1、2.2 2.2 动物细胞工程动物细胞工程 动物细胞培养动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞融合 单克隆抗体技术单克隆抗体技术 动物细胞核移植动物细胞核移植 动物动物 细胞细胞 工程工程 常用常用 技术技术 动物细胞培养动物细胞培养 一、动物细胞培养一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 _，将它分散成，将它分散成_，然后放在适宜的，然后放在适宜的 _中，让这些细胞中，让这些细胞_和和_ _ 。 组织组织 单个细胞单个细胞 培养基培养基 生长生长 增殖增殖 1. 原理：原理： 细胞的增殖细胞的增殖 1 为什么细胞培养要分散成单个细胞培养？怎样
2、分散？为什么细胞培养要分散成单个细胞培养？怎样分散？ 2 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要 成分是什么？用胃蛋白酶行吗？成分是什么？用胃蛋白酶行吗？ 3 什么是细胞贴壁和细胞接触抑制？什么是细胞贴壁和细胞接触抑制？ 4 什么是原代培养和传代培养？传代培养的细胞什么是原代培养和传代培养？传代培养的细胞 具有具有 什么特点？什么特点？ 2.过程 细胞株：细胞株：原代细胞一般传至原代细胞一般传至10代左右细胞代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到活到4050代，这种传代细胞为细胞株。代，这种传
3、代细胞为细胞株。 细胞系：细胞系：细胞株传代至细胞株传代至50代后又出现细胞代后又出现细胞 生长停滞状态，生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的只有部分细胞由于遗传物质的 改变改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种传代细胞为细胞系。种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传细胞系的遗传 物质改变物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。容易传代培养。 动物胚胎或幼龄动物动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官的组织、器官 细胞悬浮液细胞悬浮液 传代培养（传代培养（10-50代
4、）代） 细胞株细胞株 50代后无限传代代后无限传代 细胞系细胞系 分散成单个细胞分散成单个细胞 胰蛋白酶胰蛋白酶 加培养液加培养液 过程过程 贴壁生长贴壁生长 和接触抑制和接触抑制 分瓶培养分瓶培养 (遗传物质突变遗传物质突变) 原代培养（保持细胞正常的二倍体核型）原代培养（保持细胞正常的二倍体核型） 胰蛋白酶胰蛋白酶 3.动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件 1 1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2 2、营养、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素、葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素、
5、 动物血清和血浆等动物血清和血浆等: :补充合成培养基中缺乏的物质补充合成培养基中缺乏的物质 3 3、温度和、温度和PHPH 36.5+36.5+（- -）0.50.5度度, 7.2, 7.2- -7.47.4 4 4、气体环境：、气体环境： O O2 2和和COCO2 2（95%95%空气和空气和5% CO5% CO2 2 ） 4.动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用 生产生物制品，如病毒疫苗、生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单干扰素、单 克隆抗体克隆抗体 作为基因工程中的作为基因工程中的受体细胞受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测培养的动物细胞可以用于检测有毒物质有毒物质， 判断
6、某种物质的毒性判断某种物质的毒性 用于筛选用于筛选抗癌药物抗癌药物，为治疗和预防，为治疗和预防癌症癌症及及 其他疾病提供理论依据其他疾病提供理论依据 细胞的全能性细胞的全能性 细胞细胞 植物体植物体 培养结果培养结果 获得细胞获得细胞或或 细胞产物细胞产物 微型繁殖、作物微型繁殖、作物 脱毒等脱毒等 培养目的培养目的 动物血清动物血清 植物激素植物激素 培养基特有成分培养基特有成分 液体培养基液体培养基 固体培养基固体培养基 培养基性质培养基性质 细胞增殖细胞增殖 原理原理 动物细胞培养动物细胞培养 植物组织培养植物组织培养 比较项目比较项目 植物细胞培养和动物细胞培养的比较植物细胞培养和动物
7、细胞培养的比较 将动物的一个细胞的将动物的一个细胞的_，移入一个已，移入一个已 经去掉经去掉_的的_细胞中，使其细胞中，使其_并并 发育成一个新的发育成一个新的_，这个新的胚胎最终，这个新的胚胎最终 发育为动物个体。发育为动物个体。 2.分类：分类： 可分为可分为_核移植和核移植和_核核 移植两类，前者的难度明显低于后者。用移植两类，前者的难度明显低于后者。用 核移植的方法得到的动物称为核移植的方法得到的动物称为_。 细胞核细胞核 细胞核细胞核 卵母卵母 重组重组 胚胎胚胎 胚胎细胞胚胎细胞 体细胞体细胞 克隆动物克隆动物 1.原理：动物细胞核具有全能性原理：动物细胞核具有全能性 二、动物体细
8、胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 激活方法：激活方法： 激活目的：激活目的： 促融方法：促融方法： 电刺激电刺激 体细胞核移植体细胞核移植涉及的技术：动物细胞培养、动物细胞融合、涉及的技术：动物细胞培养、动物细胞融合、 胚胎移植胚胎移植 受体：普通奶牛受体：普通奶牛 1.体积大，易操体积大，易操 作，作，营养营养物质丰物质丰 富富2.含有促使细含有促使细 胞核表达全能性胞核表达全能性 的物质的物质 动物细胞培养动物细胞培养 胚胎移植胚胎移植 供体：优良性状牛供体：优良性状牛 动物细胞融合动物细胞融合 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
