1、1/10第第 2 节节动物细胞工程动物细胞工程第第 1 课时课时动物细胞培养动物细胞培养课标内容要求课标内容要求核心素养对接核心素养对接1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织关组织、分散成单个细胞后分散成单个细胞后，在适宜的在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2简述干细胞在生物医学工程中有广简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。泛的应用价值。1.科学思维：说明动物细胞培养的条件科学思维：说明动物细胞培养的条件和动物细胞培养过程中细胞生长的特和动物细胞
2、培养过程中细胞生长的特点点；比较动物细胞培养与植物组织培养比较动物细胞培养与植物组织培养的不同。的不同。2社会责任：说明干细胞在医学、药社会责任：说明干细胞在医学、药物安全性与有效性检测等领域的应用物安全性与有效性检测等领域的应用及存在的问题。及存在的问题。一、概念一、概念动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞单个细胞，然，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖增殖的技术。的技术。二、动物细胞培养的条件二、动物细胞培养的条件1无菌、无毒的环境无菌、无毒的环境培养液和培养液和培养
3、用具培养用具灭菌处理，灭菌处理，无菌无菌环境下进行操作环境下进行操作更换更换培养液培养液，清除代谢物，清除代谢物2营养营养营养物质：糖类、营养物质：糖类、氨基酸氨基酸、无机盐无机盐、维生素等、维生素等血清、血浆血清、血浆：补充培养液中尚未研究清楚的成分：补充培养液中尚未研究清楚的成分3温度和温度和 pH温度：哺乳动物多以温度：哺乳动物多以 36.50.5 为宜为宜pH：7.27.44气体环境气体环境O2：细胞代谢所必需的：细胞代谢所必需的CO2：维持培养液的：维持培养液的 pH三、动物细胞培养的过程三、动物细胞培养的过程2/101悬浮生长悬浮生长：细胞悬浮在培养液中生长增殖细胞悬浮在培养液中生
4、长增殖。密度过大时密度过大时，由于由于有害代谢有害代谢物物积累和培养液中积累和培养液中营养物质缺乏营养物质缺乏，细胞分裂受阻。，细胞分裂受阻。2细胞贴壁细胞贴壁：多数细胞贴附在：多数细胞贴附在瓶壁瓶壁上生长。上生长。3接触抑制接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触相互接触时时，细胞细胞停止分裂生长停止分裂生长的现象称为细胞的接触抑制。的现象称为细胞的接触抑制。4原代培养原代培养：指动物组织经处理后的：指动物组织经处理后的初次培养初次培养。5传代培养传代培养：分瓶后的细胞培养分瓶后的细胞培养。传代培养时传代培养时，悬浮生长的细胞直接用悬浮生长的细胞直接用离离心心法收集
5、；贴壁生长的细胞要先用法收集；贴壁生长的细胞要先用胰蛋白酶胰蛋白酶等处理，再用等处理，再用离心离心法收集。法收集。四、干细胞的培养及其应用四、干细胞的培养及其应用1干细胞功能干细胞功能：在一定条件下，可以分化成：在一定条件下，可以分化成其他类型的细胞其他类型的细胞。2干细胞的存在干细胞的存在：早期胚胎早期胚胎、骨髓骨髓和和脐带血脐带血等多种组织和器官中。等多种组织和器官中。3干细胞的种类干细胞的种类3/10判断对错判断对错(正确的打正确的打“”“”，错误的打，错误的打“”“”)1多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜 pH 为为 6.87.0。 ()提
6、示提示：多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜 pH 为为 7.27.4。2动物细胞培养要定期更换培养液动物细胞培养要定期更换培养液，其目的是便于清除代谢物其目的是便于清除代谢物，防止代谢防止代谢物积累对细胞自身造成伤害。物积累对细胞自身造成伤害。()3动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。()提示提示：动物细胞培养技术的原理是细胞增殖。动物细胞培养技术的原理是细胞增殖。4制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理。制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理。()提示提示：应该用胰蛋白酶
7、或胶原蛋白酶处理。应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。5培养动物细胞的第一代培养动物细胞的第一代(即第一次细胞增殖即第一次细胞增殖)被称为原代培养。被称为原代培养。()提示提示：原代培养指动物组织经处理后的初次培养。原代培养指动物组织经处理后的初次培养。6培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。()提示提示：由于接触抑制所以培养瓶壁上形成的应该是单层细胞。由于接触抑制所以培养瓶壁上形成的应该是单层细胞。动物细胞培养动物细胞培养1过程解读过程解读4/10(1)原理：细胞增殖。原理：细胞增殖。(2)选材：一般取自幼龄动物的器官或组织，因为这些
