1、分子诊疗学概述感染分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗性疾病的分子诊疗2分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗3分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗4分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗整体水平整体水平细胞水平细胞水平分子水平分子水平5分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗6分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗7分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗分子诊断学分子诊断学(molecular diagnostics
2、)，利用，利用分分子生物学技术子生物学技术研究机体研究机体外源和内源性外源和内源性生物大分子生物大分子和大分子体系的存在、结构或表达调控的改变，和大分子体系的存在、结构或表达调控的改变，从而为疾病的防治从而为疾病的防治提供分子水平信息提供分子水平信息。8分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗阐明疾病发生、发展的分子阐明疾病发生、发展的分子机制机制；分子诊断分子诊断指标指标；建立检测建立检测方法方法9分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗属于病因学诊断，特异性高；属于病因学诊断，特异性高；对某些基因变异做出判断；对某些基因变异做出判断；
3、有更好的发展前景有更好的发展前景10分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗11分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗12分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗13分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗疾病基因突变谱，尤其是单核苷酸多态疾病基因突变谱，尤其是单核苷酸多态性性(single nucleotide polymorphism,SNP)图谱的建立，为分子诊断提供了强图谱的建立，为分子诊断提供了强有力的工具。有力的工具。14分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染
4、性疾病的分子诊疗诊疗15分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗16分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗17分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗Key Points1.Molecular diagnosis of infection disease means to estimate a disease through detecting the existence of gene of pathogenies directly,which is a relatively simple,rapid,sp
5、ecific and sensitive strategy of diagnosis.pathogeny：病原，发病机理：病原，发病机理18分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗2.There are two main kinds of molecular techniques which are used to molecular diagnosis of infection disease,amplifying DNA probe signals and amplifying target DNA fragment.amplify：放大；：放大；probe：探
6、针：探针19分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗3.Associated with conventional diagnosis methods,molecular diagnosis can be used to diagnose infection disease induced by virus,bacteria,leptospira螺旋体螺旋体,chlamydia衣原体衣原体,mycoplasma支原体支原体 and rickettsia立立克次体克次体,etc.20分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗4.Compared
7、 with other conventional diagnosis methods,molecular diagnosis has many advantages in early diagnosing infection disease,identifying the genotype of pathogenies,detecting drug resistance gene,epidemiologic investigating and supplying reliable evidence for clinical diagnosis and treatment.21分子诊疗学概述感染
8、性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗感染性疾病的分子诊断主要是针对感染性疾病的分子诊断主要是针对侵侵入人体内的病原体基因入人体内的病原体基因进行检测。进行检测。不同的病原体有各自的不同的病原体有各自的种属特异种属特异的基的基因。因。前人铺路，后人受益前人铺路，后人受益22分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗23分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗1.一般性检出策略一般性检出策略：只需要提供是否有某种病原：只需要提供是否有某种病原体的感染体的感染通过探针或扩增技术直接检出病原微生物的通过探针或扩增技术直接检出病原微生物
