幽门螺杆菌IgG抗体分型检测系统课件.ppt

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1、资料仅供参考,不当之处,请联系改正。幽门螺杆菌的认知1资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 1982年4月,Warren和Marshall发现并分离出幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori; HP ); HP是一种微厌氧、对生长要求十分苛刻的革兰氏阴性杆菌,体内呈螺旋状,体外呈杆状; HP位于胃黏膜上皮表面、胃小弯或小弯之间,在胃窦部多见; 鞭毛在运动中起推进器作用,在定居过程中起抛锚作用;幽门螺杆菌的发现幽幽 门门 螺螺 杆杆 菌菌资料仅供参考,不当之处,请联系改正。幽门螺杆菌的发现2005年澳大利亚科学家Barry J. Marshall和J. Robin Warren,因为发

2、现了导致胃炎和胃溃疡的细菌-幽门螺杆菌而获得诺贝尔奖,委员会在授奖时说:由于幽门螺杆菌的发现,使得原本慢性的、经常无药可救的胃溃疡变成了只需抗生素和一些其他药物短期就可治愈的疾病。Barry J. MarshallRobin Warren(Helicobacter Pylori; HP )资料仅供参考,不当之处,请联系改正。美国/加拿大30-40%拉丁美洲70-90%西欧西欧30-50%非 洲70-90%澳大利亚20%亚洲70-80%东欧70-90%世界范围内幽门螺旋杆菌感染现状Hp在全球的人群的感染率均很高;其中发展中国家的感染率远超发达国家;资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 Hp在亚洲

3、人群的感染率超过40%-80%;幽门螺杆菌感染亚洲现状资料仅供参考,不当之处,请联系改正。华东地区华东地区-59.36%华南地区华南地区-50.08%58.27%-华西地区华西地区华北地区华北地区-46.84%华中地区华中地区-66.26% 我国感染率超过40%-70%左右;幽门螺杆菌中国感染现状资料仅供参考,不当之处,请联系改正。人与人的直接和间接接触传播: 发达国家,口-口传播的可能性大; 发展中国家,则以粪-口传播为主;医源性传播: 胃镜吸引阀、活检孔道及活检钳可分离出Hp; 患者胃镜检查次数越多,Hp阳性率越高;Hp的传播方式资料仅供参考,不当之处,请联系改正。H.pylori 致病机

4、制2资料仅供参考,不当之处,请联系改正。H.pylori进进入机体入机体定植于胃定植于胃上皮细胞上皮细胞刺激机体刺激机体释放各种释放各种细胞因子细胞因子胃粘膜炎胃粘膜炎症、坏死和症、坏死和免疫反应免疫反应胃泌素和胃泌素和生长抑素生长抑素调节失衡调节失衡胃酸分泌胃酸分泌异常异常胃部胃部疾病疾病幽门螺杆菌侵袭性感染进程资料仅供参考,不当之处,请联系改正。幽门螺杆菌侵袭性感染进程毒素胃泌素生长抑素宿主胃粘膜损伤直接免疫反应失衡Hp定值胃酸分泌异常资料仅供参考,不当之处,请联系改正。Hp致病因素Hp产生的产生的尿素酶(尿素酶(Ure)能将尿素分解为氨和二氧化能将尿素分解为氨和二氧化碳,氨在碳,氨在Hp

5、周围形成周围形成“氨云氨云”,影响胃壁细胞表面的局,影响胃壁细胞表面的局部微环境,形成细胞损伤;部微环境,形成细胞损伤;Hp能够产生细胞毒素:能够产生细胞毒素:空泡细胞毒素(空泡细胞毒素(VacA)细胞毒素相关基因细胞毒素相关基因A蛋白蛋白(Cag A);90%的十二指肠溃疡和80%的胃溃疡都是由HP引起的,同时与胃癌的发生密切相关,1994年世界卫生组织已将HP定为类致癌因子; Hp的致病因素主要:v 尿素酶 v 细胞毒素v 鞭毛v 粘附素v 超氧化物歧化酶v 活性氧v 细胞因子资料仅供参考,不当之处,请联系改正。u Vac A:是对上皮细胞有害的细胞毒素,称之为空泡毒素,存在于细胞的外壁,

