1、腹泻症候群病原学监测流程监测哨点的设置:兼顾 综合医院、社区/卫生院、儿童医院 腹泻监测的“哨点前移”问题监测整体流程 2病例收集与个案调查因急性腹泻就诊病例的无差别纳入问卷调查直接关系到数据质量 问卷回答的完整性 问卷回答的准确性3实验室检测类别病原体名称检测方法细菌沙门菌 Salmonella分离分离培养培养志贺菌 Shigella致泻性大肠埃希菌 diarrheogenic Escherichia coli肠粘附聚集性大肠埃希菌 EAggEC肠致病性大肠埃希菌 EPEC肠产毒性大肠埃希菌 ETEC肠侵袭性大肠埃希菌 EIEC产志贺毒素大肠埃希菌 STEC致病性弧菌 Pathogenic
2、Vibrio霍乱弧菌 Vibrio cholera副溶血弧 Vibrio parahaemolyticus河弧菌 Vibrio fluvialis拟态弧菌 Vibrio mimicus耶尔森菌 Yersinia小肠结肠炎耶尔森菌 Yersinia enterocolitica假结核耶尔森菌 Yersinia pseudotuberculosis弯曲菌 Campylobacter空肠弯曲菌 Campylobacter jejuni结肠弯曲菌 Campylobacter coli嗜水气单胞菌 Aeromonas hydrophila类志贺邻单胞菌 Plesimonas shigelloides病毒
3、轮状病毒 Rotavirus核酸核酸检测检测诺如病毒 Norovirus札如病毒 Sapovirus星状病毒 Astrovirus腺病毒 Adenovirus4多病原实验室检测策略接种沙门菌科接种沙门菌科玛嘉显色培养玛嘉显色培养基或基或SS,37培养过夜培养过夜挑取可疑菌落挑取可疑菌落接种接种KIA、MIUONPG ONPG O O、H血清学鉴血清学鉴定定(H-II(H-II相诱相诱导导沙门菌沙门菌APWAPW增菌增菌6h6h接种接种TCBS、庆大霉素琼脂庆大霉素琼脂和血琼脂平板和血琼脂平板,37培养过夜培养过夜氧化酶试验氧化酶试验KIAKIA、MIU粘丝试验等粘丝试验等系统生化鉴定系统生化鉴
4、定血清分型血清分型霍乱霍乱弧菌弧菌副溶血弧菌副溶血弧菌河弧菌河弧菌拟态弧菌拟态弧菌嗜水气单胞菌嗜水气单胞菌类志贺邻单胞类志贺邻单胞菌菌PBS增菌液增菌液增菌增菌10-2010-20天天接种接种CIN平板平板,25培养培养24-48h挑取挑取“公牛眼公牛眼”状菌落接种改状菌落接种改良克氏双糖、良克氏双糖、尿素培养基及尿素培养基及半固体半固体A/A/A/A/无无气气、HsS-、Ure+Ure+API20EAPI20E系统生系统生化鉴定化鉴定小肠结肠炎耶小肠结肠炎耶尔森菌尔森菌假结核耶尔森假结核耶尔森菌菌志贺菌志贺菌直接接种直接接种Karmali和和Skirrow平板平板,42培养培养2-32-3天
5、天挑取可疑菌落挑取可疑菌落接种接种KIA、MIU,37培培养过夜养过夜K/A/K/A/气气 HsS-M M/I/I/U-/U-氧化酶氧化酶血清分群血清分群挑取可疑菌落挑取可疑菌落接种接种KIA、MIU,37培培养过夜养过夜生化符合大肠生化符合大肠菌株多重菌株多重PCR检测检测毒力基因毒力基因G G染色染色氧化酶氧化酶触酶触酶马尿酸盐试验马尿酸盐试验EAggECEAggECEPECEPECETECETECEIECEIECSTECSTEC空肠弯曲菌空肠弯曲菌结肠弯曲菌结肠弯曲菌多重多重PCR鉴定鉴定提取提取DNA或或RNA进行进行PCR或或RT-PCR轮状病毒轮状病毒诺如病毒诺如病毒札如病毒札如病
6、毒星状病毒星状病毒腺病毒腺病毒腹泻病人新鲜粪便腹泻病人新鲜粪便SBG增菌增菌16h生化生化鉴定鉴定直接接种直接接种SSSS或或MACMAC平板,平板,37培养过夜培养过夜直接接种直接接种MACMAC平平板,板,3737培养培养过夜过夜5监测网络:国家CDC中心实验室 省/地市县CDC检测实验室 哨点医院收集病例 调查采样病原学监测网络实验室三级辐射网络模式三级辐射网络模式6质量控制1.采用统一的研究设计和技术方案,保证不同监测省份间的一致性;2.对病例收集、个案调查、实验室检测与信息系统操作进行统一的人员技术培训;3.对数据录入的及时性与准确性进行考核;在信息管理系统的录入环节中设置逻辑校验,
7、每季度对录入对数据进行10%的符合抽查;4.对于各个检测实验室,每年发放盲样考核标本,对各监测实验室检测能力进行考核。7腹泻病例一般特征特征构成比(%)性别男59.95女40.05年龄036.33(岁)115.08 27.57 5 4.53 155.55 257.78 356.09 455.88 555.35 655.838腹泻病例发病时间分布9各病原体总体检出率各病原体总体检出率单个病原检出率单个病原检出率=100%100%检出该种病原检出该种病原的病例数的病例数进行该种病原进行该种病原检测的检测的全部全部病例数病例数PathogenPositive rate(%)VirusRotaviru