9、4.应用：应用： 存在问题：存在问题： 1、加速家畜的遗传改良，促进优良畜群繁育、加速家畜的遗传改良，促进优良畜群繁育 2、保护濒危物种、保护濒危物种 3、生产珍贵的医用蛋白、生产珍贵的医用蛋白 4、克隆器官作为器官移植的供体、克隆器官作为器官移植的供体 1、成活率低、成活率低 2、克隆动物的健康问题、克隆动物的健康问题 3、克隆动物食品的安全性问题、克隆动物食品的安全性问题 3.核移植流程核移植流程 作为异种移植的作为异种移植的供体供体 “鼠背人耳”鼠背人耳” 用于组织器官的用于组织器官的移植移植 2.2.22.2.2动物细胞融合与动物细胞融合与 单克隆抗体单克隆抗体 一、动物细胞融合一、动
10、物细胞融合 1.原理：原理： 2.诱导融合的方法诱导融合的方法 3.动物细胞融合的意义动物细胞融合的意义 打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能。打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能。 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目比较项目 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞融合 细胞融合原理细胞融合原理 细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 细胞融合的方法细胞融合的方法 去除细胞壁去除细胞壁后诱导后诱导 原生质体融合原生质体融合 使细胞分散后诱使细胞分散后诱 导细胞融合导细胞融合 诱导方法诱导方法 物理（离心、振荡、物理（离心、
11、振荡、 电刺激）电刺激） 化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇） 物理、化学方法物理、化学方法 （同左）（同左） 灭活的病毒灭活的病毒 用途用途 获得杂种植株获得杂种植株 制备单克隆抗体制备单克隆抗体 1、抗体的化学本质？、抗体的化学本质？作用特点？作用特点？ 2、抗体由什么细胞产生？分布在哪里？、抗体由什么细胞产生？分布在哪里？ 3.如何获取某种特定抗体？如何获取某种特定抗体？ 4.B淋巴细胞有什么特点？淋巴细胞有什么特点？ 5.什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？ 6.把把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起，会淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起，会 有几种融合方式？有几种融
12、合方式？ 7.杂交瘤细胞有什么特点杂交瘤细胞有什么特点 二二. .动物细胞融合的成功应用动物细胞融合的成功应用 单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备 单克隆抗体单克隆抗体 由单个杂交瘤细胞经过无性繁殖由单个杂交瘤细胞经过无性繁殖 （克隆），形成基因型相同的细胞群，（克隆），形成基因型相同的细胞群， 这一细胞群所产生的化学性质单一、特这一细胞群所产生的化学性质单一、特 异性强的抗体称为单克隆抗体。异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点：特点： 特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高 思考：思考： 1、本过程利用了哪些原理？、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理免疫原理，细胞融合
13、原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传 物质，不仅具有物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有细胞分泌抗体的能力，而且还有 无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异 性强，灵敏度高，优越性十分明显性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有：应用主要有： 1、临床诊断、临床诊断 2、
14、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹” 治疗肿瘤治疗肿瘤 22 免疫的免疫的B B 淋巴细胞淋巴细胞 注射特定注射特定 抗原蛋白抗原蛋白 骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞 融合融合 多种多种杂交细胞杂交细胞 专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性 单克隆抗体单克隆抗体 注射到小鼠体内注射到小鼠体内 体外培养体外培养 专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性 将不同杂交细胞将不同杂交细胞分开分开，克隆专一，克隆专一 抗抗体，检验阳性细胞体，检验阳性细胞 选择性培养基选择性培养基 1.单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程 多种多种 （一选）（一选）
15、杂交瘤细胞杂交瘤细胞 （二选）（二选） 能产生所需抗体的能产生所需抗体的 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 （3 3）整个制备过程为何要经过两次筛选）整个制备过程为何要经过两次筛选? ? 第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种），第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种）， 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤 细胞的情况下开始培养，然后再筛选出细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性能产生特异性 抗体的细胞群。抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所 以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单以产
16、生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单 克隆抗体。克隆抗体。 3、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是( ) A、可以制成诊断盒用于疾病的诊断、可以制成诊断盒用于疾病的诊断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产、可以在生物体内生产，不能体外生产 4、“生物导弹”是指、“生物导弹”是指 ( ) A、单克隆抗体、单克隆抗体 B、带有特定药物的单克隆抗体、带有特定药物的单克隆抗体 C、杂交细胞、杂交细胞 D、B淋巴细胞淋巴细