9、的DNA/RNA，判断有无感染或何种感染，判断有无感染或何种感染24分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗2.完整检出策略完整检出策略：不仅对病原体做出判断，还要：不仅对病原体做出判断，还要进行分型（包括亚型）和耐药性方面的检测。进行分型（包括亚型）和耐药性方面的检测。思路：诊断思路：诊断分型分型亚型亚型耐药性检测耐药性检测25分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗1.信号放大检测技术方法信号放大检测技术方法 不涉及靶分子扩增，采用多酶、多探针或二者结不涉及靶分子扩增，采用多酶、多探针或二者结合等方式增加探针标记物的浓度从而使信号得合
10、等方式增加探针标记物的浓度从而使信号得到放大，提高检测的灵敏度。如：液相杂交、到放大，提高检测的灵敏度。如：液相杂交、杂交捕获及支链杂交捕获及支链DNA（bDNA）等）等特点特点 美国美国FDA批准的商业试剂盒批准的商业试剂盒 感染因素少，无扩增所产生的污染感染因素少，无扩增所产生的污染 稳定性、重复性和特异性都较高，结果准确稳定性、重复性和特异性都较高，结果准确 放大倍数少，灵敏度较低放大倍数少，灵敏度较低26分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗2.靶分子扩增技术检测方法靶分子扩增技术检测方法 即方法中包含靶分子（即方法中包含靶分子（DNA、RNA或探针）的或
11、探针）的扩增过程的技术。如扩增过程的技术。如PCR及衍生的扩增技术、及衍生的扩增技术、连接酶链反应（连接酶链反应（LCR）、替代的扩增方法）、替代的扩增方法（TAS/SDA/NASBA等）等）特点特点 我国所售的商业试剂盒我国所售的商业试剂盒 简便、快速、灵敏度高简便、快速、灵敏度高 存在扩增所带来的污染问题存在扩增所带来的污染问题27分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗标本的选择标本的选择标本量及抗凝剂标本量及抗凝剂标本的传送、保存标本的传送、保存标本的预处理标本的预处理28分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 标本的选择标本的
12、选择与传统一样，标本的选择要符合疾病的发病机与传统一样，标本的选择要符合疾病的发病机制，能反映病程的状态。制，能反映病程的状态。由于检测方法的高灵敏性，可适当考虑标本采由于检测方法的高灵敏性，可适当考虑标本采集的便利性和通用性。集的便利性和通用性。由于核酸样本的稳定性，可选用福尔马林及石由于核酸样本的稳定性，可选用福尔马林及石蜡包埋固定的组织标本。蜡包埋固定的组织标本。核酸的选择对疾病的判断也很重要。什么时候核酸的选择对疾病的判断也很重要。什么时候用用DNA？什么时候用？什么时候用mRNA?29分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 标本量及抗凝剂标本量及抗凝剂少
13、量标本：少量标本：100ul-500ul不等，至多不等，至多1ml。不同的检测方法，所需的标本量不一样。不同的检测方法，所需的标本量不一样。抗凝剂：抗凝剂：EDTA、柠檬酸、草酸盐、肝素。、柠檬酸、草酸盐、肝素。肝素对转录酶和聚合酶有抑制作用，因此，基肝素对转录酶和聚合酶有抑制作用，因此，基于于PCR的检测方法一般不用肝素抗凝。的检测方法一般不用肝素抗凝。30分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 标本的传送、保存标本的传送、保存根据标本的种类和检测目的，建立合理的运送根据标本的种类和检测目的，建立合理的运送体系。体系。保证核酸完整性，防止标本相互间的交叉污染。保
14、证核酸完整性，防止标本相互间的交叉污染。31分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 标本的预处理标本的预处理核酸的提取核酸的提取(DNA提取、提取、RNA提取提取)扩增抑制物的去除扩增抑制物的去除危险病原体的灭活危险病原体的灭活32分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗解释应包括病原体的生物学、病理学解释应包括病原体的生物学、病理学特征、实验技术的优点及局限性。特征、实验技术的优点及局限性。阴性结果阴性结果 阳性结果阳性结果 定性检测结果定性检测结果 疾病状况的判断疾病状况的判断33分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾
15、病的分子诊疗诊疗 阴性结果解释阴性结果解释检查质控是否正常。检查质控是否正常。检查检测灵敏度、核酸提取量及扩增效率是否检查检测灵敏度、核酸提取量及扩增效率是否正常。正常。引起假阴性的因素：样品量不足、标本类型不引起假阴性的因素：样品量不足、标本类型不恰当、收集时间不符合要求、运输过程中样本降恰当、收集时间不符合要求、运输过程中样本降解。解。34分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 阳性结果解释阳性结果解释检测质控是否正常。检测质控是否正常。注意检测的特异性和可能受到的污染等情况。注意检测的特异性和可能受到的污染等情况。产生假阳性的因素：引物探针的特异性、样本产生
16、假阳性的因素：引物探针的特异性、样本在采集、运送和处理等不同环节中的交叉污染问在采集、运送和处理等不同环节中的交叉污染问题。题。35分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 定性检测结果解释定性检测结果解释考虑定性检测的局限性考虑定性检测的局限性考虑特定情况下，核酸样本的稳定性和不易降考虑特定情况下，核酸样本的稳定性和不易降解性。解性。36分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 疾病状况的判断疾病状况的判断病原体存在与患病之间的相关关系病原体存在与患病之间的相关关系为正确判断疾病应：选择具有代表性的标本，为正确判断疾病应：选择具有代表性
