1、主 讲 人：马秀璟讲习组成员：阳长明、田恒康中药、天然药物注射剂质量控制的研究与评价药品审评中心2主要内容一、概述一、概述二、中药注射剂质量控制研究与评价二、中药注射剂质量控制研究与评价 要点及案例分析要点及案例分析1 1、立题研究、立题研究2 2、原料、原料3 3、辅料、辅料4 4、半成品的质量控制、半成品的质量控制5 5、与安全性有关的质量控制、与安全性有关的质量控制6 6、定性、定量控制、定性、定量控制7 7、含蛋白质、多糖注射剂的质量控制、含蛋白质、多糖注射剂的质量控制8 8、指纹图谱、指纹图谱3概述 注射剂俗称针剂，它包括灭菌或无菌溶液、注射剂俗称针剂，它包括灭菌或无菌溶液、乳浊液、
2、混悬液及临用前配成液体的无乳浊液、混悬液及临用前配成液体的无菌粉末、浓溶液等类型。注射剂由药物菌粉末、浓溶液等类型。注射剂由药物和附加剂、溶媒及特制的容器所组成，和附加剂、溶媒及特制的容器所组成，并需采用避免污染或杀灭细菌等工艺制并需采用避免污染或杀灭细菌等工艺制备的一种剂型。备的一种剂型。中药注射剂系指从药材中提取的有效物中药注射剂系指从药材中提取的有效物质制成的可供人体内的灭菌溶液或乳状质制成的可供人体内的灭菌溶液或乳状液，以及供临床用前配成溶液的无菌粉液，以及供临床用前配成溶液的无菌粉末或浓溶液【中国药典（末或浓溶液【中国药典（20002000年版一年版一部）】。部）】。中药注射剂的定义
3、4概述中药注射剂的特点积极作用：作用迅速，用于急、危重症、不宜口服的药物和病人。安全性担忧：易发生不良反应，主要是过敏反应等。5概述中药成分复杂，制成的注射剂中成分不甚清楚，从原料和工艺过程等均会带入不安全的因素。其质量控制要求不同于其他剂型，其质量控制应更加严格。强调从原药材、辅料、附加剂及工艺过程的全程质量控制，且注射剂必须进行特殊的质量检查。质量控制的特殊性及必要性6概述20世纪世纪30年代就有中药注射剂应用年代就有中药注射剂应用于临床于临床,但品种很少。但品种很少。70年代中草药群众运动时，经过临年代中草药群众运动时，经过临床试用有资料报道的就有床试用有资料报道的就有700多种。多种。
4、其中其中77年版药典收载年版药典收载23种。种。新药管理办法实施以来，中药注射新药管理办法实施以来，中药注射剂的质量控制研究水平有较大提高。剂的质量控制研究水平有较大提高。中药注射剂的研究历史和现状 7概述 近年来，注射剂的申报数量明显增多，质量也在逐步提高。以药材制成的单方、复方注射剂占多数。以有效成分、有效部位制成的注射剂较少。主要问题：立题依据不足、工艺中使用有毒溶剂、附加剂依据不足、安全性检查项目缺乏、指纹图谱达不到控制质量的目的等等。中药注射剂的研究历史和现状 8二、质量控制研究与评价要点及案例分析910以临床急、重症为适应症应比其他给药途径有明显的疗效优势处方成分应基本清楚综合考虑
5、其安全性、有效性及质量可控性，慎重选择注射剂。11 注射剂的原料主要包括药材（包括净药材和饮片）、有效成分和有效部位。以净药材投料的注射剂应关注原药材的质量稳定。一般注射剂用药材要固定产地、固定品种，制定中药材的指纹图谱，建立药材的内控质量标准。以有效部位、有效成分投料的注射剂，也要关注其质量的稳定性，有效成分、有效部位的含量和组成应基本稳定。12J 注射剂的附加剂的选择应审慎，如确需加入附加剂的，应有充分的试验依据，同时结合制剂稳定性安全性等综合考虑，通过试验研究确定。J 注射剂使用的辅料、附加剂质量要求与其它剂型不同，必须符合药用标准。13 辅料：氯化钠、葡萄糖、甘露醇等。附加剂：渗透压调