17、胞 D B 5、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在 动物细胞融合中有特殊性的是动物细胞融合中有特殊性的是 ( ) A、融合的原理、融合的原理 B、融合的优点、融合的优点 C、融合的诱导手段、融合的诱导手段 D、融合的过程、融合的过程 C 6、单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于、单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于( ) A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”、单克隆抗体能够制成“生物导弹” B、单克隆抗体能够在体外制备、单克隆抗体能够在体外制备 C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、 免疫活性高免疫活性高 D、单克隆抗
18、体制备过程简单、单克隆抗体制备过程简单 C 7、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中 1过程注射的物质和过程注射的物质和A细胞的名称为细胞的名称为 ( ) A、抗体、抗体、T淋巴细胞淋巴细胞 B、抗原、抗原、T淋巴细胞淋巴细胞 C、抗体、抗体、B淋巴细胞淋巴细胞 D、抗原、效应、抗原、效应B淋巴细胞淋巴细胞 D 8、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学 研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述， 错误的是错误的是 ( ) A特异性强、灵敏度高特异性强、灵
19、敏度高 B与抗癌药物结合可制成“生物导弹”与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C体外培养体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D由效应由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤 细胞分泌细胞分泌 C 1 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经 培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ） A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 B.B.没经过免疫的没经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 C.C.
20、经过免疫的经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.没经过免疫的淋巴细胞没经过免疫的淋巴细胞 A 2 2、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的 幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ） A.A.容易产生各种变异容易产生各种变异 B B具有更强的全能性具有更强的全能性 C.C.取材十分方便取材十分方便 DD分裂增殖的能力强分裂增殖的能力强 D 3.3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于( ) ( ) A.A.培养基不同
21、；培养基不同； B.B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。 A 4 4、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合 中有特殊性的是（中有特殊性的是（ ） A A、融合的原理、融合的原理 B B、融合的优点、融合的优点 C C、融合的诱导手段、融合的诱导手段 DD、融合的过程、融合的过程 5 5、单克隆抗体制备
22、过程中，骨髓瘤细胞和、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞诱导淋巴细胞诱导 融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培 养基上不能存活、增殖的细胞是（养基上不能存活、增殖的细胞是（ ） B B淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞 A A、 B B、 C C、 DD、 C A 3 3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是： （ ） A A、动物细胞培养的目的只是为了获
23、得大量的细胞、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分泌蛋白分泌蛋白 B B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散 C C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡 过程中过程中 D D、培养至、培养至5050代后传代细胞遗传物质没有发生改变代后传代细胞遗传物质没有发生改变 B B 1 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变 的细胞是的细胞是 -（ ） A A细胞系细胞系 B B细胞株细胞株 C C原代细胞原代细胞 D D传代细胞传代细胞 2 2、动物细胞工程技术的基础是
24、、动物细胞工程技术的基础是 -（ ） A.A.动物细胞融合动物细胞融合 B.B.单克隆抗体单克隆抗体 C.C.胚胎移植胚胎移植 D.D.动物细胞培养动物细胞培养 A D 课堂反馈： 4.4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于- -（ ） A.A.培养基不同；培养基不同； B.B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。养成植株。 A 下