17、的标本，采用具有说服力的检测方法，建立适量的临界值。采用具有说服力的检测方法，建立适量的临界值。37分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 弥补血清学检测技术的缺陷弥补血清学检测技术的缺陷 检测不能培养或生长缓慢的病原微生物检测不能培养或生长缓慢的病原微生物 通过病原体的定量检测监测疾病通过病原体的定量检测监测疾病 微生物耐药性的检测微生物耐药性的检测 细菌分型及流行病学的调查细菌分型及流行病学的调查38分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗SARS相关冠状病毒的分子诊断相关冠状病毒的分子诊断u2003年年4月，香港研究者月，香港研究
18、者Peiris等报告了等报告了50 例例SARS病人的临床表现和病毒学研究结果。病人的临床表现和病毒学研究结果。u一种新的冠状病毒一种新的冠状病毒(Coronavirus)是是SARS 的致的致病原因。病原因。(Lancet,2003,361:9365)39分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗40分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗 2003年年4月，德国汉堡月，德国汉堡Bernhard-Nocht热带医学热带医学研究所学者研究所学者Drosten等用随机扩增技术，获得一段等用随机扩增技术，获得一段长度为长度为300bp的核苷酸序
19、列。的核苷酸序列。根据这段序列，建立了检测新冠状病毒的常规根据这段序列，建立了检测新冠状病毒的常规和实时定量和实时定量PCR技术。技术。(.org on April 10,2003）41分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗42分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗u检测标本检测标本 痰液、咽拭子、鼻拭子、支气管肺泡灌洗痰液、咽拭子、鼻拭子、支气管肺泡灌洗液液 、血浆、粪便。、血浆、粪便。u检测方法检测方法 1.1.逆转录逆转录-巢式巢式PCR(Reverse-Nested PCR)2.2.逆转录逆转录-实时实时PCR(Reverse
20、-Real time PCR)43分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗44分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗有报道显示，在可能有报道显示，在可能SARS病人中病毒的检出率病人中病毒的检出率为为100%。在疑似在疑似SARS病人中的检出率为病人中的检出率为23%。所有健康接触者中未检测到病毒。所有健康接触者中未检测到病毒。45分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗46分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗u另一项研究显示另一项研究显示 检测病毒的检测病毒的3种方法（血清学
21、检测、种方法（血清学检测、病毒分离、病毒分离、PCR技术）中，技术）中，PCR技术的技术的检出率最高。检出率最高。47分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗48分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗u疾病的早期即可获得阳性结果疾病的早期即可获得阳性结果(早于血清转换早于血清转换期）。期）。uSARS患者中的阳性率约为患者中的阳性率约为80%，对照中的阴性，对照中的阴性率约为率约为98%100%。u现有的现有的PCR方法有较高的特异性但灵敏度较差，方法有较高的特异性但灵敏度较差，阴性结果不能排除病毒感染。阴性结果不能排除病毒感染。49分
22、子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗痰液中病毒痰液中病毒RNA浓度极高，说明病毒从呼吸道浓度极高，说明病毒从呼吸道排放是主要传播途径。排放是主要传播途径。血清中检测到极低浓度的病毒血清中检测到极低浓度的病毒RNA，提示病毒，提示病毒复制不仅发生于呼吸道。复制不仅发生于呼吸道。病人恢复晚期的粪便中存在病毒病人恢复晚期的粪便中存在病毒RNA，说明粪，说明粪便可能也是一种传播途径。便可能也是一种传播途径。鼻、咽子中含有的病毒鼻、咽子中含有的病毒RNA显著少于痰液，提显著少于痰液，提示不适合作为标本（有可能漏检）。示不适合作为标本（有可能漏检）。50分子诊疗学概述感染性疾
23、病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗SARS相关冠状病毒基因检测相关冠状病毒基因检测必须注意的问题必须注意的问题必须在规范的基因扩增实验室中进行。必须在规范的基因扩增实验室中进行。应采取必要的质控规程，包括阳性对照和阴性应采取必要的质控规程，包括阳性对照和阴性对照。对照。阳性结果时必须对原始样本重复检验：阳性结果时必须对原始样本重复检验：或者扩增另一个基因片段或者扩增另一个基因片段 或在另一个实验室对同一样本进行检测。或在另一个实验室对同一样本进行检测。51分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗乙肝病毒基因组中有乙肝病毒基因组中有4个个ORF，分别称为，
24、分别称为S、C、P和和X。S区编码区编码HBV的包膜蛋白，的包膜蛋白，C区编码含区编码含HBeAg和和HBcAg的多肽，的多肽，P区编码依赖区编码依赖RNA的的DNA聚合酶。聚合酶。必须经过逆转录复制过程，该病毒编码的必须经过逆转录复制过程，该病毒编码的RNA-DNA polymerase缺乏校正功能导致变异率较高缺乏校正功能导致变异率较高52分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗临床价值主要体现在：临床价值主要体现在：病情评估病情评估 血清中病毒含量的多少与肝脏病理损害程度血清中病毒含量的多少与肝脏病理损害程度相关，病毒载量越高，肝组织炎症反应程度越重。相关，病
