1、磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用和临床应用磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用1肝癌的发病情况 近年来，全球肝癌发病率明显升高，每年全世界近年来，全球肝癌发病率明显升高，每年全世界新增病例超过新增病例超过100100万人。万人。肝癌的死亡率仅次于胃癌、食道癌而居于第三位。肝癌的死亡率仅次于胃癌、食道癌而居于第三位。由于乙肝病毒感染仍没有得到有效控制，肝癌发由于乙肝病毒感染仍没有得到有效控制，肝癌发病率仍呈上升势头，我国年发病率高于病率仍呈上升势头，我国年发病率高于10/1010/10万，万，每年死于肝癌约每年死于肝癌约1111万人，占全世界肝癌死亡人数
2、万人，占全世界肝癌死亡人数的的4545。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用2肝癌的治疗情况 肝癌治疗首选手术，但肝癌初诊时约肝癌治疗首选手术，但肝癌初诊时约80%80%失去手术机会，治疗理失去手术机会，治疗理念是综合治疗。念是综合治疗。肝癌的非手术治疗在延长肝癌患者生命，改善生活质量方面起了肝癌的非手术治疗在延长肝癌患者生命，改善生活质量方面起了非常重要的作用。如微波、氩氦刀、射频消融、无水酒精注射非常重要的作用。如微波、氩氦刀、射频消融、无水酒精注射(PEIT)(PEIT)以及经导管肝动脉化疗栓塞术（以及经导管肝动脉化疗栓塞术（TACETACE）。）。TACETACE被国内外多数学者列
3、为非手术治疗的首选。（被国内外多数学者列为非手术治疗的首选。（5 year OS 5-5 year OS 5-15%15%）磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用3现有TACE存在的不足大多数肿瘤不能完全坏死大多数肿瘤不能完全坏死,需多次治疗。需多次治疗。不可避免会对正常的肝实质带来损害不可避免会对正常的肝实质带来损害,加重肝功能损伤加重肝功能损伤,促进肝硬化促进肝硬化,影响影响患者的生活质量及生存期。患者的生活质量及生存期。另外，现代肿瘤治疗存在的问题还有：另外，现代肿瘤治疗存在的问题还有：1.1.化疗选择性小化疗选择性小,体内代谢快、有效期短、对增殖快的正常组织也有毒体内代谢快、有效期短
4、、对增殖快的正常组织也有毒性：心脏毒性、骨髓抑制等。性：心脏毒性、骨髓抑制等。2.2.基因及肿瘤疫苗治疗缺乏有效导入载体，缺乏监测效能的方法。基因及肿瘤疫苗治疗缺乏有效导入载体，缺乏监测效能的方法。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用4载药纳米粒生物技术 定义：运用某种具有特殊亲和力的载体（纳米粒）将药物定向定义：运用某种具有特殊亲和力的载体（纳米粒）将药物定向输送到靶器官来发挥作用。输送到靶器官来发挥作用。特点：特点：1.1.特异靶向性。特异靶向性。2.2.毒副作用小。毒副作用小。3.3.疗效高：纳米粒尺度下降疗效高：纳米粒尺度下降3 3个数量级，其表面积提高个数量级，其表面积提高6 6
5、个数量级个数量级(100(100万倍万倍)，即疗效提高，即疗效提高100100万倍万倍。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用5聚乳酸纳米粒(polylactic acid,PLA)聚乳酸纳米粒：直径聚乳酸纳米粒：直径1010500 nm500 nm的固态胶体粒子的固态胶体粒子,无毒、可生无毒、可生物降解物降解,并有适当的粒形与粒径并有适当的粒形与粒径,以及有较长的体内循环时间以及有较长的体内循环时间和具有较高的载药量及药物包封率等优点。和具有较高的载药量及药物包封率等优点。1.1.150nm150nm的颗粒可躲避肝的颗粒可躲避肝kufoukufou细胞的吞噬，通过其靶向性杀伤癌细胞。细胞的
6、吞噬，通过其靶向性杀伤癌细胞。2.2.而较大颗粒通过肝动脉被肝而较大颗粒通过肝动脉被肝kufoukufou细胞吞噬，并聚集于肿瘤中持续释放细胞吞噬，并聚集于肿瘤中持续释放药物。药物。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用6载药纳米粒磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用7研究目的及意义 1.1.初步探讨阿霉素纳米制剂对肝癌细胞的杀伤作用，从而寻求提初步探讨阿霉素纳米制剂对肝癌细胞的杀伤作用，从而寻求提高治疗肝癌的新药。高治疗肝癌的新药。2.2.为其他抗肿瘤药物、基因及其他生物治疗的活体为其他抗肿瘤药物、基因及其他生物治疗的活体MRIMRI监测奠定监测奠定基础。基础。3.3.为以纳米粒为载体