6、可使上皮细胞因空泡形成而遭受破坏。u Cag A:细胞毒素相关基因A蛋白,可影响细胞毒素的表达。 有研究证实:含Cag A单克隆抗体阳性者比阴性者,患胃癌的危险性高4倍。Hp的致病因素 细胞毒素 Cag A、Vac A被认为Hp最重要的致病因子:Cag A细胞密度胃上皮损伤IL-8分泌炎症改变胃酸分泌诱变剂更快的发展成萎缩性胃炎胃溃疡发生的危险性胃癌发生的危险性资料仅供参考,不当之处,请联系改正。l早期根除HP,胃MALT淋巴瘤可以缩小或消失;l根除Hp 已成为Hp 阳性低级别胃MALT 淋巴瘤的一线治疗方法。l世界卫生组织已将HP列为类致癌因子;lHP感染率与胃癌发生率明显正相关;lHP主要

7、定植部位与胃癌好发部位一致;l浅表性胃炎;弥漫性胃窦炎;多灶性萎缩性胃炎;lHP持续感染,浅表性胃炎可发展为萎缩性胃炎、肠上皮化生和非典型增生(上皮内瘤变),上述病变都属于癌前病变;lHP的发现是消化性溃疡在发病机制及病因学的革命;l“没有胃酸就没有溃疡”;l“没有HP就没有溃疡和溃疡复发”;HP与消化系统疾病资料仅供参考,不当之处,请联系改正。l冠状动脉硬化性心脏病(CHD);缺血性心脏病;l脑血管疾病,中风等;l偏头痛和原发雷诺现象;l缺铁性贫血;l特发性血小板减少性紫癜;l白血病;l肥胖、糖尿病等;幽门螺杆菌与胃外疾病l类风湿性关节炎、自身免疫性甲状腺炎;干燥综合征等;l慢性阻塞性肺疾病

8、(COPD);支气管扩张;l自闭症、抑郁症等;l慢性荨麻疹;食物过敏;酒槽鼻;Maastricht-国际共识中提出HP感染与不明原因缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜症、维生素B12缺乏等等相关性;近几年,关于HP感染与其他疾病的发生,也受了很多重视,如肝胆疾病、脑血管病、皮肤病等等。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。H.pylori 根除治疗及存在问题3资料仅供参考,不当之处,请联系改正。16幽门螺杆菌胃炎是一种感染性疾病传染病幽门螺杆菌胃炎无论有无症状、伴或不伴有消化性溃疡和胃癌,均应该定义为一种感染性疾病根除幽门螺杆菌治疗是改善消化不良症状的一线治疗方案所有感染幽门螺杆菌的个体都需要接

9、受根除治疗 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。三联疗法四联疗法序贯疗法复合疗法治疗策略PPIs + 两种抗生素PPIs + 两种抗生素 + 铋剂PPIs + 两种抗生素 7天PPIs + 另外两种抗生素 14天 四联疗法为基础中药辅助治疗微生物辅助治疗抗生素+PPIs为基础的治疗策略资料仅供参考,不当之处,请联系改正。根除幽门螺杆菌中的临床问题 推荐用于根除治疗中抗菌药物,甲硝唑耐药率60% 70%,克拉霉素达20% 38%,左氧氟沙星达30% 38%,耐药显著影响根除率; 此外抗生素使用的副作用,不良反应发生率高,进而导致患者依从性差;资料仅供参考,不当之处,请联系改正。抗生素的耐药抗生素

10、的副作用抗生素的滥用根治 HP 治疗方案的难点根除幽门螺杆菌中难点资料仅供参考,不当之处,请联系改正。20“发现即根除”策略是否适合我国?高Hp感染率:Hp感染率超过50%,引起胃癌患者只占1%?Hp都是有害菌吗?过分根除是否会引发菌群紊乱?临床根除幽门螺杆菌的思考资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。H.pylori 分型检测的重要意义4资料仅供参考,不当之处,请联系改正。应对措施l解决问题的办法l 医生:有明确适应症再使用抗生素;精准诊断:查明致病病原体;辨别有效抗生素;精准治疗:制定个体化精准治疗方案;病情跟踪;抗生素疗效跟踪;l 患者:正确选择抗生素药

11、物和治疗方式;普及合理使用抗生素知识;准确检测/诊断幽门螺杆菌的重要性资料仅供参考,不当之处,请联系改正。幽门螺杆菌的研究是胃肠道领域最热门的研究课题:1999年,第一次全国幽门螺杆菌专家共识会在海南召开;“1999海南共识”2000年,“中华医学会消化疾病分会幽门螺杆菌学组 ”正式成立;香港大学玛丽医院林兆鑫教授指出:“越来越广泛的检测和治疗HP感染的过程中,出现的第二个问题就是耐药性和感染复发率”;中华医学会消化学会、全国幽门螺杆菌学组副组长胡伏莲教授在“中国幽门螺杆菌研究现状”中指出:“HP耐药性是HP根除失败的主要原因”;幽门螺杆菌的清除中外要有别,中国的清除计划要依据中国国情来建立,

