1、医学微生物学-细菌学 肠杆菌科 Enterobacteriaceae,大连医科大学微生物学教研室 主讲人：张伟,肠杆菌科概述,肠杆菌科：是一大群生物学性状相似的革兰氏阴性短小杆菌 有的为致病菌伤寒沙门菌、志贺菌、鼠疫耶尔森菌等 多为肠道内正常菌群大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等 传染源可能来自动物宿主、带菌者、内源性播散,第一节 埃希菌属 Escherichia,（一）生物学性状 形态与染色： G-杆菌，多数周身鞭毛，有菌毛 培养特性：兼性厌氧。要求不高，普通琼脂（灰白色S型菌落）、EMB（紫黑色菌落），SS（桃红色菌落）,生化反应： 发酵多种糖类，H2S（-），动力（+）；IMViC
2、试验（+-） 抗原： O抗原（01-0173)：与其他属细菌有交叉 H抗原（H1-H56)：无交叉 K抗原（K1-K100)：多糖 血清型表示法O：K：H,（二）致病性 1.致病物质： 粘附素：具有高度特异性，吸附、定植、致病 外毒素： 志贺毒素I和II 耐热肠毒素a和b：激活细胞鸟苷酸环化酶，使cGMP，腹泻 不耐热肠毒素I和II：激活细胞腺苷酸环化酶，cAMP，腹泻 其他： 内毒素、荚膜、载铁蛋白 III型分泌系统：输送毒性基因产物,（二）致病性 2.所致疾病： 肠道外感染：以化脓性感染和泌尿道感染最常见 化脓性感染（腹膜炎、阑尾炎、新生儿脑膜炎等） 泌尿道感染（尿道炎、膀胱炎等），首位
3、来源于病人肠道，为内源性感染（新生儿脑膜炎除外） 大肠埃希菌是败血症病人分离到的最常见的G-菌（45%） 泌尿道感染多来自结肠的大肠埃希菌，为上行性感染；尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）,胃肠炎：与食入污染的食品和饮水有关，外源性感染,（三）微生物学检查 肠道外感染： 标本采集直接涂片镜检分离培养和鉴定，初步依据IMViC(+-)试验 尿路感染时，每毫升10万有诊断价值 肠道内感染： 标本鉴别培养基（如EMB） 分离培养、生化反应、血清分型、毒素测定等 卫生学细菌检查： 大肠菌群：37 24h内发酵乳糖产酸产气的肠道杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属等 卫生标准：大肠菌群1000ml
4、饮水中3个，每100ml瓶装汽水、果汁5个,（四）防治原则 疫苗接种： 菌毛疫苗：防治新生家畜腹泻 ST与LT B亚单位交联疫苗防治ETEC；0157 LPS 治疗： 因耐药质粒，耐药性非常普遍，药敏试验指导下用药 一些治疗和检查应严格无菌操作 污染的水和食品是ETEC、EHEC的重要传染媒介，注意预防,第二节 志贺菌属 Shigella,（一）生物学性状 形态与染色：G-杆菌，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其他肠道致病菌主要区别 营养特性：EMB鉴别培养基上，形成无色半透明、乳糖不发酵菌落,生化反应： 葡萄糖（+）、乳糖（-）（宋内志贺菌迟缓发酵乳糖）、H2S（-）、动力（-）、尿素（-）
5、抗原分型：O抗原，4群40余型 A群：痢疾志贺菌(S. dysenteriae)（10），不能发酵甘露醇 B群：福氏志贺菌（13） C群：鲍氏志贺菌（18） D群：宋内志贺菌（1），具有鸟甘酸脱羧酶 抵抗力： 比其他肠道杆菌弱，对酸和一般消毒剂敏感,（二）致病性 1.致病物质： 侵袭力： 菌毛：黏附肠粘膜上皮细胞 III型分泌系统：穿透上皮细胞，扩散、传播 内毒素： 肠粘膜通透性 ，吸收入血，发热、中毒性休克等 破坏肠粘膜 肠壁植物神经系统，里急后重 外毒素： A群志贺菌I和II型，志贺毒素（类似ETEC产生的毒素） A亚单位裂解60S核糖体亚基上的28S rRNA，蛋白合成中断 上皮细胞损伤
6、、肾小球内皮细胞损伤（HUS）,（二）致病性 2.所致疾病和免疫性： 细菌性痢疾(dysentery)： 传染源：病人和带菌者 传染途径：粪-口途径，人易感（10-150个，常见103个） 感染几乎局限于肠道，一般不入血液 感染类型：急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢（小儿） 临床症状：发热、腹痛、水样腹泻，可转为脓血黏液便，伴里急后重；急性中毒性菌痢表现为全身中毒症状（DIC、多器官衰竭等），死亡率高 免疫性： 抗感染免疫主要是消化道黏膜表面的sIgA,（三）微生物学检查与防治原则 标本采集分离培养和鉴定毒力试验 毒力试验：Sereny试验用于测定志贺菌的侵袭力 防治原则： 预防以人为中心，防止
