1、ANA和抗ENA抗体联合检测对系统性红斑狼疮诊断的意义 Diagnostic value of combined detection of ANA，anti-ENA antibody to systemic lupus erythematosus 目 录v研究目的 v研究背景v研究方法v结果与分析v结果影响因素分析v结论v参考文献v致谢研究目的：测定系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者、非SLE风湿性疾病患者和健康体检者血清中抗核抗体（ANA）和抗ENA抗体谱共九种自身抗体，探讨ANA和ENA抗体联合检测对SLE诊治的意义。研究背景：1.临床S
2、LE疾病诊断现状 SLE是一种累及多系统、多器官并有多种自身抗体出现的自身免疫性疾病。发病病因和机制都不十分明确。现普遍采用美国风湿病学会1997年推荐的SLE分类标准。缺乏单一、可靠、有效的检测指标来诊断该疾病。2.SLE疾病中的自身抗体 自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志。ANA是指针对多种细胞核成分的自身抗体的总称。随着对ANA认识的不断深入，许多针对细胞浆成分的抗体陆续被发现，检测ANA已由传统的细胞核扩展到现在的整个细胞,构成了自身抗体的一个“家族”即抗核抗体谱。ENA抗体是抗核抗体谱中的非组蛋白抗体，为可提取性核抗原抗体的总称。是由许多小分子RNA（约100-215个核苷酸）与各自
3、对应的特定蛋白质组成的核糖核蛋白颗粒RNA，该组成使其各自的抗原性得以增强。研究方法：试验方法：采用金免疫渗滤法检测40例SLE患者、40例排除SLE的其他风湿性疾病患者和50例健康体检者血清中的ANA。采用免疫印迹法检测三组血清中的ENA抗体谱共8种抗体。统计学方法：组间数据显著性差异比较采用2检验，P0.05为差异有统计学意义。结果与分析：v三组自身抗体检测结果分析v单一抗体检测结果分析v多种抗体联合检测结果分析 1.三组自身抗体检测结果分析表1 三组自身抗体检测阳性例数和阳性率例(%)组别 SLE组（40例）对照组（40例）正常组（50例）ANA 28（70.0）27（67.5）1（2.
4、0）*抗-SSA 15（37.5）11（27.5）0（0.0）*抗-SSB 8（20.0）7（17.5）0（0.0）*抗-Sm 12（30.0）1（2.5）*0（0.0）*抗-U1RNP 13（32.5）3（7.5）*0（0.0）*抗-Rip 10（25.0）3（7.5）*0（0.0）*抗-Ro60 12（30）9（22.5）0（0.0）*抗-Scl-70 2（5.0）1（2.5）0（0.0）抗-Jo-1 1（2.5）2（5.0）0（0.0）注：与SLE组阳性率相比：*P0.05）。ENA抗体谱中的抗-Sm、抗-U1RNP 和抗-Rip 检出率与对照组相比，有显著差异（P0.05）。正常组仅检
5、出1例ANA阳性，其他项目均无阳性检出，与SLE组相比，除抗-SCL-70、Jo-1外，其余均有显著差异（P0.01）。返回表2 各自身抗体敏感性和特异性比较 敏感性（%）特异性（%）ANA 70.0 32.5 抗Sm 30.0*97.5 抗SSA 37.5*72.5 抗SSB 20.0*82.5 抗U1RNP 32.5*90.0 抗Rip 25.0*92.5 抗Ro60 30.0*77.5 抗SCl-70 5.0*92.5 抗JO-1 2.5*95.0注 1：与SLE组ANA检测的敏感性相比：*P0.05；与ANA检测的特异性相比：P0.05；2：此特异性表示鉴别SLE与非SLE风湿类疾病的
6、诊断特异性。ANA检出的敏感性为70.0%，与ENA抗体各敏感性比较，有显著差异（P 0.01）；ANA特异性低，为32.5%，与ENA抗体各特异性相比，也有显著差异（P 0.01）。2.单一抗体检测结果分析 表2显示ANA检测SLE的敏感性较高，但同时存在于其他风湿性疾病患者中，对疾病诊断的特异性低，仅具筛选作用。在健康人群中也可见一定滴度的阳性，提示ANA阳性并不意味着风湿性疾病的发生，阴性也不能排除该疾病。ENA抗体谱中检测特异性均较高，主要为抗-Sm、Jo-1、U1RNP、Rip，但其敏感性均较低，对疾病的诊断具有很低的检出率。由上可知ANA检测敏感性强，但特异性低；ENA抗体检测特异