25、毒载量越高，肝组织炎症反应程度越重。疗效预测疗效预测 治疗前病毒核酸载量越高，疗效越差；载量治疗前病毒核酸载量越高，疗效越差；载量越低，机体清除病毒的可能性越大。越低，机体清除病毒的可能性越大。54分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗预后判断预后判断 病毒核酸载量持续处于高浓度者预后不良。病毒核酸载量持续处于高浓度者预后不良。垂直传播途径感染者，预后较差。垂直传播途径感染者，预后较差。反映肝细胞损害的其它指标正常，但病毒核酸反映肝细胞损害的其它指标正常，但病毒核酸水平经常波动者更易发展为肝硬化。水平经常波动者更易发展为肝硬化。55分子诊疗学概述感染性疾病的分子分
26、子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗病毒分型和耐药检测病毒分型和耐药检测u各个编码区段存在着大量有意义的自然变异或各个编码区段存在着大量有意义的自然变异或药物诱导的变异，并由此产生不同的变异株，从药物诱导的变异，并由此产生不同的变异株，从而导致而导致HBV感染的不同血清学和临床表现。感染的不同血清学和临床表现。u检测检测HBV的变异株对了解疾病机制、药物耐受的变异株对了解疾病机制、药物耐受和指导用药有一定的价值。和指导用药有一定的价值。参考参考ATCC HepG2 Cell Culture 56分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗57分子诊疗学概述感染性疾病的分
27、子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗l宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率在宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率在女性恶性肿瘤中居第二位，每年约有女性恶性肿瘤中居第二位，每年约有50万左右新万左右新发病例。发病例。l我国每年有新发病例约我国每年有新发病例约13.15万，占世界宫颈癌万，占世界宫颈癌新发病例总数的新发病例总数的26%。58分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗持续的人乳头瘤病毒持续的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是引起宫颈癌和癌前病变的必要因素，感染是引起宫颈癌和癌前病变的必要因素，93.0%-99.7%
28、的宫颈癌组织中均可检测到的宫颈癌组织中均可检测到HPV DNA。高危型高危型HPV-16和和HPV-18分别占宫颈癌的分别占宫颈癌的50%和和14%。高危型。高危型HPV的持续感染可使患宫颈癌的的持续感染可使患宫颈癌的风险增加风险增加250倍。倍。59分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗HPV DNA的检测方法的检测方法实时定量实时定量PCR(Real time PCR)核酸杂交捕获（核酸杂交捕获（Hybrid CaptureII，HCII）60分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗细胞学检查结果为意义不明确的非典型细胞时，细胞学检
29、查结果为意义不明确的非典型细胞时，HPV基因基因的检测能预测受检者患宫颈癌的风险。的检测能预测受检者患宫颈癌的风险。细胞学检查细胞学检查+HPV基因的检测是宫颈癌前病变和基因的检测是宫颈癌前病变和宫颈癌筛查的最佳方法，成为预防宫颈癌的关键宫颈癌筛查的最佳方法，成为预防宫颈癌的关键61分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗参考参考NSFC申请材料申请材料62分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗63分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗64分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗
30、结合分歧杆菌的基因检测结合分歧杆菌的基因检测 结核分歧杆菌结核分歧杆菌MTb，俗称结核杆菌，俗称结核杆菌TB，是结核，是结核病的致病菌。带病菌的痰液是病的致病菌。带病菌的痰液是TB主要的传染源。主要的传染源。MTbH37Rv基因组结构：基因组结构：环状双链环状双链DNA，共，共4 411 529kb，富含重复序列尤其是插入序列、多基，富含重复序列尤其是插入序列、多基因的家族序列及重复的管家基因序列。因的家族序列及重复的管家基因序列。65分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗66分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗TB分子诊断方法分子
31、诊断方法1临床标本处理：临床标本处理：标本：痰、胸腹腔积液、血清、尿液、脑脊液标本：痰、胸腹腔积液、血清、尿液、脑脊液 处理：液化剂去除粘蛋白，若带血则用红细胞处理：液化剂去除粘蛋白，若带血则用红细胞裂解液去除血红蛋白，提取裂解液去除血红蛋白，提取DNA67分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗TB分子诊断方法分子诊断方法2 常用的是靶分子扩增方法：直接常用的是靶分子扩增方法：直接PCR法、法、SDA法、法、LCR法法 扩增片段：抗原蛋白编码基因扩增片段：抗原蛋白编码基因-165bp、MBP64-240bp、IS6 110-123bp、IS986-245bp、16
32、S DNA-584bp TB的种属鉴定：以的种属鉴定：以16S rRNA为靶基因为靶基因 美国美国FDA：Amplicor检测和检测和MTD检测检测68分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗TB分子诊断方法分子诊断方法3 耐药性检测耐药性检测 耐药性分子基础：耐药性分子基础：利福平是抗结核治疗的关键药物。耐药的分子利福平是抗结核治疗的关键药物。耐药的分子基础是基础是RNA聚合酶的突变，主要集中在聚合酶的突变，主要集中在rpoB基因基因的的81bp区域。区域。耐药性鉴定：耐药性鉴定：PCR-SSCP法和点突变的检测法法和点突变的检测法69分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗70分子诊疗学概述感染性疾病的分子分子诊疗学概述感染性疾病的分子诊疗诊疗