8、s15.90Norovirus 14.44Sapovirus6.14Astrovirus5.44Adenovirus3.30BacteriaDiarrheogenic Escherichia coli7.13EAggECAggEC2.61EPECEPEC2.04ETECTEC1.28EIECEIEC0.70STEC0.51Salmonella4.63Shigella3.89S.Flexneri 2.61S.Sonnei1.15S.dysenteriae0.09S.boydii0.05Aeromonas hydrophila1.02Vibrio0.98Yersinia0.42Plesimonas
9、 shigelloides0.26Campylobacter0.2610细菌性病原体检出率时间分布11病毒性病原体检出率时间分布12 病毒病毒 细菌细菌轮状病毒轮状病毒诺如病毒诺如病毒札如病毒札如病毒星状病毒星状病毒腺病毒腺病毒致泻性大肠埃希菌致泻性大肠埃希菌3454101220沙门菌沙门菌1223163志贺菌志贺菌16002致病性弧菌致病性弧菌31000耶尔森菌耶尔森菌00000弯曲菌弯曲菌10000嗜水气单胞菌嗜水气单胞菌05021类志贺邻单胞菌类志贺邻单胞菌01000多病原混合感染细菌沙门菌志贺菌致病性弧菌耶尔森菌弯曲菌嗜水气单胞菌类志贺邻单胞菌致泻性大肠埃希菌5161942152沙门菌
10、12412122志贺菌411150致病性弧菌1121耶尔森菌000弯曲菌02嗜水气单胞菌0病毒诺如病毒札如病毒星状病毒腺病毒轮状病毒112253341诺如病毒95164札如病毒1019星状病毒2213病原体感染的影响因素多因素分析 非条件Logistic回归因变量:病原体检测自变量:性别、年龄、发病季节病毒性腹泻感染风险病毒性腹泻感染风险:v 无性别差异无性别差异v 低龄低龄儿童风险高儿童风险高 (杯状病毒不明显)(杯状病毒不明显)v 季节差异相对复杂季节差异相对复杂14病原体感染的影响因素15病原体感染与临床特征的关联 粪便性状:水样便、粘液便、血便、稀便v发热发热v呕吐呕吐v便常规检验:白
11、细胞阳性、红细胞阳性便常规检验:白细胞阳性、红细胞阳性16病原体感染与临床特征的关联进行全部病原种类检测的病例病原检测阳性组与病原检测阴性组,比较两组症状发生率的差异病原体粪便性状发热呕吐白细胞红细胞水样便 粘液便血便稀便病毒 轮状病毒诺如病毒札如病毒星状病毒 腺病毒 细菌 EAggEC EPEC ETEC EIEC STEC 沙门菌志贺菌 致病性弧菌 耶尔森菌弯曲菌 嗜水气单胞菌类志贺邻单胞菌 175岁以下婴幼儿与18岁以上成人病原体阳性率比较 婴幼儿:5岁 成 人:18岁185岁以下婴幼儿与18岁以上成人细菌性病原谱比较志贺菌血清群构成志贺菌血清群构成五类致泻性大肠埃希菌构成五类致泻性大肠
12、埃希菌构成婴幼儿:婴幼儿:EAggECEAggEC成人:成人:ETECETEC19城乡细菌性病原谱比较 大型城市病例 中小城镇/城乡过渡地区病例 农村病例20城乡细菌性病原谱比较志贺菌血清群构成志贺菌血清群构成细菌性腹泻病原谱构成细菌性腹泻病原谱构成21城乡城乡细菌细菌性腹泻性腹泻病原谱比较病原谱比较大型城市、城乡过渡带、传统农村经济发展水平与卫生发展水平的不均横“精准化防治”传统农村:发展中或欠发达水平 病原谱:与其他发展中国家相似:南亚、非洲 整体卫生条件的改善大型城市:较发达 病原谱:与欧美国家类似 个体行为方式的改善城乡过渡带:中国特色,发展水平参差 首先要保证卫生条件的维持与改善22
13、腹泻症候群病原谱监测致泻性大肠杆菌、沙门菌是整体上最重要致泻病原菌城乡差异巨大:农村志贺菌:环境卫生 城市小肠结肠炎耶尔森菌、弯曲菌:小病种、大危害STEC:非O157、stx2+、症状较轻、低龄婴幼儿临床诊断与病原学诊断:细菌性痢疾:志贺、沙门、小肠结肠炎耶尔森菌病原学实验室检测技术的加强:是没有病例?还是没有检出?23感染性腹泻监测的有益补充在症候群病原学监测之前1.法定传染病报告 甲类:霍乱;乙类:细菌性痢疾与阿米巴痢疾;丙类:其他感染性腹泻临床医院报告覆盖面大、时效性相对较好与医务人员的主观积极性有关临床诊断为主,病原学诊断较少相对陈旧的诊断标准:感染性腹泻诊断标准(WS271-2007)“痢疾”:shigellosis?dysentery?MAXP75P50P25MIN121324364142321911577424感染性腹泻监测有益补充2.重点传染病监测(病原学监测)霍乱(18省18点)细菌性痢疾(10省20点)肠出血性大肠杆菌感染(4省9点)小肠结肠炎耶尔森菌病(5省9点)病毒性腹泻(五种病毒)细菌性腹泻:单病种监测监测点有限重视的是对检出菌株的分析疾控基本工作外的重要补充:课题性质的监测研究25