7、人的感染和传播 易出现多重耐药，药敏试验 因为sIgA需由活菌才能诱发，故应用活疫苗，例如链霉素依赖株（Sd）活疫苗,第三节 沙门菌属 Samonella,概述 一群寄生在人类和动物肠道中，生化反应和抗原结构相关的G-杆菌，是肠杆菌科中最复杂的菌属，有2500种以上血清型 对人类致病 肠热症：伤寒沙门菌（S. typhi），甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌（乙型）、希氏沙门菌 食物中毒：鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌 败血症：猪霍乱沙门菌最常见,（一）生物学性状 形态与染色： G-杆菌，有菌毛，周身鞭毛（除鸡沙门菌和雏鸭沙门菌），一般无荚膜 培养特性：兼性厌氧；EMB、SS等鉴别或选择培养
8、基上，中等大小、无色半透明S型菌落,SS培养基,EMB培养基,生化反应： 乳糖（-）、蔗糖（-）、葡萄糖（+）、多数H2S（+）、动力（+）、尿素（-） 抗原结构： O抗原：LPS中的特异性多糖，分群（组） H抗原：特异性高，分型 Vi抗原：毒力抗原，不稳定 抵抗力： 较差，对一般消毒剂敏感；可耐受胆盐、煌绿（SS选择培养基的成分）,（二）致病性 1.致病物质： 侵袭力： 菌毛：黏附小肠粘膜下派伊尔淋巴结的M细胞 III型分泌系统：扩散、传播 Vi抗原：微荚膜功能，抗吞噬 内毒素： 菌体死亡后释放，发热、白细胞 、中毒症状和休克 外毒素： 个别沙门菌（如鼠伤寒沙门菌），产生肠毒素（类似ETEC
9、产生的毒素）,（二）致病性 2.所致疾病： 传染源：病人和带菌者；污染的水源或贝壳类生物是造成爆发流行的主要原因 传染途径：粪-口途径 肠热症（Enteric fever）： 伤寒（伤寒沙门菌）、副伤寒（甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌） 为胞内寄生菌，经M细胞，吞噬细胞，到肠系膜淋巴结 引起二次菌血症，高热、肝脾肿大、玫瑰疹 使已致敏组织发生超敏反应，局部坏死和溃疡，严重者出血或肠穿孔,胃肠炎（食物中毒）： 最常见的沙门菌感染（70%） 主要致病机制：细菌对肠黏膜的侵袭、内毒素 潜伏期短，6-24h，起病急，病程短2-4天，发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻 败血症： 经口感染，经肠道入血
10、，败血症症状明显而肠道症状不明显 无症状带菌者： 约1%-5%患者，症状消失1年仍可在粪便中检出病原菌,（三）微生物学检查 标本采集 肠热症：第1周（外周血）、第2周（粪便）、第3周（尿液）、第1-3周（骨髓） 食物中毒：粪便和可疑食物 败血症：血液 分离培养和鉴定 增菌（血、骨髓）EMB、SS生化反应血清鉴定,血清学诊断肥达试验 原理：用已知伤寒沙门氏菌O抗原及H 抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门氏菌、肖氏沙门菌等的H抗原与待检血清作凝集试验，测定待检血清中有无相应抗体及其效价（TO、TH、PA、PB） 方法：试管凝集法，TO1:80，TH1:160，PA、PB均1:80才有意义，双份血
11、清抗体四倍升高有诊断意义 临床意义：O 、H抗体均升高，患伤寒的可能性大 O 、H抗体不升高，患伤寒的可能性小 只有H升高，预防接种过或非特异性回忆反应 只有O升高而H不高，则可能是感染早期或其他 沙门菌的交叉反应,（四）防治原则 预防 加强水源和食品的卫生管理 注意发现和治疗健康带菌者 疫苗：伤寒Vi荚膜多糖疫苗 治疗： 因多重耐药菌株的出现，目前有效的药物是环丙沙星,第四节 变性杆菌属 Proteus,（一）生物学性状 形态与染色：G-杆菌，有多形性，有菌毛；周身鞭毛，运动活泼 营养特性：在普通培养基上呈扩散性生长，称为迁徙生长现象，1%石碳酸可抑制此现象,变形杆菌的周身鞭毛,迁徙生长,生
12、化反应： 乳糖（-）、尿素酶（+），迅速分解尿素 外斐试验（Weil-Felix test）： 本菌某些特殊菌株如X19、X2、XK 的O抗原与某些立克次氏体（斑疹伤寒立克次体、羌虫病立克次体）有共同抗原成分，临床上应用OX19、OX2、OXK 代替立克次氏体抗原与斑疹伤寒或恙虫病患者血清做凝集试验，以辅助诊断立克次体病 条件致病： 泌尿道感染：仅次于大肠埃希菌 腹膜炎、脑膜炎、败血症、食物中毒或医院感染,问 题,大肠杆菌所致的肠道外感染有哪些？其引起胃肠炎的致病性埃希菌有哪些？ 肠毒素分为耐热和不耐热两种，它们的致病机制是什么，有何不同？ 我国卫生标准规定，大肠菌数在每升水中不得超过几个？每100ml瓶装水、果汁不得超过几个？ 痢疾杆菌与E.coli何者具有动力？ 痢疾杆菌既具有内毒素，又具有外毒素（志贺毒素）其中志贺毒素的作用机制是什么？,问 题,痢疾杆菌引起何种疾病，其传播途径是？测试志贺菌的侵袭力常用什么实验？ 沙门氏菌所致疾病有哪些？其中肠热证标本的采集要注意什么？ 肥达试验的阳性结果是什么？辅助诊断何种疾病？ 沙门菌的特异性预防使用何种疫苗？ 何种细菌在培养时可出现迁移现象？它在生化反应上的典型特点是什么？其主要引起何种疾病？ 外斐反应的原理和意义是什么?,chance favors the prepared mind！,
