1、糖化血红蛋白检测及其临床意义 西安市第一医院检验科 赵雅1 糖尿病概述（糖尿病概述（1）糖尿病的发病率呈不断上升趋势，现已接近5。2007年全球糖尿病患者人数已达2.46亿，预计2025年将增加55达3.8亿。传统的诊断以空腹血糖（FPG）和糖耐量（OGTT）作为参考指标。但是血糖测定只能反映被测者当时血糖水平，受病人身体状况、饮食、用药情况、抽血时间等多种因素影响,波动较大。不能反映病人较长时间范围内的血糖情况。2 Abraham等于1978年首次报导了采用微小柱法检测HbA1c以来，美国国 家 糖 尿 病 控 制 和 并 发 症 调 查（DCCT），经历时9年的调查,公布确认了测定HbA1
2、c是对糖代谢的控制程度和血糖水平长期控制的有效方法。理应成为实验室的一项重要指标。因此近年HbA1c的检测，受到了关注，以下对糖化血红蛋白（HbA1c）基础和临床作简要的讨论。糖尿病概述糖尿病概述（2）3 什么是糖化血红蛋白 糖化血红蛋白（GHb）是血液中葡萄糖分子和血红蛋白A组分的某些特殊部位，在红细胞内经缓慢而不 可 逆 非 酶 促 反 应，最 后 形 成HbA1c酮胺化合物，称为糖化血红蛋白。糖化糖化血红蛋白血红蛋白的特性的特性(1)4 糖化血红蛋白的特性糖化血红蛋白的特性(2)HbA1c是一个宏观控制指标。在过去的20多年中已成为评价糖尿病长期血糖控制水平的金标准和糖尿病管理的基石。具
3、有里程碑意义的两大糖尿病临床研究，美国I型糖尿病控制及并发症试验（DCCT）和英国II型糖尿病控制与并发症关系研究(UKPDS)均把HbA1c作为糖尿病控制的一个重要评价指标，且都充分肯定了强化治疗在预防血管并发症发生、发展中的重要作用。5 血液中糖化血红蛋白比例高低的决定因素 取决于血糖浓度、血糖与血红蛋白的接触时间和红细胞的存活时间；血糖浓度越高,接触时间越长，HbA1c的比例就越大。糖化糖化血红蛋白血红蛋白的特性的特性(3)6 HbA1c为什么能反映12个月内血糖平均水平 糖化血红蛋白分HbA1a、HbA1b和HbA1c，因后者占总量的80，基本代表了糖化血红蛋白的总体水平。HbA1c在
4、红细胞内合成是连续不可逆的进行。红细胞平均寿命为120天左右，在红细胞死亡前，其中的糖化血红蛋白含量也可保持相对稳定。因此HbA1c的水平可反映近12个月内的血糖平均水平。糖化糖化血红蛋白血红蛋白的特性的特性(4)7 影响HbA1c形成的因素n 在DM患者中,HbA1c水平与血液循环中的葡萄糖水平有关。平均血浆或血清葡萄糖浓度是HbA1c形成的主要决定因素。基础研究显示下，在4的条件下，红细胞和葡萄糖孵育时可发现葡萄糖浓度与HbA1c的形成之间存在线性关系；而在37 的生理条件下，红细胞HbA和葡萄糖的非酶促糖化反应除受葡萄糖浓度影响外，还受氧张力和红细胞内2，3-DPG水平影响。此外，氢离子
5、、氯化物等也可影响红细胞Hb的糖化过程。但在这些影响HbA1c形成的诸多因素中，血浆葡萄糖浓度是最重要的因素,它决定HbA1c的形成，两者之间存在正相关。8 糖化血红蛋白特性与临床关系示意图糖化血红蛋白特性与临床关系示意图 HbA1a （数量很少，占总血红蛋白的（数量很少，占总血红蛋白的46%）血红蛋白血红蛋白Hb HbA 97%HbA1b 糖糖 HbA1a 其中其中HbA1c占占80 化化 HbA1b HbA2 2.5%HbA1c 血血 红红 HbF 0.5%蛋蛋 白白(HbA1c)合成过程缓慢连续进行、合成过程缓慢连续进行、葡萄糖葡萄糖直到细胞衰老；合成产直到细胞衰老；合成产物不可逆，只进
6、不出。物不可逆，只进不出。合成速率和总量合成速率和总量 与与3个月前葡萄糖个月前葡萄糖 浓度成正比浓度成正比 溶血性贫血溶血性贫血RBC寿命寿命 RBC缩短缩短HbA1c HbA1c值不受当时值不受当时 血糖浓度的影响血糖浓度的影响 （12024）：）：1 的关系的关系 控制糖尿病后控制糖尿病后HbA1c下降速下降速 度要比血糖、尿糖晚度要比血糖、尿糖晚34周周9 HbA1c检测近年在方法学上也有很大发展，例如自动高压液相色谱法、亲和层析法、自动生化分析免疫试剂法和快速床旁检测法等，具有方便快速的特点。现简要介绍MQ-2000原理如下：非糖化血红蛋白带正电荷，糖化血红蛋白几乎不带电。MQ200
