）接近敞开和/或者已灌装的容器洁净室空气最接近工作区域水使用点表面（厂房）地面、门把手、墙、帘子表面（设备）灌装线、控制面板、供胶塞的料斗
15、压缩空气离开压缩机最远点无菌检查系统最接近真空源的接口灌装线操作人员至少要检手指印 单向流（例如，单向流罩）靠近活动最多的区域示例示例2525洁净区监测的位置示例：无菌灌装线示例：无菌灌装线取样点应在产品或组件暴露的区域周围取样，如：l在灌装针头处l将产品装载入冻干腔室处l胶塞供料桶l无菌部件进行连接操作的部位l操作人员频繁活动处（不影响生产过程）注意：靠近产品，但不接触产品的位置注意：靠近产品，但不接触产品的位置2626浮游菌、沉降菌取样点 沉降菌、浮游菌：监控点位置，高度一般为离地80cm左右，或操作台面。浮游菌、沉降菌监控点的设置根据生产工艺及污染风险综合考虑。2727洁净区表面微生物取
16、样点 C级区取样点：一般为地面、墙面及操作人员十指手套。对C级下的局部A级区取样宜在生产结束后进行，避免造成污染。地面取样墙面取样灌装机（A级）产品转移（A级）2828洁净区表面微生物取样点 B级区接触碟取样位置应能及时发现潜在污染风险，在受污染可能性较高的位置布点。无菌分装设备门进出B级区门把手仪器、设备操作键、触摸屏等传递窗门把手2929使用前擦拭后预制培养基无菌擦拭棒无菌擦拭棒SCD培养基颈部保护套拭子使用方法：1、拔除下端保护套，取出拭子用 无菌液体润湿 2、擦拭取样表面（一般为25cm2）3、取样结束后将拭子放回保护套 4、将擦拭棒颈部掰断，上端SCD 培养基流入保护套中并浸没拭子5
17、、将整个擦拭棒放入培养箱培养SCD培养基3030 无菌试验预制培养无菌试验预制培养基基 一般TGC配制后会有氧化层，中国药典规定在无菌试验前其氧化层高度不得高于培养基高度的1/5，培养结束后其氧化层高度不得高于培养基高度的1/3。图中TGC培养基瓶中充入保护性气体（抗氧化），有利于试验结果的判断。预制培养基3131预制培养平板包装 无菌区使用预制平板：一般采用三层包装形式：55mm接触平板90mm预制平板3232预制平板进入洁净区 预制平板进入无菌区，须避免对监控区域的污染。去除最外层包装 放入传递窗开启紫外灯消毒外表面消毒处理3333预制平板使用示意图 接触碟表面取样示意图：1，取样点采样2
18、，取样位置消毒 3，用无尘布清洁4，标明取样点编号5，平板入无菌保管袋6，保管袋密封待培养3434预制平板使用示意图 浮游菌监测示意图：使用前喷酒精进行消毒，开启至少5分钟消毒完成，放入90mm平板装上无菌采样托盘设置采样量，启动采样采样完成取出平板（有明显凹坑）盖上培养皿盖，装入无菌保管袋待培养未经采样空白平板3535三、趋势分析和质量回顾1，警戒限和纠偏限的设定2，趋势分析3，质量回顾36361，警戒限和纠偏限的设定 应设定在法定标准值以下。应设定在法定标准值以下。警戒限警戒限根据验证数据根据验证数据根据历史监测数据并进行趋势分析后制定根据历史监测数据并进行趋势分析后制定 纠偏限纠偏限参考
19、参考GMP和药典等法规要求和药典等法规要求根据历史监测数据并进行趋势分析后制定根据历史监测数据并进行趋势分析后制定3737警戒限和纠偏限的设定 设定的基准值不只是用来判定合格与否，而是用于过程控制的设定值。若监测结果显示超过基准值，根据各个基准值的定义采取相应的处理措施。关键项目应年度趋势分析，根据趋势分析的结果制定警戒限和纠偏限。GMP 第一百零一条应当按照操作规程对纯化水、注射用水管道进行清洗消毒，并有相关记录。发现制药用水微生物污染达到警戒限度、纠偏限度时应当按照操作规程处理。3838法定标准运行设定标准运行通常值管理设计目标纠偏限Action Level纠偏限Action Level警
20、戒限Alert Level警戒限Alert Level警戒限和纠偏限的设定3939设定示例洁净度级别洁净度级别尘埃粒子数（尘埃粒子数（0.50.5 m m）浮游菌浮游菌警戒限警戒限 (m3)纠偏限纠偏限 (m3 )警告限警告限 (cfu/(cfu/m3 )纠偏限纠偏限 (cfu/(cfu/m3 )A A1,7601,7603,5203,520 130 cfu/ml50cfu/mlWFI10cfu/100ml5cfu/100ml8cfu/100ml4040设定示例洁净度级别表面微生物设备/器具 地面警戒限 (cfu/25cm2)纠偏限 (cfu/25cm2)警戒限 (cfu/25cm2)纠偏限
21、(cfu/25cm2)A-13 5B3 55 10C13 2515 3041412，趋势分析GMP要求第二百二十一条质量控制实验室的文件应当符合第八章的原则，并符合下列要求：（三）宜采用便于趋势分析的方法保存某些数据（如检验数据、环境监测数据、制药用水的微生物监测数据）；ICH-Q10、EU GMP、PIC/S也有类似要求数据处理-趋势分析l确定分析目标l用警戒/纠偏值来确定监测数据l确认现行的警戒/纠偏限度及标准是否恰当l采取的“纠偏措施”l定期报告来更新管理。l年度报告中包括数据的总结和对纠偏限度的回顾42423，质量回顾GMP要求，第十章要求，第十章 第八节产品质量回顾分析第八节产品质量
22、回顾分析第二百六十六条应当按照操作规程，每年对所有生产的药品按品种进行产品质量回顾分析，以确认工艺稳定可靠，以及原辅料、成品现行质量标准的适用性，及时发现不良趋势，确定产品及工艺改进的方向。应当考虑以往回顾分析的历史数据，还应当对产品质量回顾分析的有效性进行自检。.企业至少应当对下列情形进行回顾分析：（十一）相关设备和设施，如空调净化系统、水系统、压缩空气等的确认状态；4343质量回顾示例 PW 系统电导率、不挥发物、微生物限度 WFI 系统 pH值、电导率、总有机碳、不挥发物、微生物限度4444注射用水注射用水-微生物微生物 注射用水微生物限度的质量标准为10CFU/100ml，日常监控结果均小于5CFU/100ml，低于警戒限，平均值为0.1 CFU/100ml，远低于标准限度，并且趋势较平稳。纠偏限警戒限质量回顾示例
