感染性疾病及免疫学检测课件.ppt

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资源描述

1、传染病:传染病:是病原体以某种方式进入到是病原体以某种方式进入到人体后,并在人体内生长繁殖,释放人体后,并在人体内生长繁殖,释放毒素或导致机体内微生态平衡失调,毒素或导致机体内微生态平衡失调,给人体的组织和器官造成一定的损伤给人体的组织和器官造成一定的损伤而引起的疾病。而引起的疾病。病原体病原体易感人群易感人群辅助诊断及鉴别诊断辅助诊断及鉴别诊断判断疗效及预后判断疗效及预后流行病学调查流行病学调查 是由一组嗜是由一组嗜肝病毒肝病毒引起的,以肝脏炎症和坏死引起的,以肝脏炎症和坏死病变病变为主的为主的一种传染病。主要表现一种传染病。主要表现为明显的消化道症状、全身疲乏无为明显的消化道症状、全身疲乏

2、无力,肝脏肿大。肝功能异常,部分力,肝脏肿大。肝功能异常,部分病例出现黄疸。病例出现黄疸。IgM:近期感染:近期感染HAV,发病发病2周后阳性周后阳性 率为率为100%,3个月后转阴。个月后转阴。IgG:既往既往感染感染HAVRNA:早期诊断的特异性指标:早期诊断的特异性指标现有现有HBV感染者约感染者约1.6亿亿l管型管型l小球型小球型l大球型大球型HBsAg与与HBsAbHBeAg与与HBeAbHBcAg与与HBcAb有包膜双股有包膜双股DNA病毒病毒三组三组Ag-Ab系统:系统:是感染的标志是感染的标志见于体液和分泌物见于体液和分泌物中,也可见于唾中,也可见于唾 液、精液、乳汁中液、精液

3、、乳汁中介导病毒结合肝细胞介导病毒结合肝细胞3-6个月产生个月产生有抵抗力的标志有抵抗力的标志阻断病毒结合肝细胞阻断病毒结合肝细胞病毒复制的标志,传病毒复制的标志,传染性强染性强病毒合成后释放到血液病毒合成后释放到血液中中治疗的参考指标治疗的参考指标病毒复制减少的标志,病毒复制减少的标志,传染性弱传染性弱 要先于要先于HBsAb出现出现存在于病毒核心,不存在于病毒核心,不释放至血液释放至血液抗原性强抗原性强出现早,消退晚出现早,消退晚IgM: 近期感染近期感染HBVIgG: 既往感染既往感染HBV乙肝五项少见模式分析乙肝五项少见模式分析呈世界性分布呈世界性分布极易慢性化,与肝硬化、原发性肝癌极

4、易慢性化,与肝硬化、原发性肝癌 关系密切关系密切有包膜的单股正链有包膜的单股正链RNA病毒病毒抗抗HCV抗体非保护性抗体抗体非保护性抗体输血和非肠道途径传播输血和非肠道途径传播主要检测主要检测IgG检测方法:检测方法:ELISA化学发光化学发光0200004000060000年 份AIDS53523295238126136230233714 1028 6120 12652 7550 7909 8539HIV/AIDS492216261274531 1567 2649 3343 3306 4677 5201 8219 9732 216914760640711440703986685-901991

5、 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 200620071-10我国历年艾滋病病毒感染者和病人数我国历年艾滋病病毒感染者和病人数HIV-1和和HIV-2逆转录病毒逆转录病毒两股相同的正链两股相同的正链RNACD4 抗原抗原辅助受体辅助受体CD4+ 细胞细胞HIV gp120 结合结合CD4 / 辅助受体辅助受体筛选试验:敏感性高,如筛选试验:敏感性高,如ELISA,胶体金标记层析法。,胶体金标记层析法。 确诊试验:特异性高,如蛋白印迹试验和确诊试验:特异性高,如蛋白印迹试验和IFA抗体最早在感

6、染后二周,最晚三个月会转为阳性抗体最早在感染后二周,最晚三个月会转为阳性初筛试验初筛试验2次阳性,再进行确认试验次阳性,再进行确认试验样品初筛检测初筛检测阳性反应阴性反应筛查试剂复查复查原有试剂加另一种筛选试剂均阳性反应一阴一阳均阴性反应送确认实验室确认报告阴性确诊试验阳性,有临床症状,诊断为确诊试验阳性,有临床症状,诊断为AIDS确诊试验阳性,无临床症状,诊断为确诊试验阳性,无临床症状,诊断为HIV感染者感染者确诊试验阴性,但初筛试验阳性或有临床症状,确诊试验阴性,但初筛试验阳性或有临床症状, 3个月后复查个月后复查 是梅毒螺旋体引起的一种慢性传染病,本病的特点是病程的长期性和潜匿性,病原体