8、组织或器官的生命力选材：一般取自幼龄动物的器官或组织，因为这些组织或器官的生命力旺盛，分裂能力强。旺盛，分裂能力强。(3)酶处理酶处理用酶两次处理的目的：第一次使用的目的是使组织细胞分散开；第二次用酶两次处理的目的：第一次使用的目的是使组织细胞分散开；第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分散后继续培养。使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分散后继续培养。使细胞分散开的原因：一是能保证细胞所需要的营养供应；二是能保证使细胞分散开的原因：一是能保证细胞所需要的营养供应；二是能保证细胞内有害代谢产物的及时排出。细胞内有害代谢产物的及时排出。不能用胃蛋白酶处理：由于大多数动物细胞培养的适
9、宜不能用胃蛋白酶处理：由于大多数动物细胞培养的适宜 pH 为为 7.27.4，而胃蛋白酶发挥作用的最而胃蛋白酶发挥作用的最适适 pH 为为 2.0 左右左右， 因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开。2相关概念的辨析相关概念的辨析(1)细胞贴壁和接触抑制细胞贴壁和接触抑制细胞贴壁：将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜环境中培养，悬液中分细胞贴壁：将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜环境中培养，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相
10、互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。(2)原代培养和传代培养：区分两种原代培养和传代培养：区分两种“培养培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。对象。第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细胞第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细胞后进行培养，为原代培养。后进行培养，为原代培养。第二次：细胞培养过程中出现接触抑制，用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离第二次：细胞培养过程中出现接触抑制，用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离下来，然后，将其分散到多个培养瓶中继续培养，为传代培养。下来，然后，将其
11、分散到多个培养瓶中继续培养，为传代培养。3培养条件的分析培养条件的分析(1)添加血清、血浆的作用：血清和血浆中含有多种维持细胞正常代谢和生添加血清、血浆的作用：血清和血浆中含有多种维持细胞正常代谢和生长的物质，如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等。细胞培养时，一般需添长的物质，如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等。细胞培养时，一般需添加加 10%20%的血清或血浆。的血清或血浆。(2)气体环境：气体环境：CO2调节培养液调节培养液 pH，O2维持细胞有氧呼吸。维持细胞有氧呼吸。5/10合作探究：合作探究：(1)动物细胞培养过程中有接触抑制现象，这一现象说明了细胞动物细胞培养过程中有接触抑制现象
12、，这一现象说明了细胞膜具有什么功能？细胞膜接受信息后，细胞停止分裂又说明了什么？膜具有什么功能？细胞膜接受信息后，细胞停止分裂又说明了什么？提示提示：细胞培养过程中的接触抑制说明了细胞膜能进行细胞间的信息交流细胞培养过程中的接触抑制说明了细胞膜能进行细胞间的信息交流。细胞膜接受信息后，细胞停止分裂，说明了细胞膜接受的信息能够传递到细胞细胞膜接受信息后，细胞停止分裂，说明了细胞膜接受的信息能够传递到细胞核核 。(2)为什么动物细胞培养中有贴壁生长的特性？为什么动物细胞培养中有贴壁生长的特性？提示提示：动物细胞膜上有糖蛋白使细胞具有黏着性。动物细胞膜上有糖蛋白使细胞具有黏着性。(3)根据癌细胞的特
13、点，思考一下培养的癌细胞有没有接触抑制现象。根据癌细胞的特点，思考一下培养的癌细胞有没有接触抑制现象。提示提示：癌细胞细胞膜上糖蛋白减少，细胞的黏着性降低，在适宜的条件下癌细胞细胞膜上糖蛋白减少，细胞的黏着性降低，在适宜的条件下可以无限增殖，因此培养的癌细胞无接触抑制现象，在培养瓶中能够生长成多可以无限增殖，因此培养的癌细胞无接触抑制现象，在培养瓶中能够生长成多层。层。1下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是()A动物细胞培养的目的就是获得分泌蛋白动物细胞培养的目的就是获得分泌蛋白B动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使
