医学课件产前诊断中绒毛脐血羊水取样及标本培养.ppt

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1、产前诊过染色体病患者;n夫妇任一方为单基因病患者;n曾生育过单基因病患者;n有不明原因的自然流产史、畸胎史、死产或新生儿死亡史;产前诊触致畸因素;n孕妇年龄大于35岁;n有遗传病家族史的近亲婚配的夫妇。n产前筛查高风险的孕妇n超声胎儿结构筛查胎儿有结构异常的孕妇产前诊entesis)n绒毛穿刺取样(chorion villus sampling,cvs)n脐带血取样(periumbilical cord blood sampling,PUBS)n植入前诊断(preimplantaton genetic diagnosis,PGD)产前诊(fetoscope)n胚胎镜(embryoscope)n

2、胎儿超声波图象(fetal ultrasound imaging)n母体外周血胎儿细胞检测(cell-storing)绒毛穿刺东医院首次问世(经宫颈盲吸法,准确率95%,自然流产率9.3%,出生婴儿未发现异常)n莫斯科产科研究所(超声引导下经宫颈吸样)n1983您Ward 和Brambati 分别于英国和意大利发表文章介绍绒毛取样及核型分析绒毛穿刺取CVS并发centesis高n经宫颈和经腹取样安全性相同(Jackson,1992)n多胎取样高于单胎取样(Pergament,1992)CVS并发合性资料认为CVS与LRD无关(216,381例CVS中115例出现LRD发生率1:1881,总的人

3、群发生率1:1642)n世界各地相关资料综合,9周以下CVS出现LRD的机会高,但原因尚不清楚nCVS不应在小于孕10周的条件下进行羊膜腔穿刺部位的出血、血肿羊穿并发症-try 报道流产率3.5%n1986年,Tabor et al 报道流产率1.7%n1995年,Bombard et al 报道流产率1.3%n2000年,Antsaklis 报道流产率2.1%脐带血穿胱镜在中期妊娠孕妇行子宫切开术插入羊膜腔,获取脐血标本。n1979年,Rodeck和Campell应用胎儿镜行脐带血管穿刺,但由于并发症高,应用受到限制。n1983年,Ternand Daffos超声引导下经皮脐血管穿刺取血(C

4、ordocentesis)脐带血穿ml对胎儿循环无不良影响脐带血穿R、羊水或绒毛细胞培养失败、羊水或绒毛培养结果为嵌合体、非免疫性胎儿水肿、脆性X综合症等)n胎儿血液疾病分析(血型、血小板计数等)n胎儿感染(弓形虫、病毒感染等)n胎儿情况评估(酸碱平衡、甲功等)n遗传性疾病(单基因病、凝血障碍、血红蛋白病、代谢性疾病等)n胎儿治疗(宫内输血、宫内药物治疗等)脐带血穿胎心减慢n宫内感染n胎儿丢失(流产、早产)n大多数并发症为短暂性和非致命性脐带血穿刺并胎儿超声结构筛查示正常超声者脐穿的流产率为1%(1/76);异常超声者流产率为7%(5/76);胎儿结构明显异常者流产率为25%(9/36)nAn

5、tsaklis 1998年报道胎儿超声结构筛查示正常超声者脐穿的流产率1%(2/191);异常超声者流产率为13%(11/84)脐血穿刺r-Betke试验:胎儿红细胞在酸中稳定nAPT试验:NaOH中胎儿血为粉红色n有核红细胞的出现绒毛组养)绒毛组织的染色较高的有丝分裂活性,能提供足以分析的良好有丝分裂相,较绒毛培养简易可靠、操作简单快速绒毛组织的染色g/ml,可一次加,也可分次少量加)n37OC 5%CO2培养箱培养45分钟n低渗(1%枸橼酸钠低渗10分钟或1%枸橼酸钠和0.075mol/l 1:1低渗40分钟)n预固定(甲醇:冰醋酸3:1)10分钟n固定(甲醇:冰醋酸3:1)10-20分钟

6、n冰醋酸解离绒毛细胞(轻吹打)n制片绒毛组织的染色体入培养瓶(25ml培养瓶每瓶10mg)n加特定培养液3mln培养3-6天n收获(加秋素、低渗、固定、制片)绒毛组织的染色体小块n加0.25%+0.02%EDTA 5ml 37OC 摇床中20分钟n加培养基终止消化,离心后弃上清加培养基接种培养5-10天n收获羊水细胞培胞(密集型上皮样细胞-E细胞、镰刀样上皮细胞、圆形上皮细胞)n羊水样细胞(AF细胞)羊水细胞培羊水细胞培养中存在的问题有透明透亮的圆形细胞)n滚圆的细胞与有丝分裂的圆形细胞鉴别n操作应轻柔,胰酶消化法要掌握好胰酶消化的时间n羊水中胎脂多时3-5天可轻轻动一动,减少胎脂贴壁占据空间n低渗时间短于外周血(一般3-5分钟)Thanks!

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