1、l掌握巴氏杆菌病的临床诊断方法l临床症状观察l病理变化观察l掌握巴氏杆菌病实验室诊断方法l组织的病理学触片l细菌分离l动物实验l进一步了解禽巴氏杆菌病的临床症状和病理变化，掌握巴氏杆菌病的临床诊断方法l以肝组织制触片，染色镜检观察组织中巴氏杆菌的形态l以家禽为实验动物，自然死亡或人工感染家禽致死后，以肝组织接种于血琼脂平板，培养后观察巴氏杆菌的菌落形态。l临床症状观察、剖检、取材 l镜检镜检 l病原分离培养。培养。l实验材料：禽霍乱发病或死亡的鸡l剖检：观察病变，重点观察心脏、肺、肝脏、肌胃和十二指肠l取材：主要为心血、肝脏和脾脏，用于镜检和病原分离鉴定。鸭，禽霍乱 病例呈现全身充血的败血症鸭
2、，十二指肠有环带状出血性坏死l组织涂片和血涂片的制备组织涂片和血涂片的制备l革兰氏和瑞氏革兰氏和瑞氏-姬姆萨染色姬姆萨染色l巴氏杆菌的镜检特征巴氏杆菌的镜检特征 1、滴加瑞氏-姬姆萨A液（约0.50.8ml）于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂片染色1分钟；2、再将瑞氏-姬姆萨B液滴加于A液上面（滴加之量为A液的23倍），以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状，使两液充分混合，染色(310分钟）。3、水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣沉淀在标本上），干燥、镜检。l将病料分别接种于血琼脂平板和麦糠凯琼脂平板在将病料分别接种于血琼脂平板和麦糠凯琼脂平板在3737C C进进行培养行培养l多杀性巴氏杆菌在血琼脂上呈较平坦、半透明的露滴样菌多杀性巴氏杆菌在血琼脂上呈较平坦、半透明的露滴样菌落，不溶血落，不溶血l将病料研磨成糊状，用灭菌生理盐水稀释成1：51：10乳剂，接种于实验动物皮下或肌肉内，剂量为0.20.5mLl猪、牛、羊等家畜的病料可用小鼠或家兔l家禽的病料可用鸽、鸡或小鼠。1 1要掌握显微镜的使用和保养2实验完毕要对病料进行无害化处理3实验室彻底消毒干净，以防病原扩散