7、性强，敏感性低，说明仅单一使用某抗核抗体进行检测不能准确诊断疾病、判断疾病类型。返回表3 自身抗体联合检测敏感性和特异性比较 敏感性（%）特异性（%）ANA+抗-Sm 30.0*100.0ANA+抗-SSA 27.5*80.0ANA+抗-U1RNP 27.5*92.5 ANA+抗-Rip 20.0*97.5 ANA+抗-Ro60 25.0*80.0 注1：与SLE组单独ANA检测的敏感性相比：*P0.05；与ANA特异性相比：P0.05）；特异性均升高，其中以抗-Sm、Rip为主，特异性达100%、97.5%。3.多种抗体联合检测结果分析 联合检测的敏感性减低，但特异性提高，以联合抗-Sm为主
8、，特异性达100%，其次为抗-Rip、U1RNP，分别为97.5%、92.5%。说明将ANA和ENA抗体谱联合检测，主要是抗-Sm、U1RNP和Rip，可显著提高SLE患者诊断的准确性，避免单项检测所导致的误诊。但其在临床应用的价值还有待进一步研究。在SLE组ANA阴性结果中存在一定ENA抗体的阳性，说明这些抗体的阳性可作为诊断SLE的补充，具有互补性，提高了SLE患者的诊断率，避免了单项指标检测所导致的漏检。本实验显示ANA诊断疾病的敏感性较高，但特异性 低，与ENA抗体联合检测后，特异性提高。故在临床诊断中，为有效提高各种自身免疫疾病检测准确率，应以ANA作为筛选指标，与多种抗体进行联合检
9、测将更有利于疾病的诊断、鉴别、疗效观察和病情判断。结果影响因素分析：该试验ANA敏感性检测结果没有文献报道结果高。因为所用检测方法为金免疫渗滤法，其抗体含量低的血清样本，不能被检测出来是很有可能的。也可能与样本例数的限制而存在抽样误差及测定的实际环境、人为因素等有关。若对这些因素进行校正，可能会得到更加准确的实验结果。各自身抗体特异性跟对照组所选标本类型有关，故其特异性也存在抽样误差和人为误差。结论：ANA和ENA抗体的联合检测可作为SLE的诊断指标，并提高SLE诊断的准确性,避免单项检测所导致的漏诊和误诊。但敏感性不高，在临床诊断SLE时还需结合临床表现和其他实验室指标，进行综合分析。参考文
10、献：vHochberg M C.Updating the American college of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic Lupus erythematosusJ.Arthritis Rheum,1997,40(9):1725.vOrtega M,Almela M,Soriaao A,et al.Bloodstream infections among human immunodeficiency virus-infected adult patients:Epidemiology and
11、 risk factors for mortalityJ.Eur J Clin Micro Biol Infect Dis,2008,27(10):969-976.vDavis JM 3rd,Moder KG,Homburger HA,et al.Clinical features of 39 patients with antibodies to extractable nuclear antigens despite negative antinuclear antibodies:evidence for autoimmunity including neurologic and connective tissue diseasesJ.Medicine,2005,84(4):208-217.v陆俊忠,付启云,张迎梅,等.抗核抗体抗抗体谱联合检测 对系统性红斑狼疮的诊断意义J.江苏医药,2011,12(24):2999-3000.vPeterson LK,Wells D,Shaw L,et al.Novel method for quantitative ANA measurement using near-infrared imagingJ.Immunol Methods,2009,3(49):1-8.谢谢大家！
