1、第三节第三节 植物组织培养技术植物组织培养技术学习目标学习目标 1掌握培养基的配制。2掌握植物组织培养过程中各项技能。3掌握合理利用激素诱导愈伤组织脱分化、再分化。新课导入新课导入 土豆发芽落地生根 我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？植物的组织培养1 影响植物组织培养因素2新知探究新知探究实验操作3植物的组织培养1（1）细胞的分化概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程。过程：如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统.特点：B.稳定性：C.全能性：A.持久性：是一种持久性的变化，它发生在生物体的
2、整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度.细胞分化是稳定的，一般不可逆转.已分化的细胞，仍具有发育的潜能.（2）细胞的全能性定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性.原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因 高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需的遗传物质.已分化的植物细胞，仍具有全能性.实例：受精卵生殖细胞体细胞全能性的比较:（3）植物组织培养a.细胞离体必要条件：b.一定的营养物质、激素和其他外界条件原理：细胞的全能性A.外植体：从活植物体上切
3、下进行培养的那部分细胞、组织或器官.相关概念:B.脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。C.再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程D.愈伤组织：细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞.人参的愈伤组织菠萝的愈伤组织影响植物组织培养因素2（1）植物材料的选择同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝（2）MS培养基主要成分包括：A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、
4、维生素、蔗糖等D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等u常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 u生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素u在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势u激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向（3）植物激素的影响生长素类：2，4二氯苯氧乙酸（2，4D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）细胞分裂素类：激动素（KT）、6苄基嘌呤（6BA）、玉米素（ZT）赤霉素类：赤霉酸（GA3）使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素细胞既分裂、也分化同
5、时使用分化频率高使用比例实验结果生长素细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素细胞分裂素有利于根的分化有利于芽的分化，抑制根的分化促进愈伤组织生长（4）pH、温度、光照pH控制在5.8左右温度控制在1825每日用日光灯照射14.5h实验操作3（1）实验用品100ml三角瓶或大口培养瓶、镊子、超净台、灭菌锅、封口膜和橡皮圈、酒精灯、有棉球的广口瓶、三角漏斗、培养皿（2）实验步骤培养基的制备接种材料的消毒；材料的接种；丛壮苗培养；生根培养；移栽、炼苗；定植。培养基的制备称量药品确定配方（MS固体培养基）配置母液按比例稀释、混匀装瓶高压蒸汽灭菌接种材料的消毒流水冲洗10%漂白粉浸泡5-10分钟无菌水冲洗4-
6、6次切段（0.51cm）材料的接种无菌水消毒茎的切段接种工具消毒装有发芽培养基的三角瓶口灼烧灭菌接种（茎切段插入培养基，23段每瓶）封瓶丛壮苗培养2、条件温度：1525光照强度：10002000Lx 光周期：14.5h培养期：23周1、培养设备：带日光灯的培养架生根培养材料：健壮的嫩枝，23枝每瓶。培养条件：同丛壮苗培养周期：2周左右，根长1cm左右出苗移栽培养基：生根培养基移栽、炼苗定植将苗转移至土中，直至开花基质：腐殖土或蛭石周期：12周管理：高温和强光时要用遮阳棚合理控制，并控制土壤湿度自我检测自我检测1、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（
7、）A.消毒灭菌 B.适宜的温度C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 CD2、植物细胞表现出全能性的必要条件是（）A.导入其他植物细胞的基因B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中C.用适当浓度的秋水仙素处理D.脱离母体后，给予适宜的营养和适宜的温度等外界条件 3、下列关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是()A.不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同B.在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用互相独立D.pH、温度、光照条件对植物组织培养也特别重要 D4、某园艺场经过长期精心选育，培养出一株形态优美的兰花，如果要保持母本的优良性状，并尽快大规模繁殖，最适合的繁殖方式是（）A.分裂生殖 B.有性生殖C.孢子生殖 D.组织培养 D退出