14、细胞分散开C动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象D可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体B动物细胞培养的目的有时是为了获得分泌蛋白，有时是为了获得更多动物细胞培养的目的有时是为了获得分泌蛋白，有时是为了获得更多的细胞的细胞；通常培养前要将动物组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理通常培养前要将动物组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散开使其分散开；分散的细胞在培养瓶中很快就贴附在瓶壁上生长，当生长到细胞间表面相互接分散的细胞在培养瓶中很快就贴附在瓶壁上生长，当生长到细胞间表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即出现接触抑制现象
15、；通过细胞培养技术只能触时，细胞就会停止分裂增殖，即出现接触抑制现象；通过细胞培养技术只能获得大量的细胞或细胞产物，而不能获得完整的动物个体。获得大量的细胞或细胞产物，而不能获得完整的动物个体。2实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是()A甲过程需要在无菌条件下进行甲过程需要在无菌条件下进行B乙过程可用胰蛋白酶处理皮肤组织乙过程可用胰蛋白酶处理皮肤组织C丙过程是原代培养出现接触抑制现象丙过程是原代培养出现接触抑制现象6/10D丁过程是传代培养细胞，不出现接触抑制现象丁过程是传代培养细胞，不出现接触抑制现象D取小鼠的皮肤组
16、织应在无菌条件下进行；乙过程可用胰蛋白酶处理皮取小鼠的皮肤组织应在无菌条件下进行；乙过程可用胰蛋白酶处理皮肤组织，获得单细胞悬液；原代培养会出现接触抑制现象；传代培养细胞也会肤组织，获得单细胞悬液；原代培养会出现接触抑制现象；传代培养细胞也会出现接触抑制现象。出现接触抑制现象。植物组织培养与动物细胞培养的比较植物组织培养与动物细胞培养的比较项目项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养理论基础理论基础植物细胞全能性植物细胞全能性细胞增殖细胞增殖培培养养基基类型类型固体或半固体培养基固体或半固体培养基液体培养基液体培养基成分成分矿质元素、蔗糖、维生素、氨基矿质元素、蔗糖、维生素、氨基酸
17、、植物激素等酸、植物激素等无机盐无机盐、葡萄糖葡萄糖、维生素维生素、氨基氨基酸、促生长因子、动物血清等酸、促生长因子、动物血清等取材取材植物幼嫩部位或花药等植物幼嫩部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织物的器官或组织过程过程脱分化、再分化脱分化、再分化原代培养、传代培养原代培养、传代培养相同点相同点都需要人工条件下的无菌操作都需要人工条件下的无菌操作，无菌培养无菌培养；都需要配制合成培都需要配制合成培养基；养基；都需要适宜的温度、都需要适宜的温度、pH 等条件等条件合作探究：合作探究：1.动物细胞培养和植物组织培养的目的有什么不同？动物细胞培养和植物组织
18、培养的目的有什么不同？提示提示：动物细胞培养是为了获得大量的动物细胞或细胞产物；植物组织培动物细胞培养是为了获得大量的动物细胞或细胞产物；植物组织培养是为了获得新个体或细胞产物。养是为了获得新个体或细胞产物。2动物细胞培养和植物组织培养过程中细胞分裂的方式相同吗？动物细胞培养和植物组织培养过程中细胞分裂的方式相同吗？提示：提示：相同，都是有丝分裂。相同，都是有丝分裂。下列属于动物细胞培养与植物组织培养区别的是下列属于动物细胞培养与植物组织培养区别的是()A动物细胞培养基与植物细胞培养基的成分有所不同动物细胞培养基与植物细胞培养基的成分有所不同B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行动物细胞培养不需
19、要在无菌条件下进行C动物细胞培养可发生遗传物质改变，而植物组织培养不能动物细胞培养可发生遗传物质改变，而植物组织培养不能D植物组织培养和动物细胞培养都体现了细胞的全能性植物组织培养和动物细胞培养都体现了细胞的全能性A动物细胞培养所用的培养基与植物组织培养所用的培养基的成分不动物细胞培养所用的培养基与植物组织培养所用的培养基的成分不同，如培养动物细胞的培养基需加入血清，而植物组织培养所用的培养基则不同，如培养动物细胞的培养基需加入血清，而植物组织培养所用的培养基则不7/10需加入血清；动物细胞培养与植物组织培养都需要在无菌、人工控制的条件下需加入血清；动物细胞培养与植物组织培养都需要在无菌、人工