25、图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤 风杆菌的实验方案风杆菌的实验方案 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 4、图中、图中B为为_过程，常用过程，常用 _作为诱导剂，该细胞继作为诱导剂，该细胞继 承承_的遗传特性，既能的遗传特性，既能 _,又能又能_。 1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是_ 3、A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得 _,该细胞能够产生该细胞能够产生_ 5、C过程指细胞培养，该过程包括过程指细胞培养，该过程包括 _培养和培养和_培养两个阶段，其培养两个阶段，其 中中_代以内
26、的的细胞属于细胞株。代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体制备单克隆抗体 B细胞细胞 抗体抗体 细胞融合细胞融合 灭活病毒灭活病毒 双亲细胞双亲细胞 分泌抗体分泌抗体 无限增殖无限增殖 原代原代 传代传代 50 B 体外培养体外培养 骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 足够数量的细胞群足够数量的细胞群 注射到注射到 小鼠腹腔小鼠腹腔 A C 1.动物细胞工程技术的基础是：（动物细胞工程技术的基础是：（ ） A动物细胞融合动物细胞融合 B胚胎移植胚胎移植 C动物细胞培养动物细胞培养 D核移植核移植 在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正
27、确的是（确的是（ ） A结果是相同的结果是相同的 B杂种细胞的形成过程基本相同杂种细胞的形成过程基本相同 C操作过程中酶的作用相同操作过程中酶的作用相同 D诱导融合的手段相同诱导融合的手段相同 . 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上在这种培养基上不不能存活增殖的细胞是（能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞
28、杂交瘤细胞杂交瘤细胞 A B C D C 6、基因型为基因型为AaBb的水稻的水稻(具有具有24条染色体条染色体)的花粉通过无菌操作的花粉通过无菌操作， 接入试管后接入试管后，在一定条件下形成试管苗的育种过程在一定条件下形成试管苗的育种过程。 (1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后的形成的不规则细胞团愈伤组织是花粉细胞不断分裂后的形成的不规则细胞团，愈伤组愈伤组 织形成中织形成中，必须从培养基中获得必须从培养基中获得_。 (2)要促进花粉细胞分裂生长要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有培养基中应有_和和_两两 类激素类激素。 (3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和
29、根，再由芽发育成叶和茎再由芽发育成叶和茎。 这一过程必须给予光照这一过程必须给予光照，其原因是其原因是_利用光照制造有利用光照制造有 机物机物，供试管苗生长供试管苗生长。 (4)试管苗的细胞核中含有试管苗的细胞核中含有_条脱氧核苷酸链条脱氧核苷酸链。 (5)培养出的试管基因型有培养出的试管基因型有 。如果要获得育种需。如果要获得育种需 要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是 _。 各种营养各种营养(水、无机盐、蔗糖等能量物质水、无机盐、蔗糖等能量物质)和小和小 分子有机物分子有机物 生长素、生长素、 细胞分裂素细胞分裂素 叶绿体叶绿体 24 AB、
30、Ab、ab、a 用一定浓度的秋水仙素处理组织培养获得的幼苗用一定浓度的秋水仙素处理组织培养获得的幼苗 1.1.下列哪下列哪项属于克隆（项属于克隆（ ） A A将鸡的某个将鸡的某个DNADNA片段整合到小鼠的片段整合到小鼠的DNADNA分子中分子中 B B将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤 细胞细胞 D D将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系 D D 2.2.（多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用（多选）美国杜克大学医疗
31、中心的一个研究小组利用 成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应 器器, ,成功地在实验室里培育出新的动脉血管，这种血管的成功地在实验室里培育出新的动脉血管，这种血管的 外形和功能都与真的血管一样外形和功能都与真的血管一样, ,这一研究成果是生物组织这一研究成果是生物组织 培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，正培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，正 确的是（确的是（ ） A A属于属于“克隆克隆” B B可能要利用去核卵细胞可能要利用去核卵细胞 C C关键是激发血管细胞的全能性关键是激发血管细胞的全能性 D D关键是激
32、发血管细胞发育成血管的潜能关键是激发血管细胞发育成血管的潜能 ABDABD 3 .3 .从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉 核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植 入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状 （ ） A A、难以预测、难以预测 B B、像甲、像甲 C C、像乙、像乙 D D、像丙、像丙 4.4.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生复生”将不再将不再 是神话。如果世界上最
33、后一只野驴刚死亡，以下较易成功是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功 “复生复生”野驴的方法是野驴的方法是 （ ） A A将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分 化、再分化，培育成新个体化、再分化，培育成新个体 B B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个 体体 C C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中， 经孕育培养成新个体经孕育培养成新个体 D D将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体 B B C C