7、可侵犯任何器官,临床表现出各种不同的症状。p 一期梅毒:硬性下疳;p 二期梅毒:梅毒疹;p 三期梅毒:累及心、肝、神经系统、骨等。 后天性梅毒(获得性): 95%性交 传播,少数因输血、接吻、医务人员不慎受染等直接接触传播。 先天性梅毒(胎传梅毒): 梅毒螺旋体可自患病母体的血液经胎盘传给胎儿传播方式传播方式非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验:是以心磷脂、卵磷脂及胆:是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反应素,用于初筛试验及疗固醇作为抗原检查血清中的反应素,用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试验,原理基本相同:效观察。可以分为以下四种试验,原理基本相同: 1、性病

8、研究实验室玻片试验(、性病研究实验室玻片试验(VDRL) :由于试剂需现配由于试剂需现配 现用,故而国内实验室很少采用。但现用,故而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用是唯一可用于神经性梅毒诊断的血清学方法于神经性梅毒诊断的血清学方法 2、快速血浆反应素环状卡片试验、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR):在特制的纸片在特制的纸片 上进行,加入一定量特制的炭粉,可使抗原抗体出现上进行,加入一定量特制的炭粉,可使抗原抗体出现 凝集,用肉眼可观察结果。凝集,用肉眼可观察结果。 3、甲苯胺红试验(、甲苯胺红试验(TRUST):在试剂中加入甲苯胺红代替在试剂中加入甲苯胺红代替炭粉炭粉 颗粒,使结果

9、更易于观察。颗粒,使结果更易于观察。 4、不加热血清反应素试验(、不加热血清反应素试验(USR)梅毒的血清学试验(一)梅毒的血清学试验(一)RPRTRUSTVDRL滴度:出现凝集反应的血清最高稀释倍数。非梅毒螺旋体抗原血清试验的缺陷:非梅毒螺旋体抗原血清试验的缺陷: 1、特异性:由于在多种疾病,如急性病毒性感染、自身免疫、特异性:由于在多种疾病,如急性病毒性感染、自身免疫 性疾病、性疾病、结缔组织病、静脉吸毒者以及怀孕妇女中均可出现反应素,所以结缔组织病、静脉吸毒者以及怀孕妇女中均可出现反应素,所以此类试验有时会出现假阳性反应此类试验有时会出现假阳性反应. 2、敏感性:非梅毒螺旋体抗原血清试验

10、有时出现弱阳性或阴性结果,、敏感性:非梅毒螺旋体抗原血清试验有时出现弱阳性或阴性结果,而临床上又像二期梅毒,此时应将此血清稀释后做定量试验,如而临床上又像二期梅毒,此时应将此血清稀释后做定量试验,如出现阳性结果,则为抗体过量引起的前带现象。出现阳性结果,则为抗体过量引起的前带现象。12二期梅毒二期梅毒病人可出现此现象而发生梅毒血清假阴性反应。此外,由于感染病人可出现此现象而发生梅毒血清假阴性反应。此外,由于感染梅毒后反应素的出现晚于特异性梅毒螺旋体抗体,晚期梅毒反应梅毒后反应素的出现晚于特异性梅毒螺旋体抗体,晚期梅毒反应素又可能转阴,因此这类试验不适于一、三期梅毒,对隐性梅毒素又可能转阴,因此

11、这类试验不适于一、三期梅毒,对隐性梅毒和神经梅毒也不敏感。因此此类试验做梅毒初筛时,存在一定数和神经梅毒也不敏感。因此此类试验做梅毒初筛时,存在一定数量的漏检量的漏检.非梅毒螺旋体抗原血清试验的优点:非梅毒螺旋体抗原血清试验的优点: 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随疗程逐渐下降,故可以、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随疗程逐渐下降,故可以作为疗效观察的指标作为疗效观察的指标 2、此类方法价格低廉、此类方法价格低廉梅毒的血清学试验(二)梅毒的血清学试验(二)梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验:用梅毒螺旋体作为抗:用梅毒螺旋体作为抗原检测血清中的抗螺旋体原检测血清中的抗螺旋体