20、控制的条件下进行；动物细胞培养与植物组织培养过程中都可发生遗传物质的改变；植物组进行；动物细胞培养与植物组织培养过程中都可发生遗传物质的改变；植物组织培养最终能够形成完整的植物体，能体现植物细胞的全能性，动物细胞最终织培养最终能够形成完整的植物体，能体现植物细胞的全能性，动物细胞最终不能被培养成新的动物，不能体现动物细胞的全能性。不能被培养成新的动物，不能体现动物细胞的全能性。干细胞的种类及功能干细胞的种类及功能来源来源功能及应用功能及应用胚胎干细胞胚胎干细胞(ES细胞细胞)早期胚胎早期胚胎能够分化成为动物体内的任何细能够分化成为动物体内的任何细胞，并进一步形成组织、器官甚至胞，并进一步形成组
21、织、器官甚至生物个体生物个体成体干细胞成体干细胞成体组织或器官成体组织或器官只能分化成特定的细胞或组织，不只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的潜能具有发育成完整个体的潜能诱导多能干细胞诱导多能干细胞(iPS 细胞细胞)体外诱导体细胞产生体外诱导体细胞产生能分化成为具有特定功能的细胞，能分化成为具有特定功能的细胞，用于治疗疾病用于治疗疾病合作探究：合作探究：(1)诱导多能干细胞用于治疗人类的某些顽症的原理是什么？诱导多能干细胞用于治疗人类的某些顽症的原理是什么？提示：提示：诱导多能干细胞具有发育的全能性，可以被诱导分化形成新的组织诱导多能干细胞具有发育的全能性，可以被诱导分化形成新
22、的组织细胞，经移植可使坏死或退化部位得以修复并恢复正常功能。细胞，经移植可使坏死或退化部位得以修复并恢复正常功能。(2)诱导多能干细胞为什么可以解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的诱导多能干细胞为什么可以解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题？问题？提示：提示：通过干细胞体外诱导分化，可以培育出人造器官，从而解决供体器通过干细胞体外诱导分化，可以培育出人造器官，从而解决供体器官不足的问题。另一方面，由于是自身细胞经诱导分化形成的，所以无免疫排官不足的问题。另一方面，由于是自身细胞经诱导分化形成的，所以无免疫排斥反应。斥反应。1(不定项不定项)人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂
23、肪、肝、人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞。下图表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程。下列有神经等多种组织细胞。下图表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程。下列有关叙述正确的是关叙述正确的是()A人脐带间充质干细胞属于一种人脐带间充质干细胞属于一种 iPS 细胞细胞8/10B通过离心除去上清液可以除去胰蛋白酶通过离心除去上清液可以除去胰蛋白酶C过程过程通常用胰蛋白酶处理通常用胰蛋白酶处理D出现接触抑制前，培养瓶中的细胞数量有可能呈出现接触抑制前，培养瓶中的细胞数量有可能呈“J”形增长形增长BCDiPS 细胞是经人工诱导产生的，脐带间充质干细胞不是诱导多能干细
24、胞是经人工诱导产生的，脐带间充质干细胞不是诱导多能干细胞。细胞。2关于关于 ES 细胞和细胞和 iPS 细胞及其应用细胞及其应用的的说法说法，正确的是正确的是()AES 细胞存在于早期胚胎中，能分化成各种功能细胞，不能形成生物个细胞存在于早期胚胎中，能分化成各种功能细胞，不能形成生物个体体BES 细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织CiPS 细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织DiPS 细胞是人工诱导产生的，也可诱导分化成为各种组织细胞细胞是人工诱导产生的，也可诱导分化成为各种组织细
25、胞DES 细胞存在于早期胚胎中细胞存在于早期胚胎中， 能分化成各种功能细胞能分化成各种功能细胞， 进一步形成组织进一步形成组织、器官甚至生物个体。成体干细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组器官甚至生物个体。成体干细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织。织。课堂小结课堂小结知知 识识 网网 络络 构构 建建核核 心心 语语 句句 背背 诵诵1.动物细胞培养的培养基为液体培养动物细胞培养的培养基为液体培养基基，含有糖类含有糖类、氨基酸氨基酸、无机盐无机盐、维生维生素等成分，还要加入血清等天然成分素等成分，还要加入血清等天然成分。2.培养动物细胞的培养动物细胞的 CO2培养箱中含培养