12、不能盲目参照国外方案!在中国,幽门螺旋杆菌的分型性剖析非常重要。幽门螺杆菌共识资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 H.pylori 的毒力因子与分型lH.pylori 菌株的基因型多态性与其致病性有密切的关系,其中最主要的是空泡毒素A(vacA)和细胞毒相关基因(cagA)蛋白。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 H.pylori 的检测分型根据是否表达VacA、CagA抗体,将H.pylori 分为:型(VacA/CagA 抗体阳性), 型(VacA、CagA 抗体阴性)。Hp分离细菌型有毒株型无毒株检测CagA、VacA有无资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 H.pylori 的毒力

13、分型与致病性的关系国内外研究表明,95的十二指肠溃疡、75的胃溃疡病人、80以上的胃癌病人感染的是CagACagA阳性I I型型H.pylori 。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。幽门螺杆菌IgG抗体分型检测系统 泰州欣康基因数码科技有限公司5资料仅供参考,不当之处,请联系改正。泰州欣康基因数码科技有限公司坐落于中国国家级医药高新科技园区江苏泰州中国医药城,成立于 2012年2月,是一家集研发、生产、销售和服务于一体的生物高新科技创新企业。公司所生产的组合式生物芯片获得了行业最高级别的知识产权奖项中国专利金奖和联合国世界知识产权组织金奖。公司介绍资料仅供参考,不当之处,请联系改正。系统构成

14、幽门螺杆菌检测芯片蛋白生物芯片阅读仪数据报告所生产的组合式生物芯片获得了行业最高级别的知识产权奖项中国专利金奖和联合国世界知识产权组织金奖,同时取得两项实用新型专利。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。产品质量体系认证资料仅供参考,不当之处,请联系改正。研发技术团队u 闫小君闫小君原中国人民解放军第四军医大学教授,博士生导师。是国内最早从事基因诊断技术研发和产业化的科学家之一,研发的组合式生物芯片制备技术,获2005年国家发明专利金奖及世界知识产权组织金奖,这是迄今我国生物芯片研究领域所获得的级别最高的知识产权奖项。任泰州欣康基因数码科技公司首席科学家。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。采用

15、微量点样等方法,将大量生物大分子有序地固化于硝酸纤维膜表面;生物大分子组成密集二维分子排列;生物大分子与待测物结构形成抗体复合物,并显色;电荷偶联摄影像机(CCD)对杂交信号的强度进行快速分析;判断待测样品中靶分子的数量;芯片原理资料仅供参考,不当之处,请联系改正。尿素酶(Ure)细胞毒素相关蛋白A(CagA)细胞毒素相关基因A蛋白,可影响细胞毒素的表达,诱导宿主胃粘膜局部产生多种细胞因子。 血清中检测到Gag A抗体是Hp感染的一个高度特异性标志,在慢性胃炎、胃和十二指肠溃疡、胃癌中,Cag A抗体的阳性率分别可以高达67.54%、73.17%、9.00%、53.33%。VacA因其可致细胞

16、空泡变性而得名,与消化性溃疡密切相关,从消化性溃疡患者分离到VacA阳性菌株的频率比慢性胃炎高。细胞空泡毒素A蛋白(VacA)Hp蛋白芯片筛查项目尿素酶是Hp主要抗原之一,也是Hp感染后诱导胃粘膜炎症反应的重要诱发因子之一,所有的野生型的Hp都产生尿素酶,Hp是人胃内产生高活性尿素酶的唯一菌株,可以引起Hp感染患者的血清中抗Hp IgG和IgA的滴度显著升高,因此可以确定是否存在Hp感染,并可以判定感染严重程度和抗Hp疗效。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。指导临床合理用药分型意义CagAVacAUre临床意义型有感染有毒性+重度感染致病菌,建议进行根除治疗+-重度感染致病菌,建议进行根除治

17、疗+-+感染致病菌,建议根据临床症状用药进行根除治疗-+-感染致病菌,建议根据临床症状用药进行根除治疗+-感染致病菌,建议根据临床症状用药进行根除治疗-+-感染致病菌,建议根据临床症状用药进行根除治疗型有感染无毒性-+低毒力株感染,建议进行密切观察,根据临床症状及患者个人意愿进行选择性治疗阴性无感染无毒性-无感染人群分型检测,细分患者类型,服务于临床精准治疗和个体化治疗;指导临床合理用药,打击抗生素滥用,建立行业金标准;资料仅供参考,不当之处,请联系改正。Hp抗体分型检测的重要意义 1分型检测:实现联合检测幽门螺杆菌CagA、VacA、Ure 3种毒力因子的特异性抗原检测,将感染Hp患者细分为