12、IgMIgM和和/ /或或IgGIgG抗体,其敏抗体,其敏感性和特异性均较高。常用的有以下五种方法:感性和特异性均较高。常用的有以下五种方法: 1 1、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)FTA-ABS) 2 2、梅毒螺旋体血球凝集试验(梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHATPHA) 3 3、梅毒螺旋体明胶凝集试验(梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)TPPA) 4 4、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISATP-ELISA) 5 5、梅毒螺旋体快速诊断试验(梅毒螺旋体快速诊断试验(TP-RTTP-RT)梅毒的血清学试验(三)梅

13、毒的血清学试验(三) 梅毒螺旋体明胶凝集试验(梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA) 原理:原理: TPPA的原理与的原理与TPHA基本相同,它以人工合成的基本相同,它以人工合成的 惰性明胶颗粒代替惰性明胶颗粒代替TPHA试验的红细胞作为载体,试验的红细胞作为载体, 是是TPHA的升级产品的升级产品 优点:优点: 1、试剂稳定,批间差小试剂稳定,批间差小 2、结果判读更为清晰明确结果判读更为清晰明确 3、敏感性和特异性较敏感性和特异性较TPHA进一步提高进一步提高 4 4、通过了国家的批批检、通过了国家的批批检 不足:结果判定主观,较难实现自动化不足:结果判定主观,较难实现自动化梅毒的血清学试验(

14、四)梅毒的血清学试验(四)赛乐迪亚(赛乐迪亚(Serodia)TPPA 梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验 梅毒螺旋体酶联免疫试验(梅毒螺旋体酶联免疫试验(TP-ELISA) 原理:以梅毒螺旋体抗原包被聚丙乙烯板,再加入待检原理:以梅毒螺旋体抗原包被聚丙乙烯板,再加入待检 血清以及酶标抗原,形成双抗原夹心,同时检测血清以及酶标抗原,形成双抗原夹心,同时检测 IgG、IgM抗体。少数试剂采用间接法,检测抗体。少数试剂采用间接法,检测IgG 优点:优点:1、敏感性和特异性较高、敏感性和特异性较高 2、价格较低,适合于对大量样品的筛查、价格较低,适合于对大量样品的筛查 不足

15、:各家不足:各家ELISA试剂盒采用的抗原和工艺不同,使测试剂盒采用的抗原和工艺不同,使测 定的敏感性和特异性产生较大的差异,临床实验定的敏感性和特异性产生较大的差异,临床实验 室在选用室在选用ELISA试剂前应认真进行评估试剂前应认真进行评估 梅毒的血清学试验(五)梅毒的血清学试验(五) 梅毒螺旋体快速诊断试验梅毒螺旋体快速诊断试验(TP-RT) 原理:双抗原夹心免疫层析试验或间接法免疫渗滤试验,原理:双抗原夹心免疫层析试验或间接法免疫渗滤试验, 多采用胶体金进行标记,同时检测多采用胶体金进行标记,同时检测IgG、IgM抗体抗体 (双抗原夹心法)或单测(双抗原夹心法)或单测IgG抗体(间接法

16、)抗体(间接法) 优点:优点:1、简便、快速,不需要特殊的仪器、简便、快速,不需要特殊的仪器 2、适合于单人份操作,可用于较紧急的场合、适合于单人份操作,可用于较紧急的场合 不足:不足:1、临床评估资料不多,敏感性、特异性尚有待进、临床评估资料不多,敏感性、特异性尚有待进 一步考查一步考查 2、无法实现自动化,结果判断主观、无法实现自动化,结果判断主观 3、测定结果受温度和时间的影响较大、测定结果受温度和时间的影响较大 4、未通过国家的批批检、未通过国家的批批检梅毒的血清学试验(六)梅毒的血清学试验(六)梅毒免疫层析快速检测方法梅毒免疫层析快速检测方法 非特异非特异 特异性特异性 意义意义 RPR TP 排除梅毒排除梅毒非特异感染,如麻风非特异感染,如麻风,SLE 梅毒感染梅毒感染 梅毒经治疗后梅毒经治疗后 关于梅毒血清学试验程序的探讨关于梅毒血清学试验程序的探讨 梅毒螺旋体抗原血清试验(梅毒螺旋体抗原血清试验(TPPA等)等)(-)阴性报告阴性报告(+)非梅毒螺旋体抗原血清试验(非梅毒螺旋体抗原血清试验(RPR等)等)(+)现症梅毒现症梅毒抗梅抗梅治疗,疗效观察治疗,疗效观察(-)询问梅毒既往感染和治疗史询问梅毒既往感染和治疗史(有)(有)既往感染既往感染(无)(无)随访或抗梅治疗随访或抗梅治疗

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