1、美国药典溶出度试验方法的建立与验证指导原则的解读2017.6.30涵盖内容总体评价溶出介质溶出仪器实验设计测定方法与验证总体评价总体评价限度范围稳定性变异范围区分力总体评价-限度限度范围应考虑的问题1、多批次的考量2、具有代表性3、具有针对性（针对重点药品）4、考虑样品的稳定性总体评价-区分力区分可能影响体内活性的改变处方组成、API的晶型关键辅料的品规生产工艺关键工艺参数等等 稳定性（重点是影响因素）其他因素温湿度光照总体评价-稳定性 变异区间的考量1、控制变异的原因 难以判断药物处方工艺的改变对溶出度的影响趋势2、变异的控制取样时间10分钟，RSD20%其他取样时间，RSD10%3、药物本
2、身的原因 主成分 辅料 工艺 试验操作过程 锥体效应 粘壁 转篮筛网等总体评价-变异范围 药物本身的原因举例含量均匀度差生产过程前后不一溶出速率不同辅料的干扰胶囊和包衣的干扰总体评价-变异范围试验设计的原因举例更换溶出类型调整转速更换样品固定装置溶出介质的脱气改变溶出的介质组成总体评价-变异范围溶出介质溶出介质选择的基本原则 应考察API及制剂的理化性质和介质对API的影响： 溶解性 稳定性 尽可能模拟药物在体内释药过程的环境溶出介质漏槽条件（SINK CONDITION） 在静态循环溶出装置中 随着溶出的进行 杂质中药物浓度 浓度梯度（Cs-C） 扩散动力 溶出速度漏槽条件：溶出介质量应超过
3、药物全溶时所需量，至少3倍以上。如果溶出介质的区分力足够，且经过验证，不满足漏槽条件也是允许的。溶出介质释药介质的基本种类1、水（适合非pH依赖释药）2、 pH1.2-6.8的溶液（速释制剂）3、 pH1.2-7.5的溶液（缓释制剂）4、人工胃液2h+人工肠液5、水+表面活性剂（SDS或SLS、胆酸盐等）6、缓冲盐水+表面活性剂（SDS或SLS、胆酸盐 等）7、有机溶媒（不推荐）8、其他如：结肠、口腔、眼内释药等特殊介质溶出介质关于表面活性剂和有机溶剂 有机溶剂：在进行工艺摸索溶出比对时可以使用，在拟定质量标准时不建议使用。表面活性剂：1）必要时可添加。2）所使用浓度应在多水平进行考核。3）应
4、通过考核耐用性，确定是否规定表面活性剂的纯度。 所用缓冲盐与酸的浓度如影响溶出效果时，也应予以考察。其他因素体积脱气处理酶的加入体内外相关性介质溶出介质体积 500-1000ml 900为最常用常用 2L-4L（基于药物浓度与漏槽条件） 使用大溶出杯，进行验证特殊情况溶出介质脱气处理 气泡附着于药物与篮网表面成为溶出屏障。 气泡使颗粒粘附于杯壁或装置上，影响溶出。 气泡增加颗粒的浮力使溶出增加。 气泡降低颗粒的表面积使溶出下降。原因 短时间加热 过滤 真空抽滤方式溶出介质溶出介质酶允许添加酶的原因：因明胶表面会产生交联，影响溶出度测定结果，但在体内由于酶的作用，不会影响药物的体内释放。加酶的时
5、机：当胶囊和明胶包衣片的溶出检查结果不符合规定时，可在溶出介质中加入适量的酶。加酶的方式：pH小于6.8的可加胃蛋白酶，pH大于等于6.8的可加胰酶重测。中国药典2015版删除了相关内容。体内外相关性溶出介质的选择吸收部位已知，确定转运机制吸收的限速步骤是溶出还是渗透选择生物相关性溶出介质溶出介质仪器/搅拌装置仪器沉降篮搅拌装置溶出仪器溶出仪器溶出方法篮法桨法桨碟法转筒法流通池法往复筒法小杯法篮法与桨法溶出仪器溶出仪器篮法与桨法一般要求符合药典相关规定几何学与垂直度晃动篮与桨的垂直搅拌速率篮与桨的惰性篮与桨的大小最常用的口服固体制剂溶出方法篮法适用于： 易于漂浮的剂型（胶囊） 内容物分散缓慢的
6、剂型（缓释制剂）桨法适用于片剂、混悬剂溶出仪器其他装置适用制剂1、桨碟法和转筒法：透皮制剂2、流通池法：API溶解性很差的缓释制剂3、往复筒法：微丸缓控释制剂4、小杯法：小型桨法往复筒法与流通池法溶出仪器往复筒法与流通池法往复筒法要求 往复筒平稳、垂直 实验室无振动 往复运动的速率恒定，差异在5% 能观察到样品和往复筒的仪器为好流通池法要求 速度恒定 泵的配置、滤器孔径、待测制剂的组分的适配 样品池保持层流，避免涡流 7池配置，一个为对照品 适合难溶制剂、缓释制剂、pH梯度等研发工作溶出仪器防止漂浮金属线缠绕 注意惰性，注意记录沉降篮溶出仪器溶出仪器转速的选择及其依据 无特殊要求时，一般为25