6、节剂、增溶剂（如吐温80、PVP、聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸酯35等）、抗氧剂（亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、半光胺酸等）、金属螯合剂（依地酸二钠、依地酸钠钙）等。静脉注射用注射剂不得添加抑菌剂。辅料和附加剂14 常见问题：附加剂的使用依据不足，未提供附加剂选择的试验研究资料。如：依地酸二钠的使用、聚氧乙烯蓖麻油的使用、PVP的使用等。由于依地酸二钠可与钙离子结合成可溶的络合物引起钙的减少，静脉制剂中使用依地酸二钠会导致血钙下降，因此，需密切关注和严格控制静脉给药制剂中依地酸二钠的用量。辅料和附加剂15根据不同的处方组成、工艺路线，建立多个关键工序的工艺参数及相关的检测数据，注意建立中间体的内控质量标准，
7、包括定性和定量指标，注意转移率，确保最终产品的质量稳定。常见问题：申报资料中往往忽视建立中间体质量控制方法，导致终产品的质量不稳定。16 注射剂的常规检查 特殊检查：色泽、pH值、蛋白质、鞣质、炽灼残渣、重金属、砷盐、草酸盐、树脂、钾离子、澄明度、热原、不溶性微粒、溶血与凝聚、刺激性、异常毒性、过敏反应、有机溶剂残留量等检查。17 鞣质的检查：产生沉淀和疼痛，必须除尽鞣质。检查方法：一般采用1%鸡蛋清法或明胶氯化钠溶液法，不得出现浑浊或沉淀。注意：含有聚山梨脂、聚乙二醇及含聚氧乙烯基物质的注射液，虽有鞣质也不产生沉淀，对这类注射液应取未加辅料前的半成品进行检查。如含有吐温80的鞣质检查会出现假
8、阴性。含丹酚酸鞣质的检查会出现假阳性。18 重金属、砷盐检查：注射剂中规定“配制注射剂前的半成品，应检查重金属、砷盐，除另有规定外，含重金属不得过百万分之十（附录 E第二法）；含砷盐不得过百万分之二（附录 F第一法）。本检查项须进行有机破坏”。常见的问题：砷盐检查时未进行有机破坏或未加固化剂，不能真实反映砷盐含量。建议大容量输液剂应进行研究，降低含量限度。19 草酸盐检查：要求中药注射剂中不得检出。钾离子：含量一般应控制在20-40mg/100ml。树脂：规定不得检出。炽灼残渣：应不得过1.5%（g/ml）。总固体量测定：注射剂的总固体量是反映所含有效成分、杂质和辅料含量的指标。建议研究制定其
9、含量幅度范围，以保证产品所含物质的相对稳定。20 溶血试验、刺激性试验、过敏试验考察：通过动物试验，考察注射剂可能产生的溶血、可能产生的肌肉或血管刺激性或可能产生的过敏反应，根据试验结果决定是否将刺激性试验、过敏试验列入质量标准。溶血试验列入质量标准。异常毒性：注射液一般需要进行异常毒性试验，视结果决定是否列入质量标准。21 热原和无菌的检查：目前较常用的方法家兔发热试验法（药典方法）和鲎试验法。注射剂不得含有热原，也绝对不允许含任何活细菌，必须达到无菌要求。澄明度和不溶性微粒检查：应符合规定。22 有机溶剂残留量的检测：注射剂的制备工艺过程中使用的有机溶剂，如：醋酸乙酯、正丁醇、氯仿等应除尽
10、，并要对有机溶剂残留量进行研究，建立检测方法，列入质量标准中，规定不得检出。23 鉴别研究：鉴别研究：原则上应对处方中各药味进行鉴别研究，原则上应对处方中各药味进行鉴别研究，选定专属、灵敏、快速、简便、重现选定专属、灵敏、快速、简便、重现性好的方法作为鉴别项目，列入质量性好的方法作为鉴别项目，列入质量标准。标准。24 基本要求：应建立方中药材、半成品和成品基本要求：应建立方中药材、半成品和成品的含测方法和含量幅度。的含测方法和含量幅度。以有效部位为组份的注射剂，所测定有效部以有效部位为组份的注射剂，所测定有效部位的含量应不少于总固体量的位的含量应不少于总固体量的70%（静脉用（静脉用不少于不少