26、箱中含有有95%的空气和的空气和 5%的的 CO2。3.原代培养和传代培养均需用胰蛋白酶原代培养和传代培养均需用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞。处理使其分散成单个细胞。4.培养的动物细胞有贴壁生长和接触抑培养的动物细胞有贴壁生长和接触抑制现象。制现象。5.干细胞包括胚胎干细胞和成体干细干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞。胞。6.体细胞经体外诱导能够形成类似胚胎体细胞经体外诱导能够形成类似胚胎干细胞干细胞的的诱导多能干细胞。诱导多能干细胞。9/101下列哪项条件不是动物细胞培养所需要的下列哪项条件不是动物细胞培养所需要的()A无菌、无毒的环境无菌、无毒的环境B充足的营养物质充足的营养物质C适宜的温
27、度和适宜的温度和 pHD95%的空气和的空气和 5%的氧气的氧气D二氧化碳培养箱的气体条件是二氧化碳培养箱的气体条件是 95%的空气和的空气和 5%的二氧化碳。的二氧化碳。2动物细胞培养过程的顺序是动物细胞培养过程的顺序是()原代培养原代培养传代培养传代培养胰蛋白酶处理组织，形成单个细胞，制胰蛋白酶处理组织，形成单个细胞，制成细胞悬液成细胞悬液ABCDD动物细胞培养是用动物胚胎或幼龄动物器官通过胰蛋白酶处理制成细动物细胞培养是用动物胚胎或幼龄动物器官通过胰蛋白酶处理制成细胞悬液，再通过原代培养和传代培养得到细胞株。胞悬液，再通过原代培养和传代培养得到细胞株。3动植物体的体细胞进行离体培养，下列
28、叙述正确的是动植物体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()A都需用都需用 CO2培养箱培养箱B都需用液体培养基都需用液体培养基C都要在无菌条件下进行都要在无菌条件下进行D都可体现细胞的全能性都可体现细胞的全能性C植物组织培养不需要用植物组织培养不需要用 CO2培养箱，是用的固体培养基。动物细胞培培养箱，是用的固体培养基。动物细胞培养是为了获得更多的动物细胞，不能体现细胞的全能性。养是为了获得更多的动物细胞，不能体现细胞的全能性。4关于关于 iPS 细胞及应用的说法细胞及应用的说法，正确的是正确的是()AiPS 细胞是从早期胚胎中获取的细胞是从早期胚胎中获取的B造血干细胞是一种造血干细胞是一
29、种 iPS 细胞细胞C采用不同的方法可将成纤维细胞诱导产生采用不同的方法可将成纤维细胞诱导产生 iPS 细胞细胞DiPS 细胞诱导基因突变可分化成各种组织细胞细胞诱导基因突变可分化成各种组织细胞CiPS 细胞是体细胞体外诱导产生的干细胞细胞是体细胞体外诱导产生的干细胞，诱导诱导 iPS 细胞产生的方法有细胞产生的方法有多种。多种。iPS 细胞分化成各种组织细胞是基因选择性表达的过程。细胞分化成各种组织细胞是基因选择性表达的过程。5某研究小组进行药物实验时某研究小组进行药物实验时，以动物肝细胞为材料以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培测定药物对体外培10/10养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两
30、种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题。正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题。(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是_。细胞培养应在含。细胞培养应在含 5%CO
31、2的恒温培养箱中进行，的恒温培养箱中进行，CO2的作的作用是用是_。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物。药物实验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更实验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需要用。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需要用_处理。处理。(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_。解析解析癌细胞具有无限增殖的特点癌细胞具有无限增殖的特点，
32、故相同培养条件下故相同培养条件下，肝肿瘤细胞数量肝肿瘤细胞数量多于正常肝细胞数量。动物细胞培养需提供无菌环境，如向培养液中加入适量多于正常肝细胞数量。动物细胞培养需提供无菌环境，如向培养液中加入适量的抗生素可防止细菌的污染的抗生素可防止细菌的污染；需提供一定的营养需提供一定的营养，如向培养基中加入适量血清如向培养基中加入适量血清，以便补充合成培养基中缺乏的物质；需提供一定的气体环境，如向恒温培养箱以便补充合成培养基中缺乏的物质；需提供一定的气体环境，如向恒温培养箱中加入中加入 5%的的 CO2，目的是维持培养液的，目的是维持培养液的 pH。答案答案(1)多多(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质血清可以补充合成培养基中缺乏的物质维持培养液维持培养液的的pH(3)停止停止多多胰蛋白酶胰蛋白酶(4)抗生素抗生素
