1、1会计学芳酸类非甾体抗炎药物的分析江西大学芳酸类非甾体抗炎药物的分析江西大学杭太俊药物分析件杭太俊药物分析件OOHORR(水杨酸类)OHOHO(水杨酸)(Salicylic Acid)OOHOCH3O(阿司匹林)(Aspirin)OOHOOOH(双水杨酯)(Salsalate)FFOHOHO(二氟尼柳)(Difunisal)OHNOCH3CH3甲芬那酸HMefenamic AcidOHNORH邻氨基苯甲酸类酸性酸性光谱特性NROORH邻氨基苯乙酸类NNaOOClClH双氯芬酸钠Diclofenac Sodium酸性酸性光谱特性基团特性RRCH3HOO芳基丙酸类CH3HOOCH3CH3布洛芬Ib
2、uprofenCH3HOOO酮洛芬KetoprofenCH3HOOOCH3萘普生Naproxen酸性NOOH3CHOCH3ClO吲哚美辛 IndometacinNRRCH3OHO吲哚乙酸类酸性光谱特性NSOHCH3NROOOH苯并噻嗪甲酸类NSOHCH3NOONOH吡罗昔康 PiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam水解光谱特性NO2HNSCH3OOO尼美利舒 NimesulideHONCH3OH对乙酰胺基酚 Paracetamol其它非甾体类抗炎药水解光谱特性OHOHOOOOFeOH+FeCl3+H2O+3HCl紫堇色一、与三氯化铁反应显色阿司匹林：紫堇
3、色双水杨酯：紫色二氟尼柳：深紫色均通过产生水杨酸与三氯化铁反应显色水杨酸反应HONCH3OH对乙酰胺基酚 ParacetamolFeCl3+Fe1/3ONCH3OH+HCl蓝紫色NSOHCH3NOONOH吡罗昔康 PiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam显玫瑰红色显淡紫色酚羟基反应CH3HOOO酮洛芬+NHNO2NO2NH2CH3HOONNO2NNO2橙红色H2SO4-H2OH二苯甲酮结构NHCOCH3HO+HCl+H2ONH2HOHCl+CH3COOHN2ClHO+2H2ONH2HOHClHNO2+N2ClHO+OHNaOHOHNNOH红色偶氮化合物水
4、解反应产生芳伯胺芳伯胺重氮化偶合反应重氮化重氮化-偶合反应偶合反应OCOCH3COONHCOCH3+3H2OHCl贝诺酯HONH2HCl+OHCOOHNaNO2,2HClHON2+Cl-OHNaOHOHNNOH橙红色(三三)氧化反应氧化反应甲芬那酸H2SO4深蓝色(O)K2Cr2O7并产生绿色荧光随即变为棕绿色(四四)水解反应水解反应COOHOCOCH3Na2CO3COONaOHCH3COONa+CO2+H2SO4COOHOHH2SO4CH3COOH阿司匹林白色水杨酸(七七)IR：阿司匹林-COOH-OH-COOHPh-C邻位取代PhN-HO-HN-HPh:C=C芳胺酚供试品保留时间对照品保留
5、时间第三节第三节:特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法一、阿司匹林和双水杨酯生产工艺ONaCO2加压，ONaCOONaOHCOOHH+COOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,7075 C。ASAOH-CO2副产物水杨酸COOHOOOH双水杨酯COOHOHCOOHOHHOOOCOOHOOHOOHCOOHCOOHHOOOCOOHHOCOOHOO+COOHOOOCOOH-+HPLC法淡黄、红棕、深棕色第三节第三节:特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法其它有关物质其它有关物质OH(CH3CO)2OOCOCH3+OCOCH3COOHOCOCH3COO+OHCOOHOHCOO醋酸苯酯水杨酸苯酯乙
6、酰水杨酸苯酯HPLC法二、甲芬那酸中2,3二甲基苯胺的检查第三节第三节:特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法甲芬那酸ClCOOHH3CCH3NH2NHCOOHH3CCH3+CuGC法FFNH2FFCOCH3FFOCOCH3FFOHFFOHCOOHFF+Cu偶联乙酰化(CH3CO)2O,AlCl3氧化H2O2水解OH/H-+羧化CO2,CH3ONaTLCHPLC所谓物质A和物质B的检查是采用自身对照法进行检查的相同药物,不同浓度,相互比较,主点限量萘普生的有关物质检查MeOMeOCH3O酰化羧化MeOOHCH3COOH催化氢化MeOCH3COOH2-萘甲醚6-甲氧基-2-萘乙酮2-羟基-2-(6
7、-甲氧基-2-萘基)丙酸萘普生色谱条件杂质限量二、对乙酰氨基酚中氨基酚和对氯苯乙酰胺第三节第三节:特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法HPLCClNO2NH2HOHONO2HONHCOCH3水解还原酰化ClNHCOCH3一、酸碱滴定法(Acid-base titration method)苯甲酸pKa 4.20水杨酸pKa 2.98酸性较强COHOHO羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性增加；分子内氢键，更增加了其极性直接滴定Aspirin、丙磺舒(Ch.P.BP.JP等)苯甲酸(Ch.P等)均采用本法1.直接滴定法直接滴定法中性乙醇COOHOCOCH3NaOH20以下COONaOCOCH3H2