11、于80%）。调节渗透压等的附加剂应按）。调节渗透压等的附加剂应按实际加入量扣除。实际加入量扣除。以净药材为组份配制的注射剂，所测定成分以净药材为组份配制的注射剂，所测定成分的总含量应不低于总固体量的的总含量应不低于总固体量的20%（静脉用（静脉用不少于不少于25%）。）。25 以有效成分或有效部位为组份的注射剂含量以有效成分或有效部位为组份的注射剂含量均以标示量的上下限范围表示；以药材为组均以标示量的上下限范围表示；以药材为组份的注射剂含量建议以含量幅度表示。份的注射剂含量建议以含量幅度表示。含有毒性药味时，必须制定有毒成分的限量含有毒性药味时，必须制定有毒成分的限量范围。范围。对含量测定方法
12、的研究除理化方法外，也可对含量测定方法的研究除理化方法外，也可采用生物测定法或其它方法。采用生物测定法或其它方法。组份中含有化学药品的，应单独测定该化学组份中含有化学药品的，应单独测定该化学药品的含量，由总固体内扣除，不计算在含药品的含量，由总固体内扣除，不计算在含量测定的比例数内。量测定的比例数内。26 注射剂中的辅料，如：葡萄糖，氯化钠、注射剂中的辅料，如：葡萄糖，氯化钠、甘露醇等应建立辅料的含量测定方法，甘露醇等应建立辅料的含量测定方法，列入质量标准。列入质量标准。以葡萄糖为辅料的，同时要控制药品中以葡萄糖为辅料的，同时要控制药品中5-羟甲基糠醛的含量，列入质量标准。羟甲基糠醛的含量，列
13、入质量标准。因为因为5-HMF5-HMF是葡萄糖等单糖化合物在高是葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下脱水产生的一个醛类温或弱酸等条件下脱水产生的一个醛类化合物，对人体横纹肌和内脏有损害。化合物，对人体横纹肌和内脏有损害。同时，它也代表葡萄糖的分解程度。同时，它也代表葡萄糖的分解程度。27 大分子动物蛋白注射剂临床不良反应是常见大分子动物蛋白注射剂临床不良反应是常见的，只是发生时间、程度不一。的，只是发生时间、程度不一。中药中含动物蛋白的注射剂，要考虑工艺中中药中含动物蛋白的注射剂，要考虑工艺中必须严格去除杂质蛋白，并在质控项目中加必须严格去除杂质蛋白，并在质控项目中加以检测和控制。应从所用
14、动物原料开始控制，以检测和控制。应从所用动物原料开始控制，动物腐败会产生致敏物质。建议建立所用动动物腐败会产生致敏物质。建议建立所用动物原料（如活性单位、贮存条件等）、中间物原料（如活性单位、贮存条件等）、中间体质量标准（如比活及杂质控制）。对其提体质量标准（如比活及杂质控制）。对其提取工艺、质量标准与稳定性试验均应采用适取工艺、质量标准与稳定性试验均应采用适宜生物活性控制，不能仅以蛋白质含量高低宜生物活性控制，不能仅以蛋白质含量高低作指标。作指标。28 对分离所得蛋白（包括主成分及其他活性成对分离所得蛋白（包括主成分及其他活性成分）的组成、结构如氨基酸组成、分子量分）的组成、结构如氨基酸组成
15、、分子量（至少二个以上方法）、等电点都应有相应（至少二个以上方法）、等电点都应有相应的资料确证和阐明；并使各组分在批与批间的资料确证和阐明；并使各组分在批与批间具有一致性。具有一致性。根据各品种主成分的结构及自身分子量，以根据各品种主成分的结构及自身分子量，以确定分子量范围及大分子限度确定分子量范围及大分子限度.必要时将动物致敏试验列入质量标准。必要时将动物致敏试验列入质量标准。29 含有多糖的中药注射剂，要研究明确多大分含有多糖的中药注射剂，要研究明确多大分子量范围的是有效的多糖，并尽可能地进行子量范围的是有效的多糖，并尽可能地进行分离纯化，建立定性、定量的质量控制方法，分离纯化，建立定性、
