1、2021人人教版（教版（新教材新教材）必修二）必修二 遗传和进化遗传和进化第二章 细胞工程第2节 动物细胞培养（第一课时）动物细胞培养动物细胞培养动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合其它动物细胞工程的基础生产单克隆抗体动物细胞工程常用技术为什么要进行动物细胞培养？什么是动物细胞培养？怎样进行动物细胞的培养？一、动物细胞培养回顾：植物组织培养的原理是：细胞的全能性1）无菌、无毒的环境）无菌、无毒的环境（即对培养液和所有培养用具进行无菌处理，（即对培养液和所有培养用具进行无菌处理， 添添加一定量的抗生素，定期更换培养液）加一定量的抗生素，定期更换培养液）2）营养）营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微
2、量元素、促生长因子、葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清动物血清等。等。）3）温度）温度和和H 温度：温度：36.50.5度, pH值：7.2-7.44）气体环境：）气体环境： O2和和CO2（95%空气和空气和5% CO2 ） O2是细胞代谢所必需的，是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的的主要作用是维持培养液的pH。4.4.动物细胞培养的意义动物细胞培养的意义（1）生物制品：酶、生长因子、疫苗、单克隆抗体等（2）进行有毒物质和药物的检测（3）临床治疗：人工皮肤（4）生物学基础研究 ：细胞全能性的揭示、细胞周期及调控、癌变机理及细胞衰老的研究研发病毒疫苗研发病毒
3、疫苗干扰素干扰素通过细胞培养检测有毒物质通过细胞培养检测有毒物质细胞培养板细胞培养板例.动物细胞工程技术的基础是 （ ）A.动物细胞融合 B.单克隆抗体C.胚胎移植 D.动物细胞培养D D牛刀小试牛刀小试项目原理结果培养基的状态培养基的特有成分植物组织培养植物细胞全能型产生新植株、细胞产物 固体 植物激素 动物细胞培养细胞增殖 产生细胞群细胞产物 液体 动物血清血浆植物组织培养与动物细胞培养技术的比较植物组织培养与动物细胞培养技术的比较阅读教材阅读教材44-4544-45页，尝试回答以下问页，尝试回答以下问题题1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞为什么选用动物胚胎或幼龄个体的
4、器官或组织做动物细胞培养材料培养材料2、为什么将取出的组织分散成单个细胞？、为什么将取出的组织分散成单个细胞？3 3、如何将组织分散成单个细胞？、如何将组织分散成单个细胞？4、细胞培养用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是、细胞培养用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？什么成分？用胃蛋白酶可以吗？5、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？6 6、动物细胞生长特性、动物细胞生长特性：7、原代培养、传代培养、原代培养、传代培养8、10代以内的细胞的遗传物质有何特点？代以内的细胞的遗传物质有何特点？10代以后的？代以后的
5、？胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎加培养液加培养液部分细胞部分细胞“癌变癌变”，无限传代无限传代动物细胞培养动物细胞培养不能最终培养不能最终培养成动物体成动物体原原代代培培养养传代培养传代培养细细胞胞贴贴壁壁剥离、分瓶剥离、分瓶分化程度低，分化程度低，增殖能力强增殖能力强去掉组织去掉组织间蛋白间蛋白原代培养初次培养传代培养分瓶后的培养l细胞贴壁：细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上( (单层单层) )。要求：要求：培养瓶（皿）内表面光滑、无毒、易于贴附。培养瓶（皿）内表面光滑、无毒、易于贴附。l 接触抑制接触抑制： 当贴壁细胞分裂生当贴壁细胞分裂生长到表面相互
6、接触时，长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖。细胞就会停止分裂增殖。l原代培养原代培养把把第第1 1代代细胞的培养与细胞的培养与传传1010代以内代以内的细胞培的细胞培养统称为养统称为原代培养原代培养。l传代培养传代培养 当原代培养的当原代培养的细胞生长停止细胞生长停止，这时如果要使细胞继，这时如果要使细胞继续生长，就要及时用续生长，就要及时用胰蛋白酶胰蛋白酶等等，使细胞从瓶壁上，使细胞从瓶壁上解离下来，然后加入新的培养液，将解离下来，然后加入新的培养液，将细胞分离稀释细胞分离稀释，并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内的过程。并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内的过程。l 细胞株细胞株从原代培养细
7、胞群中筛选出进行传代培养的细胞，从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到能传到40-5040-50代，其代，其遗传物质没有发生变化遗传物质没有发生变化。l 细胞系细胞系传到传到40-5040-50代后有代后有部分细胞遗传物质发生了变化部分细胞遗传物质发生了变化，具有，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，可能在培养条件下无癌细胞的特点，失去接触抑制，可能在培养条件下无限制的传代下去。限制的传代下去。细胞悬浮液细胞悬浮液细胞株细胞株10代细胞代细胞50代细胞代细胞细胞系细胞系无限传代无限传代原代培养原代培养传代培养传代培养遗传物质改变遗传物质改变原代培养、传代培养、细胞株、细胞系四者之间的关
8、系原代培养、传代培养、细胞株、细胞系四者之间的关系注意总结总结：动物细胞培养过程：动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物动物胚胎或幼龄动物的组织、器官的组织、器官配置细胞悬液配置细胞悬液剪碎用胰蛋白酶处理剪碎用胰蛋白酶处理1010代细胞代细胞转入培养瓶转入培养瓶40-5040-50代细胞代细胞传传代代培培养养无限传代无限传代单个细胞单个细胞加培养液稀释加培养液稀释传代传代1010代以内，代以内，遗传物质不改变，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型保持正常二倍体核型。传代传代10-5010-50代左右，增长缓慢以代左右，增长缓慢以至于完全停止，至于完全停止，部分细胞核型可部分细胞核型可能发生变化能发生变化（遗传物质可能改变（遗传物质可能改变）为什么用胰蛋白酶处理？为什么用胰蛋白酶处理？分瓶分瓶传代培养传代培养原代培养特点：原代培养特点：细胞贴壁、细胞贴壁、接触抑制接触抑制继续传代培养少部分细胞继续传代培养少部分细胞获得不获得不死性死性，细胞突变细胞突变，遗传物质已经遗传物质已经改变改变，等同于癌细胞等同于癌细胞。细胞株：细胞株：一般说一般说遗传物质未改变遗传物质未改变细胞系：细胞系：遗传物遗传物质已改质已改变变原原代代培培养养7、干细胞培养及其应用7、干细胞培养及其应用7、干细胞培养及其应用干细胞应用谢谢
