1、微生物发酵法制备牛骨抗菌肽微生物发酵法制备牛骨抗菌肽的研究的研究汇汇 报报 人：梁严予人：梁严予指导教师：刘丽莉指导教师：刘丽莉专专 业：生物工程业：生物工程研究内容研究内容研究进展研究进展取得成果取得成果后期计划后期计划汇报内容汇报内容一、研究内容一、研究内容微生物发酵法制微生物发酵法制备牛骨抗菌肽备牛骨抗菌肽发酵牛骨粉发酵牛骨粉制抗菌肽制抗菌肽牛骨粉的制备牛骨粉的制备发酵培养基的优发酵培养基的优化化发酵条件的优化发酵条件的优化抗菌肽的分离抗菌肽的分离纯化纯化抗菌肽的结构抗菌肽的结构及理化性质分及理化性质分析析结构分析结构分析理化性质分析理化性质分析抑菌性能研究抑菌性能研究大肠杆菌大肠杆菌金
2、黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌沙门氏菌沙门氏菌国国家自然科家自然科学学基金（基金（31401622）Company Logo二、研究进展二、研究进展Company Logo水洗去杂质水洗去杂质新鲜牛骨新鲜牛骨脱脂脱钙脱脂脱钙高压蒸煮高压蒸煮3h3h烘干粉碎烘干粉碎牛骨粉牛骨粉1.发酵牛骨粉制牛骨抗菌肽发酵牛骨粉制牛骨抗菌肽1.1 牛骨粉的制备牛骨粉的制备1.2 菌种的拮抗作用LASTMBL13-U拮抗作用拮抗作用（平板划线法）试验所选菌种：试验所选菌种：嗜酸乳杆菌嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus,La)嗜热链球菌嗜热链球菌(Streptococcus thermoph
3、ilus,St)蜡样芽孢杆菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus MBL13-U)1.发酵牛骨粉制牛骨抗菌肽发酵牛骨粉制牛骨抗菌肽1.3 1.3 发酵培养基的优化发酵培养基的优化1.发酵牛骨粉制牛骨抗菌肽发酵牛骨粉制牛骨抗菌肽图图1 1 菌种配比对胶原多肽含量的影响菌种配比对胶原多肽含量的影响图图2 2 蔗糖添加量对胶原多肽含量的影响蔗糖添加量对胶原多肽含量的影响图图3 3 骨粉添加量对胶原多肽含量的影响骨粉添加量对胶原多肽含量的影响正交验因素与水平表水平水平因素因素B.cereus MBL13-U:Lp:St 蔗糖添加量（蔗糖添加量（%）牛骨粉添加量（牛骨粉添加量（%）11:0:12.03.021
4、:1:12.53.532:1:13.04.0正交试验结果试验号ABCD(空列)胶原多肽含量(mg/mL)111112.75212223.34313333.09421233.44522313.51623123.17731322.98832133.11933212.87K19.189.179.039.13K210.129.969.659.49K38.969.139.589.64K13.063.063.013.04K23.373.323.223.16K32.993.043.193.21R0.380.280.210.17因素主次ABC最优组合A2B2C2最佳发酵培养基组合为：菌种配比为B.cereus
5、 MBL13-U：Lp:St=1:1:1，蔗糖添加量为2.5%，骨粉添加量为3.5%。三、取得成果三、取得成果Company Logo论文：刘丽莉，梁严予，尹光俊等，混合菌种发酵牛骨粉制备血管紧张素转换酶抑制肽；河南科技大学学报（自然科学版）；已录用。刘丽莉，梁严予，李玉等，发酵型鸡蛋酸奶最佳加工工艺的研究；13届中国蛋品科技大会；会议论文专利：一种酶解和磷酸化改性协同制备蛋清粉的工艺方法；专利号：201510225852.5；发明人：刘丽莉，王焕，杨协力，梁严予，康怀彬等；实审四、后期计划四、后期计划Company Logo（1）确定混合菌种发酵牛骨粉的最佳工艺条件；（2）通过超滤和凝胶层析从混合多肽液中成功分离纯化得到 牛骨抗菌肽，再对其理化性质进行分析（4）选取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌为3种指示菌，分别对牛骨抗菌肽提取液的抑菌活性进行测定。（5）撰写大论文。敬请各位老师指正！敬请各位老师指正！谢谢谢谢