16、定量的质量控制方法，如分子量分布，指纹图谱、含量测定等，制如分子量分布，指纹图谱、含量测定等，制定专属性质控方法。定专属性质控方法。常见的问题是未明确有效多糖组分的分子量，常见的问题是未明确有效多糖组分的分子量，或未进行分子量的分布研究，分离纯化不够，或未进行分子量的分布研究，分离纯化不够，分子量分布过于宽泛，从十几万到几十万，分子量分布过于宽泛，从十几万到几十万，建立的定性、定量方法专属性差等。建立的定性、定量方法专属性差等。30 建立指纹图谱的意义：中药发挥疗效的物质基础是其建立指纹图谱的意义：中药发挥疗效的物质基础是其化学成分。由于中药的复杂性，对所含的大多数成分化学成分。由于中药的复杂
17、性，对所含的大多数成分进行定量控制几乎是不可能，通过指纹图谱研究，希进行定量控制几乎是不可能，通过指纹图谱研究，希望能对全成分进行定性控制，表达所含物质的稳定，望能对全成分进行定性控制，表达所含物质的稳定，达到批间质量的稳定。为加强中药注射剂的质量，以达到批间质量的稳定。为加强中药注射剂的质量，以保证中药注射剂批间质量的一致性。保证中药注射剂批间质量的一致性。国家药品监督管理局在国家药品监督管理局在2001年初颁发了年初颁发了关于加强关于加强中药注射剂管理有关事宜的通知中药注射剂管理有关事宜的通知，要求中药注射剂，要求中药注射剂所用的中药材，在固定产地的前提下，制定指纹图谱。所用的中药材，在固
18、定产地的前提下，制定指纹图谱。并于并于2001年年8月份颁发了月份颁发了中药注射剂指纹图谱研究中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）的技术要求（暂行）。31 指纹图谱的基本要求指纹图谱的基本要求 指纹图谱是对中药注射剂进行定性质量控制的方法之指纹图谱是对中药注射剂进行定性质量控制的方法之一。要求所用药材在固定中药材品种、产地的前提下，一。要求所用药材在固定中药材品种、产地的前提下，制定中药材、有效部位或中间体、成品的指纹图谱。制定中药材、有效部位或中间体、成品的指纹图谱。指纹图谱供试品的制备应根据注射剂、有效部位或中指纹图谱供试品的制备应根据注射剂、有效部位或中间体中所含化学成分的理化性质和
19、检测方法的需要，间体中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。必须确保该注射剂、有效选择适宜的方法进行制备。必须确保该注射剂、有效部位或中间体主要化学成分在指纹图谱中的再现部位或中间体主要化学成分在指纹图谱中的再现”。需要根据具体情况，在深入研究的基础上，对所含的需要根据具体情况，在深入研究的基础上，对所含的各类成分进行控制，建立多张指纹图谱。各类成分进行控制，建立多张指纹图谱。32 常见问题：常见问题：未针对各类成分建立多张指纹图谱，大多数未针对各类成分建立多张指纹图谱，大多数只一张指纹图谱，不能反映产品所含成分的只一张指纹图谱，不能反映产品所含成分的全貌。全貌。未分析药材、中间体和成品的相关性未分析药材、中间体和成品的相关性 成品中的色谱峰较少，不能客观地控制所含成品中的色谱峰较少，不能客观地控制所含成分。成分。未进行充分的方法学研究。未进行充分的方法学研究。案例：案例：33药材实施GAP34小结3536