18、型和型,精准检测,指导临床合理用药,打击抗生素滥用,建立行业金标准; 2实现对胃内相关疾病的诊断:对浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡及胃癌诊治有较高的参考价值; 3指导胃外相关疾病的早期诊断:对胃外相关疾病如血液系统疾病、心脑血管疾病、呼吸道疾病等、自身免疫系统疾病的早期发现,早期治疗提供有价值的临床数据。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。方法分类侵入法(依赖内镜活检法)组织细胞学方法光镜法电镜法微生物学方法直接镜检快速尿素酶实验分离培养非侵入法(非内镜依赖法)同位素示踪方法13C、14C呼气试验15N-尿素排出试验血清学方法抗体检测分子生物学方法PCR临床常用HP检测方法比较资料仅

19、供参考,不当之处,请联系改正。公司名称检测项目检测方法检测时间检测样本检测优势泰州欣康基因数码科技有限公司尿素酶(Ure)血清学方法蛋白芯片法5-10min血清检测快速;空泡毒素(VacA)分型检测;细胞毒素(CagA)大数据跟踪;深圳伯劳特生物制品有限公司尿素酶A型(UreA)血清学方法免疫印迹法2h血清不需仪器;尿素酶B型(UreB)空泡毒素(VacA)分型检测;细胞毒素(CagA)安倍医疗器械贸易(上海)有限公司尿素酶(Ure)血清学方法免疫印迹法15min血清/血浆/全血无需设备;检测现症感染;可全血检测;Exalenz Bioscience Ltd.尿素酶(Ure)13C/14C尿素

20、呼气试验1015min吹气只需1h空腹时间;鼻导管自然呼气收集;深圳市中核海得威生物科技有限公司尿素酶(Ure)30min吹气安徽养和医疗器械设备有限公司尿素酶(Ure)30min吹气华亘控股广州华友名康光电科技有限公司尿素酶(Ure)30min吹气华亘控股广州华亘琅博药业有限公司HP多肽抗原粪便抗原法胶体金法10-20min粪便覆盖所有亚型;检测现症感染;幽门螺杆菌非侵入性诊断方法资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 蛋白芯片技术的发展进程幽门螺杆菌发现慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、MALT淋巴瘤相关根除和广泛治疗治疗规范化不够,抗生素滥用,耐药性上升,根除率下降流行病学调查仅少数H.pylo

21、ri 感染患者发展为明显临床疾病,需对致病菌加以识别、筛选,并给予规范化治疗及临床随访临床困惑如何能够快速、简便、无创、高通量的筛选出需要治疗的病人,成为临床医生的困惑和难题蛋白芯片技术目前应用的多种方法难以满足上述需求,蛋白芯片技术为解决这一难题带来希望H.pylori 分型检测蛋白芯片满足临床精准治疗的需求,指导临床合理用药具有巨大意义资料仅供参考,不当之处,请联系改正。幽门螺杆菌IgG抗体分型检测系统临床研究6资料仅供参考,不当之处,请联系改正。临床研究(一)蛋白芯片检测蛋白芯片检测Hp抗体与抗体与Bolt比较比较研究单位:吉林省第三人民医院研究单位:吉林省第三人民医院 辽宁省第三人民医

22、院辽宁省第三人民医院 辽宁中医院大学附属第三医院辽宁中医院大学附属第三医院待考核试剂参比试剂合计阳性(+)阴性(-)阳性(+)37312385阴性(-)8657665合计38166910501050例样本检测结果例样本检测结果结果:阳性符合率:97.90%;阴性符合率:98.21%;总体符合率:98.1%;欣康生产的IgG抗体检测试剂盒(蛋白芯片)与深圳伯劳特生物制品有限公司的抗体分型试剂盒(免疫印迹法)检测结果一致性较好。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。适 用 人 群资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 实现联合检测幽门螺杆菌CagA 、VacA 、UreB 等3种毒力因子的特异性抗体; 系统化、数据化可以实现对胃内相关疾病的诊断、治疗跟踪; 在健康体检中设为常规筛查项目,扩大普查对象; 建立大数据平台,形成大健康慢病管理体系; 打击抗生素滥用,建立行业金标准;分型检测芯片系统的特点资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 谢谢!

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