8、O乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶 液中滴定过程易水解中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性，可消除滴定误差 pKa 36 的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定 pKa 69 的药物要用非水溶液滴定法NSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几乎不溶，在丙酮中微溶。所以乎不溶，在丙酮中微溶。所以CHP使使用用定量过量的氢氧化钠滴定液定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后，溶解后，再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。烯醇式结构:酸性为什么氢氧化钠能溶解之？2.水解后剩余滴定法水解后
9、剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis)OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，缓缓煮沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4USP32-NF27含量%=(V0-V)FTW 100%T=0.5 12180.16=45.04(mg/ml)滴定度滴定度浓度待
10、测物反应系数滴定液物反应系数滴定液物摩尔质量空白反应体积样品测定消耗体积样品称重量3.两步滴定法两步滴定法(Two-step titration)Aspirin片HOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸橼酸Citric acidHOCHCOOHCHCOOHHO酒石酸Trataric acid水解产物水杨酸SAHAc第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc第二步：水解后剩余滴定取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于阿司匹林0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示剂显中性)20ml，振摇使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)
11、至显粉红色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4COONaOCOCH3NaOHCOONaOHNaAc H2O2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O标示量%=WW标示量100%(V0-V)FT空白消耗样测消耗校正因数滴定度片剂规格游离SA偏高游离SA偏高时结果偏高时结果偏高不能完全排出干扰不能完全排出干扰缺点优点操作简便操作简便水杨酸干扰少水杨酸干扰少结果准确，避免游结果准确，避免
12、游离SA及片剂中稳定离SA及片剂中稳定直接滴定法水解后剩余滴定法两步滴定法二、非水溶液滴定法吡罗昔康四、UV1.直接直接UV法法2.离子交换离子交换-UV法法氯贝丁酯在氯贝丁酯在226nm226nm的波长处有最大吸收，但对氯酚等的波长处有最大吸收，但对氯酚等有关物质亦有吸收，干扰有关物质亦有吸收，干扰UVUV法的测定。根据氯贝丁酯法的测定。根据氯贝丁酯为酯结构，不能发生电离，而有关物质可发生酸性解为酯结构，不能发生电离，而有关物质可发生酸性解离的性质差异，采用阴离子交换色谱分离后，采用离的性质差异，采用阴离子交换色谱分离后，采用UVUV法测定。法测定。标示量%=AsCRDWWAR标示量100%
13、3.CPC-UV法法(Column Partition Chromatography)利用固定相酸碱性的不同进行分离利用药物和固定相起化学反应而进行分离利用生成离子对进行层析分离单纯靠选择流动相进行分离200300mm60mm4mm22mm层析柱玻棉压榨棒350mm21mm担体：硅藻土(Celite 545)固定相：一定pH的缓冲水溶液流动相：与水不相混溶的有机溶剂(洗脱前必须先用水饱和)b.ASA测定供试液制备洗脱 5,25mlCHCl3 相继洗脱，弃去CHCl3洗脱 10ml冰HAc-CHCl3(150)*；85ml冰HAc-CHCl3(1100)，并稀释至100ml测定：280nm 空白
14、：CHCl3NaHCO3使ASA和SA成盐保留于柱上 用CHCl3洗脱的目的：去除中性或碱性杂质冰HAc酸化的目的：使ASA游离，易被 CHCl3洗脱RRCH3HOO芳基丙酸类CH3HOOCH3CH3布洛芬IbuprofenCH3HOOO酮洛芬KetoprofenCH3HOOOCH3萘普生Naproxen酸性CH3HOOO酮洛芬+NHNO2NO2NH2CH3HOONNO2NNO2橙红色H2SO4-H2OH二苯甲酮结构2.水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis)OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2N
15、aOH H2SO4 Na2SO4 2H2O取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，缓缓煮沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4USP32-NF273.两步滴定法两步滴定法(Two-step titration)Aspirin片HOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸橼酸Citric acidHOCHCOOHCHCOOHHO酒石酸Trataric acid水解产物水杨酸SAHAc第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc第二步：水解后剩余滴定标示量%=WW标示量100%(V0-V)FT空白消耗样测消耗校正因数滴定度片剂规格