7、r/min的整数倍转速 释药速度 溶出度 ，反之亦然速释制剂应避免锥体的产生，可适当提高转速。当转速低于25r/min时，会造成流体力学不一致。当转速高于150r/min时，存在紊流的情况。超过上述情况，一般应提供必要的数据证明（如体内生物利用度及其相关性等）试验设计关键点取样点滤膜离心取样目测检视取样点取样点速释制剂 单点：15分钟85% 多点：考察上升区和平台区。 速溶：关注早期取样点。 慢溶：关注后期取样点。缓释制剂至少三点： 前期：防突释。 中期：确定体外释放分布类型。 后期：释放完全。无限取样 完成方法后提高转速维持一段时间，尽量完全释放。可提供含量均匀度和制剂处方特点的信息。试验设
8、计目测检视内容（一）溶出杯中药物颗粒分布不均匀-粘附于杯壁-堆积在杯底-漂浮于液面-非中心堆积溶出杯内壁装置或制剂表面有气泡，脱气是否到位？制剂在溶出介质中旋转，或被桨叶碰到。试验设计目测检视内容（二）药物粒子粘在桨或篮的内侧应在试验完成后观察。包裹在胶囊内容物外的薄膜或类似物；透明的糖精，胶状物，水涨块状物。漂浮有较大的药物颗粒或块状物试验设计目测检视内容（三）观测药品的崩解速率包衣调试制剂和肠包衣制剂复杂的崩解过程其他有价值的现象试验设计取样方式手动取样自动取样对比验证内容试验设计试验设计取样应注意的问题手动取样与自动取样要进行比较验证自动取样应注意日常性能检查和维护自动取样的装置要注意对
9、溶出杯中流体力学的干扰。自动取样的验证还包括： 残留药物的扣减 药物的吸附 洗涤或循环洗涤滤膜吸附及验证滤过与离心滤膜吸附的考察滤膜吸附的验证试验设计试验设计滤过与离心目的：滤除辅料的干扰和未溶解颗粒滤膜的孔径：0.45 -70m，如干扰严重，可选择其他孔径或类型的滤过材料。吸附的考察与验证： 验证的样品：对照品和完全溶解的样品。 验证的方法：对照品应比较滤前和滤后的测定结果。 样品应确认完全溶解后比较滤过与离心的 结果。离心：由于溶解行为在继续，且上清液中存在浓度梯度，因此不作为首选，只有在对所有滤器考量均有吸附后方可采用。测定方法与验证测定方法方法学验证测定方法与验证-测定方法方法的选择
10、总体要求：准确、灵敏、合理、可行紫外分光光度法为首选，优点为快速简便。高效液相色谱法在存在严重干扰的情况下建议采用，优点为灵敏度高，易于自动化。个人观点：满足验证要求的方法均可采用。验证项目专属性线性范围精密度耐用性溶液稳定性准确度测定方法与验证-方法学验证溶出度与释放度的方法学验证干扰来自何方？如何除去干扰？沉降篮胶囊辅料与其他活性成分测定方法与验证-方法学验证专属性测定方法与验证-方法学验证专属性应注意的问题空白包括：其他活性成分（复方制剂中）、辅料、包衣、油墨、沉降篮、胶囊壳、装置（桨、杆、篮）等。缓释制剂用空白制剂优于用空白混粉，便于观察释放过程。干扰应在2%以下。应与准确度/回收率同
11、时进行。线性范围 是否全程覆盖，应从最低浓度到最高浓度。线性计算应用最小二乘法，R20.98，截距接近0。 对照品配制时可增加有机溶剂助溶。 有机溶剂的量不得过5%，否则需要验证。 线性有变化的解决方法。 分段计算，经过验证。测定方法与验证-方法学验证九宫格测定法溶解度测定方法与验证-方法学验证准确度（回收率）测定方法与验证-方法学验证准确度（回收率）取样浓度应覆盖溶出过程的最低和最高浓度。做法：将药物溶解，必要时加入有机溶剂（不超过5%），溶解后，用溶出介质稀释成不同浓度，放入溶出杯中。回收率的接受范围95%-105%。迟释制剂在酸中部分应注意： 浓度较低，应进行验证。 注意药物在酸中降解的
12、情况。 精密度误差的统计评估组间精密度重复性测定方法与验证-方法学验证测定方法与验证-方法学验证精密度重复性：用对照溶液或样品溶液重复测定，计算RSD，也可采用回收率试验中的数据。组间精密度：包括日间、操作人员之间、仪器之间不同组别的精密度。可用均匀度较好的样品，也可用空白片加药物本身。不用做所有浓度，只需要最低最高浓度即可。绝对误差：低于85%的点小于10%，高于85%的点小于5%。必要时可采用相应的统计学方法。 耐用性测定方法综合考虑溶出方法测定方法与验证-方法学验证溶液的稳定性（98%-102%）对照品溶液储存方式供试品溶液储存方式测定方法与验证-方法学验证溶出或释放曲线下降问题测定方法与验证-方法学验证测定方法与验证-方法学验证下降原因分析及解决办法物理下降：难溶性物质的析出。用有关物质条件进行测定，确认无杂质上升。化学下降：用有关物质条件进行测定，确认有杂质上升。-见光分解（可容忍），采用措施，避光操作。-溶出介质，根据具体情况，或更换介质，或改变测定方法。采用高效液相色谱法应注意溶出介质与流动相的相容性。小结注重实操，关注细节。认真验证，数据为优。逻辑缜密，有理有节。宽容有度，得心应手。重点关注1、溶出的目的2、造成溶出差异的因素样品（是我们想知道，想找出的）试验（是不想要的，应降到最低）3、目测检视4、方法学验证谢谢！