7、0根据糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白带电量不同，采用弱酸性阳离子交换色谱层析法将两种血红蛋白进行分离.1.标本要求：a)静脉抽取病人全血，采血量为2ML，任意时刻，无空腹要求，可以餐前或餐后抽血。建议真空采血，抗凝剂与血常规的一致，为EDTA类型，建议用EDTA-K2.b)病人样本建议及时检测，在4环境下，能保存48小时。糖化血红蛋白的检测方法（糖化血红蛋白的检测方法（1）10 糖化血红蛋白的检测方法（糖化血红蛋白的检测方法（2）2.校准品和校准：a）标准：可使用厂方配套的1、2号定标品。也可以使用每盒试剂出厂时附有的O值和F值，在更换试剂时按仪器提示输入，不同批号试剂不能混用，使用同一批号试剂
8、时可不用更改O、F值。b)质控：可以使用厂方配套的1、2号质控品，分别为正常值和异常值质控。3.操作步骤：开机装载试剂执行定标输入校正值执行质控输入样本ID加载标本报告。11 糖化血红蛋白参考值n性能参数：n线性范围：HbAlc的线性范围4%-18%。n参考范围：糖化血红蛋白检测及其临床意义 HbAlc的线性范围 4%-65%n准确性：质控测量结果的平均值在质控品范围内n重复性：CV3.0%n其 它：仪器在分析前会对样品进行自动混匀12 HbA1cHbA1c的临床意义（的临床意义（1 1）主要有两个方面：一是糖尿病的诊断，二是有助于糖尿病并发症的发现和预 防，降低并发症的危险性。13 HbA1
9、cHbA1c的临床意义（的临床意义（2 2）用于糖尿病的辅助诊断（1）大多数血糖高于正常的糖尿病患者，其HbA1c增高；对空腹血糖正常而耐量下降的病人HbA1c也可增高。1997年美国糖尿病协会（ADA）建立新的糖尿病诊断标准。日本糖尿病协会（JDS）也修改了标准，大部分内容与ADA相符。在JDS标准中，可以使用HbA1c6.5%作为糖尿病诊断标准。这是根据日本人群中，HbA1c浓度为6.1%时对应的FPG为7.0mmol/L，餐后2h为11.1mmol/L。14 用于糖尿病的辅助诊断（2）Yoshihiko等联合使用HbA1c和FPG联合对109例病人进行检查，根据HbA1c结果筛选出18例
10、FPG结果正常的糖尿病人，以此证明HbA1c可以替代OGTT对糖尿病的筛选。而且HbA1c较OGTT操作更简单方便，更适合于糖尿病的诊断。其主要原因就在于HbA1c可反映前几个月来的血糖整体水平而不是某一时刻的浓度，较少受到干扰有更好的敏感性。HbA1cHbA1c的临床意义（的临床意义（2 2）15 HbA1cHbA1c的临床意义（的临床意义（3 3）有助于降低糖尿病患者并发症的危险性（1）美国DCCT研究组Tanaka等对几千名糖尿病患者69年研究结果证实了HbA1c平均水平与糖尿病微血管病变关系。数据显示：HbA1c未超出参考值上限1（即7），患者不会出现糖尿病视网膜病变和糖尿性肾病。如果
11、超出上限12个百分点，出现合并症，略有上升，超过2，微血管并发症的危险性就大大增加。16 有助于降低糖尿病患者并发症的危险性（2）Wisconsin对糖尿病视网膜病变的流行病学研究表明：HbA1c每增加1，可导致视网膜病变增加70，尿蛋白增加20。冠心病增加10。调查结果显示：高血糖对微血管并发症的危险性要大于心血管疾病。英国流行病学调查：对冠心病作用认为LDLC是最重要的危险因子，其次是HbA1c.HbA1cHbA1c的临床意义（的临床意义（3 3）17 HbA1cHbA1c的临床意义（的临床意义（4 4）用于应激性高血糖的鉴别诊断用于应激性高血糖的鉴别诊断 各种应激如心肌梗塞和脑血管意外可
12、使血糖升高，但这种高血糖、HbA1c不一定升高，若为糖尿病、HbA1c则升高。两者的鉴别对指导治疗和判断预后有一定价值。18 糖尿病长期血糖的监测：观察饮食和药物治疗的效果，特别是怀疑口服药物失效而 不 得 不 用 胰 岛 素 治 疗 时HbA1c有较高价值。HbA1cHbA1c的临床意义（的临床意义（5 5）19 怀孕期间怀孕期间HbA1cHbA1c是反映糖尿病控制是反映糖尿病控制的一个特别有用的指标的一个特别有用的指标 怀孕期间血糖控制对母婴健康极为重要。糖尿病患者怀孕期间母亲的高血糖与胎儿的发病率、死亡率上升都有关。保持严格的血糖控制，尤其是在胚胎发生的头3个月，母亲HbA1c结果对健康胎儿的孕育极大促进作用。HbA1cHbA1c的临床意义（的临床意义（6 6）20 有助于对糖尿病慢性并发症的发现和预防；临床研究显示：糖尿病慢性并发症、糖尿病肾病和视网膜病变的发生与HbA1c水平密切相关，并发现HbA1c7时，糖尿病发生慢性并发症的危险性很小，而一旦HbA1c7时，则发生慢性并发症的危险性显著增高。HbA1cHbA1c的临床意义（的临床意义（7 7）21 沟通与协作沟通与协作发展才是硬道理发展才是硬道理22