7、的新一代化疗药物及基因治疗载体的开发提为以纳米粒为载体的新一代化疗药物及基因治疗载体的开发提供实验依据。供实验依据。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用8研究内容和研究试验方法 1.1.纳米粒的制备和鉴定纳米粒的制备和鉴定 。2.2.制备兔肝癌模型制备兔肝癌模型 及及MRI成像成像 。3.3.介入法注射载药微粒入肿瘤内实验。介入法注射载药微粒入肿瘤内实验。4.4.载药微粒成像实验及药物动力学实验载药微粒成像实验及药物动力学实验 。5.5.病理组织学分析与图像分析比较病理组织学分析与图像分析比较 。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用9纳米粒的制备和鉴定 以乳滴聚结法合成小于以乳滴聚结法
8、合成小于500nm500nm的的PLA-Gd-ADM-NPPLA-Gd-ADM-NP，并对其表面进行，并对其表面进行修饰修饰 。体外测定体外测定PLA-Gd-ADM-NPPLA-Gd-ADM-NP的纳米颗粒大小、所包裹的的纳米颗粒大小、所包裹的Gd-DTPAGd-DTPA浓度浓度和阿霉素药量和包封率及释放规律和阿霉素药量和包封率及释放规律 。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用10制备兔肝癌模型 及MRI成像 制备：制备：CTCT引导下经皮穿刺建立改良兔引导下经皮穿刺建立改良兔VX2 VX2 肝癌模型肝癌模型 。成像：动物线圈实验兔肝癌模型成像：动物线圈实验兔肝癌模型MRIMRI成像，记录
9、肿瘤内部信号、成像，记录肿瘤内部信号、大小情况等。大小情况等。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用11介入法注射载药微粒入肿瘤内实验 采用经肝动脉插管法将采用经肝动脉插管法将PLA-Gd-ADM-NPPLA-Gd-ADM-NP混悬液、混悬液、Gd-DTPAGd-DTPA、阿霉素、阿霉素溶液、生理盐水等四种成分，注射入随机分组的兔肝癌内。溶液、生理盐水等四种成分，注射入随机分组的兔肝癌内。采用同法将采用同法将PLA-Gd-ADM-NPPLA-Gd-ADM-NP混悬液注射到正常兔肝动脉内。混悬液注射到正常兔肝动脉内。每组各每组各1515只，途中若有以外死亡，则给以增补。只，途中若有以外死亡，则
10、给以增补。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用12载药微粒成像实验及药物动力学实验 A A 常组、注射常组、注射PLA-Gd-ADM-NPPLA-Gd-ADM-NP混悬液肝癌组、注射阿霉素肝癌组分别在注射混悬液肝癌组、注射阿霉素肝癌组分别在注射术后外周静脉采血术后外周静脉采血1ml,1ml,通过反相高效液相色谱检测药物浓度，监测药代动力通过反相高效液相色谱检测药物浓度，监测药代动力学。学。B B 常组、注射常组、注射PLA-Gd-ADM-NPPLA-Gd-ADM-NP混悬液肝癌组每组选取混悬液肝癌组每组选取5 51010只以只以MRIMRI分别在术分别在术后后1d1d、3d3d、5d5d、
11、7d7d、14d14d、21d21d观察记录溶液在肿瘤内分布、信号变化情况，观察记录溶液在肿瘤内分布、信号变化情况，重点观察肝癌内和正常肝组织的分布。重点观察肝癌内和正常肝组织的分布。C C 每组各每组各5 51010只分别于术后只分别于术后1d1d、3d3d、5d5d、7d7d、14d14d、21d21d行行MRIMRI检查观察肿检查观察肿块的坏死情况。块的坏死情况。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用13病理组织学分析与图像分析比较 在成像之后，将在成像之后，将5 5组各随机各分组各随机各分3 3小组，每小组各小组，每小组各5 5只，分别在治只，分别在治疗后的疗后的1 1、2 2、3
12、3周再次行周再次行MRIMRI成像后记录肿瘤内信号、大小变化情成像后记录肿瘤内信号、大小变化情况，随即处死动物，取肿瘤标本进行病理组织学分析，分析肿块况，随即处死动物，取肿瘤标本进行病理组织学分析，分析肿块大小、细胞坏死情况，对比分析大小、细胞坏死情况，对比分析MRIMRI监测纳米粒在肿瘤代谢规律监测纳米粒在肿瘤代谢规律及作用情况，评价及作用情况，评价MRMR成像的效果和价值及治疗情况。成像的效果和价值及治疗情况。采用免疫组化检测肿瘤残存细胞，检测采用免疫组化检测肿瘤残存细胞，检测VEGFVEGF、PCNAPCNA等指标。等指标。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用14项目的特色和创新之处 本研究利用聚乳酸接枝聚乳酸共聚物本研究利用聚乳酸接枝聚乳酸共聚物,制备负载制备负载阿霉素和阿霉素和GdGdDTPADTPA的纳米微粒。的纳米微粒。活体活体MRIMRI监测：监测：1.1.研究该药在肝癌中的药物动力学。研究该药在肝癌中的药物动力学。2.2.抗肿瘤效能监测。抗肿瘤效能监测。3.3.为其他抗肿瘤药物、基因及其他生物治疗的活体为其他抗肿瘤药物、基因及其他生物治疗的活体MRIMRI监监测奠定基础测奠定基础。磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用15谢谢 谢！谢！磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发及临床应用16
